分子生物学复习题（田生礼＆胡章立）.doc

分子生物学（田生礼胡章立）1.DNA复制起始位点的特征是什么？答：复制时，双链DNA要解开成两股链分别进行，所以，这个复制起点呈现叉子的形式，被称为复制叉。对一个生物体基因组而言，复制起点是固定的，表现为固定的序列，并识别参与复制起始的特殊蛋白质。2.DNA二级结构分几类？各类的结构特征是什么？答：通常情况下DNA二级结构分成两大类，右手螺旋有ADNA和BDNA，左手螺旋有ZDNA。DNA的水溶液通常为BDNA，另外AT丰富的DNA片段常呈现BDNA。DNA的双链中一条被相应的RNA所取代，就会形成ADNA。如，在杂交分子或DNA处于转录状态时。BDNA中的多聚GC区易形成左手螺旋DNA，即ZDNA。其中BDNA是最常见的DNA构象，而ADNA和ZDNA似乎不具有生物活性。不同螺旋形式DNA分子主要参数比较双螺旋碱基倾角/（）碱基间距/nm螺旋直径/nm每轮碱基数螺旋方向A-DNA200.262.611右B-DNA60.342.010右Z-DNA70.371.812左3.核小体的构成成分是什么？染色体是如何被包装的？答：核小体：200个左右碱基对的DNA与四种组蛋白结合而成。（1）H2A、H2B、H3、H4各两个组成八聚体，为核心DNA。（2）146BP的DNA在外1.75圈。（3）H1于核心颗粒外20bp处。（4）两个相邻核小体以080bpDNA连接（物种间有差异）。核小体的形成只是DNA包装成染色体的第一步，当离子强度较高且有H1存在时，大量10nm的纤维状染色质细丝（由核小体串联而成）会盘绕成螺旋管状的粗丝，统称螺线管，每个螺旋包含6个核小体，它是分裂间期染色质和分裂中期染色体的基本组分，并可进一步压缩为超螺旋。4.染色体的组成成分哪些？组蛋白与非组蛋白的特征有哪些？答：基本组成成分：DNA、组蛋白、非组蛋白、少量RNA（1）DNA：不重复序列、中度重复序列、高度重复序列（卫星DNA）（2）组蛋白：富含Arg、Lys碱性AA，带正电荷，与DNA带负电荷磷酸基团相互作用。四种：H1、H2A、H2B、H3及H4。特征：进化上极端保守（H3、H4H2A、H2BH1无组织特异性（极少不含H1而含H5肽链上AA分布不对称修饰作用：甲基化、乙酰化、磷酸化、ADP核糖基化、H3、H4作用普遍。H5富含Lys，有种特异性，与H1无明显血缘关系。特征：进化上的极端保守性；无组织特异性；肽链上Aa分布的不对称性；组蛋白的修饰作用；富含Lys的组蛋白H5。（3）非组蛋白：序列特异性DNA结合蛋白，包括酶类、骨架蛋白、核孔复合物蛋白及肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白等。HMG蛋白DNA结合蛋白A24非组蛋白，它们也可能是染色质的结构成份。5.Ecoli DNA聚合酶的组成成分及其功能是什么？答：Ecoli DNA聚合酶由、三种组成。1、都需要模板指导，以dNTP作为底物，且需要3OH的引物链，聚合反应方向为5 3。2、都有35外切活性，起核对作用。3、有、无53外切活性。4、为单一多肽链，、为亚基酶。Ecoli DNA聚合酶不是复制Ecoli 染色体的主要聚合酶，而起了主要的修复作用，在半保留复制中起辅助作用，有53聚合功能，35外切活性，53外切活性和内切酶活性；Ecoli DNA聚合酶活性很低，也不是复制中主要的酶，也主要起DNA修复作用；Ecoli DNA聚合酶是一种多亚基的蛋白，活力较强（的15倍，的300倍），是Ecoli DNA复制中链延长反应的主导聚合酶。6.原核DNA复制与真核DNA复制的主要区别是什么？答：（1）真核生物每条染色质上的复制起始点可以有多处而原核生物只有一个；（2）真核生物的染色体在全部完成复制之前，各个起始点上DNA的复制不能再开始，而在快速生长的原核生物中，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，表现为虽只有一个复制单元，却可有多个复制叉；（3）真核生物DNA复制的起始需要起始原点识别复合物（ORC）参与，且复制叉移动速度远低于原核生物。7.端粒酶是如何延伸DNA末端的？答：端粒酶是一种核酸蛋白复合体(RNP)结构，能以酶本身的RNA成分上的一个片段(RNA核心)为模板合成端粒重复序列，为染色体的DNA末端加尾，或修补已断裂染色体的末端，维护基因组的遗传稳定性。真核生物的端粒复制是一种无模板的从头复制。端粒酶对端粒的加尾是以其内部的RNA核心序列为模板进行的，不需要染色体末端DNA的模板作用。由于染色体末端重复序列中富G(Grich)链的53方向总是指向染色体末端，并且比其反向链长出若干个核苷酸，因而其向外突出的3端就成了端粒酶识别和结合的位点。端粒酶首先对已有的3末端进行识别和结合，然后根据内设RNA 模板，拷贝(逆转录)出互补的DNA链。端粒DNA的Grich链经过端粒酶“自主性”地延长后，再通过GG配对使其终端形成回折，这样DNA复制时新链5端缺失就可以得到补齐。8.原核DNA聚合酶与真核DNA聚合酶在功能上相对应的关系如何？答：原核DNA聚合酶：真核DNA聚合酶：9.试述大肠杆菌DNA聚合酶III复制DNA的基本过程。答：该酶对模板的要求与DNA聚合酶相同，最适模板也是链DNA中间有空隙的单链DNA，单链结合蛋白可以提高该酶催化单链DNA模板的DNA聚合作用。DNApol也有35和53外切酶活性，但是35外切酶活性的最适底物是单链是DNA，只产生5-单核苷酸，不会产生二核苷酸，即每次只能从3端开始切除一个核苷酸。53外切酶活性也要求有单链DNA为起始作用底物，但一旦开始后，便可作用于双链区。DNA聚合酶是细胞内DNA复制所必需的酶，缺乏该酶的温度突变株在限制温度(non permissive temperature)内是不能生长的，此种突变株的裂解液也不能合DNA，但加入DNA聚合酶则可以恢复其合成DNA的能力。10.复制复合体的组成成分及其主要作用？答：双链DNA的复制是一个涉及酶活动的复杂聚合反应过程。可分为起始、延伸和终止三个不同阶段。起始涉及DNA原点被一个复杂的蛋白质所识别。在DNA合成之前，母链必须解开，并短暂保持单链状态。然后子链的合成可以在复制叉起始。在大肠杆菌中，一个DNA链起始是通过一个称为引发体的蛋白复合体完成的。延伸则是由另一个蛋白复合体完成，称为复制复合体。它只有在DNA的特定复制叉结构与一些蛋白质结合时才存在，且不作为一个独立的单位存在(与核糖体相类似)。当复制复合体沿DNA移动时，母链解开，子链合成。11.转座子的分类和结构特征。答：转座子：存在于染色体DNA上，可自主复制和位移的基本单位。转座：一个转座子由基因组的一个位置转移到另一个位置的过程。结构和分类：1、插入序列（IS）：不含任何宿主基因，本身不具表形效应，只有转座到某一基因附近或插入某一基因内部后，引起失活或极性效应才可判断其存在。结构：（1）很小的DNA片断，1kb。 （2）末端有倒置重复序列。 （3）转座时往往宿主靶位点一小段DNA形成IS两端的正向重复序列。 （4）除IS1外，所有已知IS序列只有一个开放读码框。2复合转座因子：一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子。结构：功能基因两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。（表明IS序列插入到某个功能基因两端时可能产生复合转座子）。*转座能力由IS序列决定和调节。TnA家族：有3个基因，其中一个编码内酰胺酶，另两个是转座作用必须的。遗传效应：（1）插入突变：若位于某操纵子之前，可能极性突变，失活。（2）残生新基因。（3）产生染色体畸变：若复制性转座发生在原有位点附近时，导致两个拷贝同源重组，引起DNA缺失或倒位。（4）引起生物进化：可使原来相距甚远的基因组合倒一起，构建成一个操纵子单元，也可能产生新功能蛋白。12.DNA损伤和修复有哪些？答：1、切除修复：（1）碱基切除：在糖苷水解酶等一系列酶的作用下，将受损部位产生的AP位点核苷酸在内的DNA小片段切除，由DNA polyaseI以另一条完整链为模板合成新片断，由DNA连接酶连接新链的过程。（2）核苷酸切除：核苷酸发生损伤后，由DNA切割酶在已损伤的核苷酸3、5分别切开磷酸糖苷键，移去小片断后由DNA polyaseI合成新片断，并由DNA连接酶完成修复中的最后一道工序。2、错配修复：Dam甲基化酶可使DNA5的GATC序列中腺苷酸N6位甲基化。一旦复制起始。母链就会在开始复制前几秒至及分钟内部被甲基化，只要两条DNA碱基出现错配，修复系统会“保存母链，修正子链”，使子链中错配碱基被切除修复。3、直接修复：把被损伤的碱基回复到原来的状态，并不需要切除碱基或核苷酸，光复活作用:DNA光解酶。 O6甲基鸟嘌呤脱甲基化的甲基化转移酶 GT错配 单链断裂修复4、重组修复：复制后修复，机体细胞可以对再复制起始时尚未修复的DNA损伤部位可以先复制再修复。5、易错修复和SOS应急反应：生物体为保细胞存活，受损部位既使出现不配对碱基也照样复制，出现高突变率。13.掌握转录的基本过程？真核与原核生物RNA聚合酶的组成成分及其作用。答：转录的基本过程大致如下：模板识别：RNA聚合酶与启动子区相互结合。转录起始前，启动子附近的DNA双链会分开形成转录泡，促使底物NTP，与模板DNA配对。转录起始：RNA上第二个核苷酸键的产生。转录起始后直到形成9个核苷酸短链使通过启动子阶段，转录开始进入正常的延伸阶段。转录的延伸：RNA聚合酶离开启动子，沿DNA链移动，DNA双链持续解开，新生RNA链以DNA为模板不断在3端延长，在接连区形成DNA-RNA杂合物。在解链区后面，DFNA模板链与原先配对的非模板链重新结合成双螺旋。转录终止：延伸到终止位点时，RNApolyase不再形成新的磷酸二酯键，RNA-DNA杂合物分离，转录泡瓦解，DNA恢复双链，RNA被释放。真核生物中共有三类RNA聚合酶，其结构比大肠杆菌RNA聚合酶更复杂，具体如下：酶细胞内定位转录产物相对活性敏感程度RNApolyase核仁rRNA5070RNApolyase核质hnRNA2040RNApolyase核质tRNA10存在物种特异1、三种聚合酶中有两个行对分子量超过1105的大亚基；2、同种生物3类聚合酶有“共享”小亚基的倾向。3、线粒体和叶绿体RNA聚合酶活性不受鹅膏蕈碱所抑制。14.转录的起始、方向，前导链与后随链的合成。真核生物与原核生物在基因转录过程中有哪些异同点？答：转录的起始从化学过程来看是单个核苷酸与开链启动子-酶复合物相结合构成新生RNA的5端，再以磷酸二酯键的形式与第二个核苷酸相结合，起始的终止反映在因子的释放。转录方向是53。在起始序列的结构特征上：原核：10TATA区，35TTGACA区，启动区范围较小。真核：2535TATA区，7080CAAT区，调控区较大，还拥有GC区和增强子区。15.真核生物转录起始复合体（TIC）的组成成分有哪些？答：DNA模板，游离的核糖核酸，含因子的RNA聚合酶，转录调控因子。真核生物RNA聚合酶不能直接识别基因的启动区，所以需要一些被称为转录调控因子的辅助蛋白按特定顺序结合在启动子上，RNA聚合酶才与之结合成复杂的前起始复合物。16.内含子的剪切方式分哪几类？剪切过程如何？答：mRNA前体中主要（GU-AG类）和次要（AU-AC类）内含子的剪接方式不同的是、类内含子，因为带有这些内含子的RNA本身具有催化活性，能进行内含子的自我剪接。型：1、鸟苷或鸟苷酸的3OH作为亲核基团攻击内含子5端磷酸二酯键，从上游切开DNA链；2、再由上游外显子（第一个）的自由3OH作为亲核基团攻击内含子3核苷酸的磷酸二酯键，使内含子被完全切开（不发生水解，无需供能）；3、上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键相连。型：1、内含子本身的某个腺苷酸2OH作为亲核基团攻击5端的磷酸二酯键，从上游切开RNA链后形成套索状结构；2、再由上游外显子的自由3OH作为亲核基团攻击内含子3位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子被完全切开；3、上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键相连。mRNA：许多分子量较小的核内RNA（U1,U2,U4,U5,U6）以及与这些RNA结合的核蛋白（snRNA）参与RNA剪接。1、mRNA链上每个内含子3，5分别与不同snRNP相结合，形成RNA-RNP复合物；2、一般，由U1snRNA以碱基互补的方式识别mRNA前体5剪接点，由结合再3剪接点上游富含嘧啶区的U2AF识别3剪接点并引导U2snRNP与分支点相结合，形成剪接体，并进一步与U4,U5,U6snRNP三聚体相结合，形成60s剪接体，进行RNA前体分子剪接。保守序列GU-AG,AU-AC次要区别：、型剪接本身具有催化功能，属于核酸催化，类需游离鸟苷或鸟苷酸启动，类无需，mRNA剪接属于蛋白催化。17.原核细胞的转录终止子有哪些？如何作用的？答：终止子：能提供转录终止信号的DNA序列。终止因子：协助RNA聚合酶识别终止信号的蛋白因子。在原核细胞中有两种不同的终止子，一种是强终止子，另一种是弱终止子。强终止子在体外实验中，无需其它任何因子的帮助就可以终止核心酶，这种终止子被称为内部终止子。弱终止子需要在一种蛋白质因子的帮助下才能终止，所以又称为依赖性终止子。1、不依赖因子的终止（强终止子）终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区，转录产生的RNA易形成发卡结构；终止位点前有一端由48个A组成的序列，转录产物的3端的寡聚U。新生DNA中的发卡结构会导致RNA聚合酶的暂停，破坏RNA-DNA杂合链5端的正常结构；寡聚U使杂合链的3部分出现不稳定rUda区域。两者共同作用使RNA从三元复合物中解离出来。终止效率与二重对称序列和寡聚U的长短有关。2、依赖因子的终止（弱终止子）无GC二重对称序列及寡聚U。因子使一个相对分子量2.0105六聚体蛋白，是一种NTP水解酶。RNA合成起始后，因子即附着在新生的RNA链上，靠ATP水解能量，沿53朝RNA聚合酶移动，到达RNA的3OH端后取代了暂停在终点位上的RNA聚合酶，使之从模板DNA释放nRNA，完成转录。18.原核基因调控机制的类型与特点答：1.负转录调控：调节基因的产物是阻遏蛋白，起阻止结构基因转录的作用。(1)负控诱导:阻遏蛋白不与诱导物结合时,结构基因不转录;(2)负控阻遏:阻遏蛋白与诱导物结合时,结构基因不转录.2.正转录调控:调节基因的产物是激活蛋白.(1)正控诱导系统:诱导物的存在是激活蛋白处于活性状态;(2)正控阻遏系统:诱导物使激活蛋白处于非活性状态.19.乳糖操纵子和色氨酸操纵子答：大肠杆菌乳糖操纵子：乳糖开动大肠杆菌乳糖操纵子表达利用乳糖的三个酶细菌利用乳糖。乳糖操纵子的控制模型内容（1）Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码；（2）该mRNA的启动区（P）位于阻遏基因（I）与操纵区（O）之间，不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达；（3）操纵区是DNA上的一小段序列（26bp），是阻遏物的结合位点；（4）当阻遏物与操纵区结合时，Lac mRNA的转录起始受到抑制；（5）诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵区相结合，激发Lac mRNA的转录。大肠杆菌色氨酸操纵子：加入色氨酸阻遏色氨酸操纵子相关合成酶基因关闭。色氨酸操纵子与负控阻遏系统Trp体系参与生物合成而不是降解;Trp合成分5步,有7个基因参与.组成包括:阻遏基因（R）、启动区(P)、操纵区（O）、前导区（L）、弱化区（a）和结构基因区；Trp操纵子的转录调控包括阻遏系统和弱化系统.20.原核与真核基因表达调控的异同答：（1）真核基因表达调控的环节更多；基因表达是基因经过转录、翻译、产生有生物活性的蛋白质的整个过程。同原核生物一样，转录依然是真核生物基因表达调控的主要环节。但真核基因转录发生在细胞核(线粒体基因的转录在线粒体内)，翻译则多在胞浆，两个过程是分开的，因此其调控增加了更多的环节和复杂性，转录后的调控占有了更多的分量。此外，真核细胞中还会发生基因扩增，即基因组中的特定段落在某些情况下会复制产生许多拷贝。这无疑能够大幅度提高基因表达产物的量，但这种调控机理至今还不清楚。（2）真核基因的转录与染色质的结构变化相关；真核基因组DNA绝大部分都在细胞核内与组蛋白等结合成染色质，染色质的结构、染色质中NA和组蛋白的结构状态都影响转录。染色质中的基因转录前先要有一个被激活的过程，但目前对激活机制还缺乏认识。（3）真核基因表达以正性调控为主。真核RNA聚合酶对启动子的亲和力很低，基本上不依靠自身来起始转录，需要依赖多种激活蛋白的协同作用。真核基因调控中虽然也发现有负性调控元件，但其存在并不普遍；真核基因转录表达的调控蛋白也有起阻遏和激活作用或兼有两种作用者，但总的是以激活蛋白的作用为主。即多数真核基因在没有调控蛋白作用时是不转录的，需要表达时就要有激活的蛋白质来促进转录。21.DNA水平的表达调控答：染色质的丢失：不可逆核的全能性（totipotency）：细胞核内保存了个体发育所必需的全部基因基因扩增(gene amplification)：增加基因的拷贝数非洲爪蟾卵母细胞rRNA基因卵裂时，扩增2000倍，达1012个核糖体药物：诱导抗药性基因的扩增；肿瘤细胞：原癌基因拷贝数异常增加基因重排(gene rearrangement)：将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录。如免疫球蛋白基因重排DNA甲基化(DNA methylation)：mCpG，即“CpG岛”：在DNA上成串出现，通常被甲基化，极易自发脱氨形成胸3腺嘧啶。甲基化(methylated)程度高，基因表达降低；去甲基化(undermethylated)：基因表达增加DNA甲基化能引起染色体结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式改变控制基因表达染色质(chromatin)或染色体(chromosome)结构对基因表达的调控（1）“开放”型活性染色质结构对转录的影响：转录发生前，染色质在特定区域被解旋松弛，使转录因子与启动区DNA结合诱导转录。（2）“灯刷型”染色体上的环形结构与基因的转录活性：两栖类动物卵细胞减数分裂时才能观察到是最活跃的转录区结构。DNA甲基化与X染色体失活雌性胎生哺乳动物细胞中两条X染色体之一在发育早期随机失活X染色体失活中心(X-chromosome inactivation center,Xic):Xist基因(Xi-specific transcript)22.转录水平的表达调控答：最重要、最经济的调控方式顺式作用元件(cis-acting element)反式作用因子(trans-acting factor)转录起始的调控顺式作用元件(cis-acting element)影响自身基因表达活性的DNA序列非编码序列分启动子、增强子、沉默子 启动子真核基因启动子：由核心启动子和上游启动子两部分组成，是基因转录起始位点（+1）及5上游大约100-200bp以内的一组具有独特功能的DNA序列，是决定RNA聚合酶II转录起始点和转录频率的关键元件。核心启动子：保证RNA聚合酶II转录正常起始所必需的最少的DNA序列。包括转录起始点和上游-25-30bp处的TATA盒。上游启动子元件(upstream promotor elements,UPE)：-75bp处 CAAT 盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等，能通过TFIID复合物调节转录起始的频率。增强子及其对转录的影响增强子：能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。如SV40上游的两个72bp正相重复序列。作为基因表达元件，增强子具有的特点： 见教材P257。呈环状结构，其功能受DNA双螺旋空间构象的影响。增强子的作用原理1影响模板附近的DNA双螺旋结构，导致DNA双螺旋结构弯折，活化基因转录；2将模板固定在细胞核内特定位置，有利于DNA拓扑异构酶改变DNA双螺旋结构的张力，促进RNA聚合酶II在DNA链上的结合和滑动。3增强子区可作为反式作用因子或RNA聚合酶进入染色体的入口。感染真核细胞的病毒DNA，大多具有可被寄主细胞蛋白质激活的增强子。小鼠乳腺瘤病毒（MMTV）的DNA，具有糖皮质激素基因的增强子。在能被类固醇激活的细胞（如乳腺上皮细胞）中，MMTV病毒能旺盛生长。病毒有寄主范围，因它有组织特异和物种特异的增强子。沉默子(silencer)沉默子(silencer)：负性调节元件，起阻遏作用。反式作用因子(trans-acting factor)能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。概念：为DNA结合蛋白，核内蛋白，可使邻近基因开放（正调控）或关闭（负调控）据转录因子在转录中的作用分为：（1）通用或基本转录因子(general transcription factors)RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子。TFA、 TFB、 TFD、 TFE等（2）特异转录因子( special transcription factors)个别基因转录所必需的转录因子.OCT-2：在淋巴细胞中特异性表达，识别Ig基因的启动子和增强子。反式作用因子特点三个功能结构域：DNA识别结合域(DNA-binding domain)；转录活性域(transcriptional activation domain)；结合其他蛋白的结合域能识别并结合顺式作用元件(cis-acting element)正调控与负调控反式作用因子结构域的模式DNA结合域(DNA- banding domain) 锌指结构(zinc finger motif) 同源结构域(homodomain,HD) ： 螺旋- 回折- 螺旋(helix-turn-helix) 亮氨酸拉链 结构 (leucine zipper) 螺旋- 环- 螺旋(helix-loop-helix,HLH) 碱性 螺旋(alkaline -helix)反式作用因子结构域的模式转录活化结构域(transcriptional activation domain)酸性-螺旋结构域(acidic helix domain):含酸性的螺旋结构,本身特异性诱导转录起始的活性不强,但与通用转录因子结合后,具有稳定转录起始复合物的作用.富含谷氨酰胺结构域(glutamine-rich domain):富含谷氨酰胺.富含脯氨酸结构域(proline-rich domain):富含脯氨酸,很难形成-螺旋.转录起始的调控反式作用因子的活性调节合成后即有活性：需要时合成，可迅速降解共价修饰：磷酸化-去磷酸化，糖基化配体结合：如激素与受体的结合蛋白质与蛋白质相互作用：二聚体反式作用因子与顺式作用元件的结合转录起始的调控反式作用因子的作用方式成环、扭曲、滑动、Oozing等 反式作用因子的 组合式调控 作用(conbinatorial gene regulation) 使有限的反式作用因子可以调控不同基因的表达 23.癌症基因治疗和HIV答：基因治疗传统治疗：除外科手术以及一些物理治疗方法以外，主要是通过使用药物对人体缺乏的物质进行补充或者通过干预机体的代谢，改善人体的健康状况。基因治疗：将外源性遗传物质导入目的器官、组织或细胞并显示出相应的生物学效应，从根本上防治疾病的方法。 基因置换：导入正常外源基因，替换疾病基因（同源重组）基因修正：原位修复致病基因的功能，不一定改变致病基因的核苷酸序列（点突变）基因修饰：导入有功能的目的基因于病灶或相关细胞，利用目的基因的表达产物补偿疾病基因的功能，但致病基因本身不改变。（广泛使用）基因抑制：导入外源基因，阻断原有基因表达。（p53抑癌基因的应用）基因封闭：利用反义核酸阻断有害基因表达。（肿瘤的治疗）基因治疗研究的基本过程选择、获取治疗基因设计基因导入方案构建基因治疗载体基因导入动物模型培养细胞基因转移（导入）的方法目前使用的基因转移系统病毒介导的基因转移非病毒介导的基因转移在病毒介导的基因转移系统中以逆转录病毒（70%）和腺病毒用得最为广泛目前常用的基因治疗方式间接体内（ex-vivo）法取组织进行细胞培养转入目的基因确定目的基因转入并按要求表达将改造过的细胞种植或输入体内体内原位（in situ）法将目的基因构建于病毒或质粒载体或用脂质体包裹转导入靶细胞裸DNA直接注射靶组织或靶器官具体方式：1.病灶部位直接注射；2.腔道内灌注，如注入膀胱、关节腔、胸腹腔、脑室和蛛网膜下腔等；3.器官选择性血管内注入体内（in vivo）法像体内注入药物一样，肌注或静脉注射基因枪轰击人免疫缺损病毒(HIV)反转录病毒科,慢病毒属,灵长类免疫缺损病毒亚属.1983年法国巴斯德研究所Montaginer 和美国国家卫生研究院癌症研究所Gallo等首次证实了HIV是艾滋病的病因.发现HIV-I(欧美),HIV-II(西非)HIV病毒粒子的形态结构与传染直径=100nm感染T淋巴细胞,也可感染B淋巴