骨髓细胞形态学检验PPT课件.ppt

第三节血细胞形态学特征 一 血细胞发育过程中形态学演变的一般规律血细胞发育 从原始到成熟有一定的规律性1 细胞体积 1 胞体由大到小 普通规律 2 特殊规律 早幼粒大于原粒细胞巨核细胞体积增大 1 2 细胞质 1 量由少到多 2 染色由深蓝到浅蓝 3 颗粒 从无 有 嗜天青颗粒 特异性颗粒3 细胞核 1 大小 由大到小 由规则到不规则 巨核细胞核由小到大 2 染色质 细致疏松 粗糙 成块4 核 质比例 由大到小 2 3 二 血细胞的形态学特征1 红细胞系 1 原红 normoblast 15 22um 2 早幼红 basophilicnormoblast 11 20um 3 中幼红 polychromaticnormoblast 8 18um 4 晚幼红 ortho chromaticnurmblast 7 12um 5 网织红 RC 7 4um 6 成熟RBC RBC 7 4um 4 2 粒细胞系统 1 原粒细胞 myeloblast 11 18um 2 早幼粒 promyelocyte 12 22um 3 中幼粒 myelocyte 中性中幼粒 neutrophilicmyelocyte 10 18um 嗜酸性中幼粒 eosinophilicmyelocyte 15 20um 嗜硷性中幼粒 basophilicmyelocyte 10 15um 5 4 晚幼粒细胞 metamyelocyte 10 16um 中性 嗜酸 嗜硷 5 杆状核粒细胞 stabgranulocyte bandgranulocyte 中性 嗜酸 嗜硷 6 分叶核粒细胞 segmentedgranulocyte 中性 嗜酸 嗜硷 6 3 淋巴细胞系统 1 原淋巴细胞 Lymphoblast 10 18um 2 幼淋巴细胞 prolymphocyte 10 16um 3 淋巴细胞 lymphocyte 大淋巴细胞 小淋巴细胞 7 4 浆细胞系统 1 原浆细胞 plasmablast 15 20um 2 幼浆细胞 proplasmacyte 12 16um 3 浆细胞 plasmacyte 8 20um 8 5 单核细胞系统 1 原单核细胞 monoblast 15 25um 2 幼单核细胞 promonocyte 15 25um 核可见凹陷 切迹 扭曲或折叠 3 单核细胞 macrophage 12 20um 核呈肾形 马蹄形 笔架形及 S 形 4 吞噬细胞 macrophage 单核细胞 组织细胞 巨噬细胞或吞噬细胞 9 6 巨核细胞学 1 原巨核细胞 megakaryoblast 15 30um 2 幼巨核细胞 promegakaryocyte 30 50um 3 颗粒型巨核细胞 granularmegakaryocyte 50 70um 4 产板巨 thronbocytogenousmegakaryocyte 5 巨核细胞裸核 nakednucleus 10 7 其它细胞 1 网状细胞 3 纤维细胞 2 内皮细胞 4 组织嗜硷 5 成骨细胞 6 破骨细胞 11 三 细胞化学染色概念 1 细胞形态学为基础 2 对骨髓片按一定程序染色 3 显微镜下观察 细胞化学成分及其变化 12 一 过氧化物酶染色1 原理 细胞中的POX peroxidase H2O2 O2 氧化联苯胺呈蓝色 亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色颗粒 2 结果 1 阴性 无颗粒 2 弱阳性 细小颗粒分散 3 强阳性 颗粒粗大而密集3 意义 1 急粒 强阳性 2 急单 弱阳性 3 急淋 阴性 13 二 中性粒细胞碱性磷酸酶染色1 原理 NAP neutrophilalkalinephosphatase 的显示方法有偶氮偶联法 NAP PH9 4 9 6 磷酸茶酚钠 茶酚 重氮盐 形成灰黑色沉淀 定位于酶活性处 14 2 结果 1 5级分类0级 阴性1级 2级 3分 4分 4 2 阳性率报告 计数100NC中阳性细胞分率 3 积分报告 100NC细胞的累积分数 15 3 参考区间 NAP 阳性率 10 40 积分 40 80分4 临床意义 1 感染性疾病的诊断 鉴别细菌或病毒感染 2 CML和类白血病鉴别 3 AA与PNH鉴别 16 17 三 酸性磷酸酶染色1 原理 ACP acidphosphatase ACP PH5 0 甘油磷酸钠 磷酸钠 硝酸铅 磷酸铅沉淀 硫化铵反应 棕黑色硫化铅沉淀 2 结果 胞质内出现棕黑色颗粒为阳性反应 18 3 意义 1 多毛细胞白血病 hairycellleukemia HCE 诊断 HCL为阳性不被L 酒酶抑制 2 T B淋巴细胞鉴别 T阳性 B阴性 3 协助鉴别Gaucher病与Niemann Pick病 Caucher阳性 Niemann Pick阴性 4 单核细胞 组织细胞 网状细胞 巨核细胞ACP阴性 19 20 21 四 氯化醋酸AS D茶酚酯酶染色1 原理 AS D SE 氯化醋酸AS D茶酚 AS D 重氮盐GBC偶联 红色沉淀定位于胞浆中2 结果 粒系 阳性或强阳性反应单核 阴性或弱阴性反应淋巴 嗜酸细胞 浆细胞 阴性反应3 意义 1 急粒 阳性或强阳性 2 急单 急淋 阴性反应 22 23 五 醋酚茶酚酯酶染色1 原理 NAE 醋酸茶酚 茶酚 重氮盐染料偶联 黑色沉淀定位于胞浆中 2 结果 1 单核细胞 阳性 灰黑色沉淀 2 粒细胞 弱阳性3 淋巴细胞 阴性3 意义 1 急单 强阳性反应2 急粒 弱阳性反应 24 25 六 糖原染色1 原理 PAS反应过典酸 糖原 醛基 无色品红 紫红色化合物2 结果 1 阳性 颗粒状 小块状或弥漫均匀红色 2 分为 强阳性 弱阳性和阴性或阳性百分率 3 粒系 原粒阴性 早幼粒以下阶段阳性反应程度渐增强 单核弱阳性 淋巴细胞阴性 红系 阴性 巨核 阳性 26 3 意义 1 红血病与巨幼贫鉴别 前者幼红细胞阳性 后者幼红细胞阴性2 白血病 急粒 阴性或弱阳性急淋 原幼淋阳性呈粗颗粒状或块状急单 呈弥漫均匀或细颗粒状3 其它 Gaucher细胞 阴性Niemann Pick 阴性 27 28 29 七 铁染色 1 原理 1 铁 铁蛋白或含血黄素 单核 吞噬细胞质内 2 Fe3 亚铁氰化钾 铁氰化铁沉淀 普鲁土蓝 2 结果 1 细胞外铁 一 1 4 2 细胞内铁 含有铁颗粒的幼红细胞 铁粒幼红细胞 油镜下计数100个幼红细胞计算其阳性率 I II 和环状铁粒幼细胞 30 3 参考值 1 细胞外铁 1 2 大多为2 2 细胞内铁 20 90 4 意义 1 缺铁性贫血诊断 2 非缺铁性贫血 如AA 铁粒幼细胞性贫血 溶贫 巨幼贫 内外铁增加 3 MDS RARS 环状铁粒幼细胞 15 31 32 33 四 细胞免疫分型 1 用单抗和免疫学技术检测细胞表血特异性2 分化抗原 细胞所属系列 分化程度及功能状态 一 检测方法 1 免疫荧光法 immmeofluoresencetechnique 1 原理 荧光标记的单抗 细胞表面分化抗原结合 产生荧光 用荧光显微镜和流式细胞仪检测 直接荧光法 间接荧光法 2 参考值 有荧光 阳性细胞无荧光 阴性细胞 34 2 免疫酶染色法 1 APAAP法 碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法 一抗 CD抗原 AKP标记二抗 底物显色 2 PAP法 过氧化物酶抗过氧化物酶法 一抗 CD抗原 POX标记抗体 底物显色 3 ABC法 亲和素 生物素 酶复合物 法 一抗 CD抗原 生物素标记二抗 HRP标记亲和素 底物 35 36 37 38 二 细胞免疫分型的临床应用1 有助于识别不同系列的细胞 髓系 CD13 CD14 CD15 CD32 CD33 CD65 CD91 CD156 CD166淋巴系 CD1 CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8 CD9 CD10 CD19 CD20 CD52 CD77巨核系 CD41 CD42 CD612 识别不同的淋巴细胞 T系统 CD2 CD3 CD4 CD7 CD8B系统 CD19 CD20 CD22NK CD16 CD56 39 3 用于T淋巴细胞亚群检测 T CD3 TH CD4 CD8 TS CD4 CD8 4 用于识别不同分化阶段的细胞 1 造血干细胞 CD34 CD90 lin 2 髓系祖细胞 CD34 CD33 3 T淋巴细胞系祖细胞 CD34 TDT CD10 CD7 4 B淋巴细胞系祖细胞 CD34 CD19 40 5 有助于识别不同功能状态的细胞 记忆T细胞 CD45RO高表达 CD45RA不表达活化T细胞 CD45RA不表达 CD25 CD2 CD45RO CD54 CD58均强表达 41 6 用于不同系列和不同分化阶段的细胞进行分离 分选的流式细胞仪7 白血病的免疫分型8 可用于白血病微小残留病检测 1 CD病人 CD19 CD22 CD10 CD7 CD5 CD13 CD37 CD34阳性并伴有TbT 则可诊断微小残留病存在 2 敏感性 10 4水平 42 三 急性白血病细胞免疫表型特点 43 44 45 五 细胞遗传学分析1 染色体检查方法2 染色体分析 1 染色体命名 46条 22对常染色体 1对性染色体 男46XY 女 46XX A G7组 ZP35表示 46 2 核型分析及其书写 1 书写顺序 染色体数目 性染色体 染色体异常 2 染色体变异以小写表示 t 易位iso或i 等臂染色inv 倒位ins 插入del 缺失r 环状染色 丢失 增加 47 3 第一括号内表示染色体数目 第二括号内表示染色体区带 4 P表示短臂 q表示长臂 5 45 X Y t 8 21 q22 q22 表示45条染色体 丢失Y染色体 第8号与第21号染色体之间易位 断裂点在8号染色体长臂2区2带与21号染色体长臂2区2带 3 染色体畸变 1 二倍体 2n 2 数目畸变 整倍体和非整倍体 3 亚二倍体 比2n少 4 超二倍体 比2n多 48 2020 1 7 49 50 51 52 第五节 常见血液病的血液学特征 一 贫血贫血 anemia 指单位容积循环血液中红细胞数 血红蛋白量及血细胞比容 Hct 低于参考值低限 贫血是一种症状 53 一 缺铁性贫血 1 定义 IDA irondeficiencyanemia 由于缺铁而造成的贫血 2 血象 1 Hb RBC下降 Hb下降更明显 2 血片 RBC体小 淡染 中心区扩大 MCV MCH MCHC均下降 3 RC轻度增多或正常 4 WBC PLT正常 54 3 骨髓象 1 增生明显活跃 2 红系 明显增生 30 以中 晚幼红为主 胞体小胞质少 嗜碱性 核小 固缩 3 粒细胞等相对减少 巨核系正常 55 56 二 溶血性贫血 1 定义 HA hemolyticanemia 是由于各种原因使红细胞寿命缩短 破坏增加 超过了骨髓的代偿功能所致的贫血 2 血象 1 Hb RBC平行下降 2 血片 RBCRA不一 易见大RBC 嗜多色红细胞及有核红细胞 可见H J小体 Cabot环 点彩RBC 也见特殊RBC 球形RBC 靶形RBC 椭圆RBC 裂红细胞 3 RC 明显增多 4 WBC PLT增多或正常 57 3 骨髓象 1 增生明显活跃 2 红系 明显增多 可 30 50 以中晚幼红为主 可见核畸形 H J小体 嗜硷性点彩等 3 粒系相对减少 形态正常 4 巨核系正常 58 59 三 巨幼细胞贫血1 巨幼贫 megaloblasticanemia 由于叶酸及VitB12缺乏使DNA合成障碍所引起的一组贫血 2 血象 1 Hb RBC下降 RBC下降更明显 2 血片 RBC大小不等 可见嗜多色 点彩 H J小体 Cabot环 3 RC轻度增加 4 WBC减少 分叶过多 在4 5叶以上 5 Plt减少 60 3 骨髓象 1 增生明显活跃 2 红系 40 巨幼变 3 粒系 巨幼变 4 巨核系 巨幼变及分叶 61 62 四 再生障碍性贫1 再障 aplasticanemiaAA 是由于多种原因所致骨髓造血干细胞减少和功能异常导致三系减少 2 症状为 感染 贫血和出血 3 分型 急性和慢性 63 1 急性型 1 血象 Hb RBC明显减少 RC 0 5 109 L或O WBC 1 0 2 0 109 L L占60 plt 20 109 L或 10 109 L 2 骨髓象 增生明显减低 三系明显减少 非造血细胞增多 骨髓小粒以非造血细胞为主 64 65 66 2 慢性型 1 血象 Hb RBC平行下降 为中 重度贫血 RC 15 109 L WBC 2 0 3 0 109 L L占50 plt 30 109 L 50 109 L 2 骨髓象 增生减低 三系明显减少 淋巴细胞相对增多 非造血细胞增多 骨髓小粒以非造血细胞为主 67 68 69 二 白血病1 白血病 leukemia 白血病细胞异常增生与分化成熟障碍 并浸润其他器官和组织 正常造血受抑制 2 症状 贫血 出血感染和浸润症状3 分型 急性和慢性4 分类 成人以急粒为主 儿童以急淋为主 慢粒比慢淋为多见 70 一 急淋白血病 1 血象 1 Hb RBC下降 重度或中度下降 可见幼红细胞 2 WBC计数 增多 10 50 109 l 正常 减少 如APL 3 WBC分类 可见白血病细胞 幼稚细胞 异常白细胞 可达30 90 4 Plt计数减少 早期正常 晚期明显减少 71 2 骨髓象 1 骨髓增生明显或极度活跃 2 一系或二系原始细胞明显增多 30 ANC 3 其它系列受抑制或减少 4 涂片中 急淋易见涂抹细胞 急非淋 可见Auer小体 72 3 分型 1 FAB分型 急淋和急非淋 2 AML M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 3 ALL L1 L2 L3 4 我国AML分型标准 修改为 M2 M2a M2bM3 M3aM3bM4 M4a M4b M4c 73 74 75 76 77 78 79 80 81 二 慢性白血病 分为慢性粒细胞和慢性淋巴细胞白血病1 慢性粒细胞白血病 1 血象 Hb RBC早期轻度贫血 晚期重度贫血 WBC明显升高 早期 20 50 109 L晚期 100 300 109 L 分类 以中 晚 杆状核粒细胞为主 原 早 10 PLT 早期升高 晚期下降 82 2 骨髓象 增生极度活跃 粒系增生明显占90 以上 以中 晚 杆状核粒细胞为主 原 早 10 嗜酸 嗜硷细胞易见 红系增生受抑 巨核系早期增多 晚期减少 NAP积分减少 t 9 22 q34 911 bcr abl融合基因 83 84 2 慢性淋巴细胞白血病 1 临床特征 为B淋巴细胞白血病欧美国家多见老年人多见肝脾淋巴结进行性肿大病程长达10 20年 85 2 血象 Hb RBC轻度下降 合并HA时明显下降 WBC升高 15 100 109 LL 60 70 以小淋巴细胞增生为主 中性粒轻度减少 PLT正常 3 骨髓象 增生明显或极度活跃 淋巴系增多 50 为成熟淋 原 幼淋少见 粒系 红系减少 晚期巨核细胞减少 86 三 骨髓增生异常综合征1 概念 1 MDS myelodysplasticsyndromeMDS 是二组造血干细胞克隆性疾病 出现病态造血 2 外周血细胞减少 而骨髓细胞增生 成熟及幼稚细胞形态有异常 87 2 MDS分类 RA refractoryanemia AR S refractoryamemiawithside