土壤有效磷的测定PPT课件.ppt

土壤有效磷的测定 0 5mol LNaHCO3浸提 钼锑抗分光光度法 Olsen法 崔玉玲黑龙江省农垦科学院测试中心0454 835987213644545158 1 目录 一 概述二 Olsen方法原理三 主要仪器设备四 试剂五 操作步骤六 结果计算七 质量控制 2 一 概述 土壤有效磷是土壤肥力的重要指标之一 表明土壤的供磷水平 可以作为判断施用磷肥的指标 为推荐施肥提供依据 3 一 概述 土壤有效磷含量只是一个相对的指标 同一土壤用不同方法测得的有效磷量可以相差很多 即使用同一浸提剂 由于浸提条件如土液比 温度 时间 振荡方法不同其结果有很大差异 在相同条件下测得的结果才有相互比较的意义 4 1 浸提方法 浸提剂的选择主要根据各种土壤的性质而定 土壤有效磷测定采用的提取剂种类很多 目前应用的主要测定方法有三种 Olsen法 Bray 法和Mehlich3法 5 1 浸提方法 在目前使用较广的几种浸提剂中 一般认为以0 03mol LNH4F 0 025mol LHCl Bray 法 浸提剂比较适合于风化程度较高的酸性土壤 6 1 浸提方法 石灰性土壤通常用0 5mol LNaHCO3 pH值为8 5 Olsen法 浸提比较理想 对于中性和酸性水稻土NaHCO3法也有应用 7 1 浸提方法 Mehlich3法是近年来研究较多并逐步推广应用的一种测试方法 其优点主要是一次浸提可测定土壤中大部分有效养分 便于大批量分析 缺点是应用时间不长 尚未建立土壤的丰缺指标体系 需要进行试验确定 8 2 指标体系 即使简单地以 高 中 低 来分档 不同提取方法的结果分起档来其数值相差很远 而且同一提取方法的结果对不同土壤 不同作物还应该有不同的分档标准 9 2 指标体系 单位 mg kg 10 2 指标体系 因此 在报告有效磷结果时必须同时说明所用的测定方法 11 3 Olsen法的影响因素 浸提时间 Olsen法连续提取测定土壤有效磷的结果表明 0 5mol LNaHCO3溶液浸提出的土壤有效磷量随振荡时间而增加 将各次连续测定值与各参比标准进行相关性分析 结果表明Olsen法对土壤有效磷进行一次提取已经能够反应土壤的有效磷水平 无需进行多次提取 12 3 Olsen法的影响因素 温度 Olsen法不同温度浸提土壤有效磷的试验结果表明 提取温度对Olsen法测定土壤有效磷的结果影响极大 在10 30 范围内 有效磷测定值随温度升高而增加 温度每升高1 所增加的磷的平均值为0 44mg kg 且随着土壤含磷量不同 其影响程度也不同 13 二 Olsen方法原理 石灰性土壤由于大量游离碳酸钙存在 不能用酸溶液来提取有效磷 一般用碳酸盐的碱溶液 由于碳酸根的同离子效应 提取液中的HCO3 可和土壤溶液中的Ca2 生成CaCO3沉淀 从而抑制了Ca2 的活度而使某些活性较大的Ca P 磷酸钙盐 被提取出来 14 二 方法原理 酸性土壤中的磷主要是以Fe P 磷酸铁盐 Al P 磷酸铝盐 的形态存在 碳酸盐的碱溶液在酸性土壤中因pH提高而使Fe P Al P水解而部分被提取 也降低了铝和铁离子的活性 在浸提液中由于Ca Fe Al浓度较低 不会产生磷的次生沉淀 15 二 方法原理 此外 碳酸氢钠碱溶液中存在着OH HCO3 CO32 等阴离子 有利于吸附态磷的置换 因此NaHCO3不仅适用于石灰性土壤 也适应于中性和酸性水稻土壤中速效磷的提取 16 三 主要仪器设备 1 可控温的往复振荡机 本法浸提温度对测定结果影响很大 因此必须严格控制浸提时的温度条件 本方法要求是25 1 用恒温振荡机进行提取 17 三 主要仪器设备 2 分光光度计波长为880nm或700nm波长不能达到880nm时可用700nm 浸出液有颜色时可用活性炭脱色 18 物质颜色和吸收光颜色的关系吸收光物质颜色颜色波长 nm 黄绿紫400 450黄蓝450 480橙绿蓝480 490红蓝绿490 500紫红绿500 560紫黄绿560 580蓝黄580 600绿蓝绿600 650蓝绿红650 750 19 三 主要仪器设备 3 酸度计可准确调节pH到8 5 20 四 试剂 1 0 5mol LNaHCO3浸提液称取42 0gNaHCO3于800mL水中 稀释定容至1L 以50 m V NaOH溶液调节浸提液的pH至8 5 用pH计测定 贮存于聚乙烯或玻璃瓶中 用塞塞紧 此溶液曝于空气中可因失去CO2而使pH增高 使用前应检查pH是否改变并校准 21 2020 1 9 22 四 试剂 2 无磷活性炭活性炭常含有磷 应做空白试验 检验有无磷存在 如含磷较多 须先用HCl 1 1 浸泡过夜 在平板漏斗上抽气过滤 用蒸馏水冲冼多次至无Cl 为止 再用0 5mol LNaHCO3浸泡过夜 在平板漏斗上抽气过滤 每次用少量蒸馏水淋洗多次 并检查到无磷为止 烘干备用 如含磷较少 则直接用NaHCO3处理即可 23 四 试剂 3 钼锑抗贮备液称取酒石酸锑钾0 3g 溶于100毫升水中 制成0 3 的溶液 称取10 0g钼酸铵溶于约60 300mL水中 冷却 另取181mL浓硫酸缓缓注入约800mL水中 搅匀冷却 24 四 试剂 将稀硫酸溶液 注入钼酸铵溶液 中 边加边搅动 再将100mL0 3 的酒石酸锑钾溶液 加入到钼酸铵液中 最后用水稀释至2L 贮于棕色瓶中 此贮备液钼酸铵浓度为0 5 硫酸浓度为3 26mol L 1 2H2SO4 25 四 试剂 4 钼锑抗显色剂称取0 50g抗坏血酸 左旋 溶于100mL钼锑抗贮备液中 有效期24小时 如贮于2 8 冰箱中 则有效期7天 26 四 试剂 5 磷标准贮备溶液 100mg L 称取0 4394gKH2PO4 105 烘2小时 溶于约200mL水中 加入5mL浓H2SO4 转移入1L容量瓶中 用水定容 可较长时间保存 27 四 试剂 6 磷标准工作溶液 5mg L 取磷标准贮备溶液用0 5mol LNaHCO3准确稀释20倍即为磷标准工作液 此液不宜久存 28 五 操作步骤 1 称取通过1mm 18号筛 筛子的风干土样2 50g 精确0 01g 于干燥的200或250mL塑料瓶中 加入0 5mol LNaHCO3溶液50mL 塞紧瓶塞 在振荡器上振荡30min 速率为每分钟180次 25 1 29 然后立即用无磷滤纸过滤 滤液承接于干燥的三角瓶中 最初7 8ml滤液弃去 同时做空白试验 30 常用标准筛对照数据表 31 五 操作步骤 2 如发现滤液的颜色较深 应向土壤悬浊液中加入约0 3 0 5g无磷活性炭粉 摇匀后立即过滤 也可在振荡前加入活性炭 活性炭和滤纸是否含磷可进行空白试验来验证 32 五 操作步骤 3 吸取滤液10 00mL于三角瓶中 含磷量高时少吸 同时应补加0 5mol LNaHCO3溶液至10 00mL 注1 然后加入钼锑抗显色剂5 00mL 慢慢摇动 使CO2逸出 再准确加入10 00mL水 充分摇匀 逐尽CO2 在室温高于15 处放置30min后 进行比色 33 五 操作步骤 4 以空白溶液为参比液 使用1cm比色皿 在分光光度计上 用880nm或700nm波长进行比色 测读吸光度 34 五 操作步骤 注1 如果吸取滤液10mL于50mL容量瓶中 加水和钼锑抗试剂后 会产生大量的CO2气体 由于容量瓶瓶口小 CO2气体不易逸出 在摇匀过程中 常造成试液外溢 导致测定误差 为了克服这个缺点 可以准确加入提取液 水和钼锑抗试剂于三角瓶中 混匀 显色 35 五 操作步骤 5 标准曲线绘制 1 分别准确吸取5mg L磷标准使用溶液0 2 50 5 00 10 00 15 00 20 00 25 00mL于50mL容量瓶中 用0 5mol LNaHCO3溶液定容 此标准系列中磷的浓度依次为0 0 25 0 50 1 00 1 50 2 00 2 50mg L 36 五 操作步骤 2 吸取标准系列溶液各10 00mL于三角瓶中 同样品处理显色 五 3 测读吸光度 3 以上述标准系列的磷浓度为横坐标 相应的吸光度为纵坐标绘制曲线 37 六 结果计算 1 样品的吸取体积为10mL时 有效P mg kg C 20C 从标准曲线求得查得浓度 mg L 20 浸提时的液土比50mL 2 50g 38 六 结果计算 2 样品的吸取体积小于10mL时 有效P mg kg C 20 10 VC 从标准曲线求得查得浓度