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邻菲罗啉分光光度法测定铁 仪器分析实验 可见分光光度法 2020 1 9 1 紫外 可见分光光度法 紫外 可见分光光度法是研究物质分子在紫外 可见光区分子吸收光谱的分析方法 单色光照射 吸光物质溶液 透射光强度 I0 It 可见分光光度法 紫外分光光度法 紫外 可见光区 200 800nm 紫外光区 200 400nm 可见光区 波长400 800nm 紫外 可见分光光度法 朗伯 比尔定律 A bc 浓度 厚度 吸光系数 Lambert Beer定律是说明物质对单色光吸收的强弱与吸光物质的浓度 C 和液层厚度 l 间的关系的定律 是光吸收的基本定律 是紫外 可见光度法定量的基础 Lambert Beer定律 当一束平行的单色光通过溶液时 溶液的吸光度 A 与溶液的浓度 C 和光程 b 的乘积成正比 熟悉分光光度测定铁的基本原理和方法 掌握分光光度法测定物质含量的条件选定方法 掌握分光光度计的组成部分 操作操作方法和注意事项 掌握邻菲罗啉分光光度法测定铁的标准曲线以及实际样本的检测 一 实验目的 二 实验原理 在pH 2 9的条件下 Fe2 与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物 其反应如下 此络合物的logK稳 21 3 11000 间接检测法 邻菲罗啉 Fe2 配合物 4Fe3 2NH2OH HCl 4Fe2 N2 H2O 4H 2Cl 在显色前 首先用盐酸羟胺把Fe3 还原为Fe2 测定时 控制溶液酸度在pH 2 9较适宜 酸度过高 反应速度慢 酸度太低 则Fe2 水解 影响显色 通常在pH值 5的缓冲液介质中测定 提问 如何分别检测Fe3 和Fe2 三 仪器和试剂 分析天平722型分光光度计pHS 3B型酸度计容量瓶50 250ml移液管10 25ml烧杯50ml吸耳球铁标准溶液 CFe3 10 g ml 铁标准溶液 CFe3 0 001mol L 10 盐酸羟胺水溶液 临用新配 0 1 邻菲罗啉水溶液 临用新配 0 02 0 001mol L 邻菲罗啉水溶液 临用新配 1mol LNaAc缓冲溶液 辐射源 分光系统 检测系统 单波长单光束分光光度计 记录装置 2020 1 9 11 1 光源 2 单色器 分光光度计心脏 作用是将来自光源的光按波长的长短顺序分散为单色光并能随意调节所需波长的光 主要由入射狭缝 准直镜 色散元件 物镜和出射狭缝组成 3 吸收池 样品池 比色皿玻璃 能吸收UV光 仅适用于可见光区石英 不能吸收紫外光 适用于紫外和可见光区要求 匹配性 对光的吸收和反射应一致 4 检测器 将光信号转变为电信号的装置 5 记录装置 讯号处理和显示系统 数字显示 荧屏显示 表头显示 标准曲线法 要求 1 r 0 9992 n 5 73 待测浓度尽量在标准曲线中间位置 代入线性方程中求得C样 配溶液很重要 四 实验步骤 一 条件试验 1 吸收曲线的绘制 选择最大吸收波长作为测定波长 510nm 注 铁标样 0 00mL 5 00mL 依次加入10 盐酸羟胺溶液 NaAc溶液和0 1 邻菲罗啉溶液 稀释至刻度 摇匀 2 邻菲罗啉铁配合物的稳定性 绘制A t曲线 先增大 再平台 3 显色剂浓度的影响 绘制A V曲线 根据A bc判断A的变化趋势 1份Fe2 对应3份邻菲罗啉 注 铁标样 10 00毫升4 溶液酸度对配合物的影响 绘制A pH曲线 pH 2 9 注 pH9一个点 8 5 根据以上实验 得出最佳条件 二 铁含量的测定1 用吸量管分别准确地吸取不同体积的铁标准溶液 8个 依次加入10 盐酸羟胺溶液 NaAc溶液和0 1 邻菲罗啉溶液 稀释至刻度 摇匀 放置10min 以不加铁的试剂空白溶液为参比溶液 在510nm处分别测定各溶液的A 以铁含量为横坐标 相应的A为纵坐标 绘制标准曲线 2 水样中微量铁的测定准确吸取5 0mL水样于50ml容量瓶中 按上述制备标准曲线的方法配制溶液并测定其吸光度 最后根据水样的吸光度 在标准曲线上得出水样中铁的含量 五 数据处理 用excel作图 插入 图表 XY散点图 平滑线散点图 表格 excel图 1 吸收曲线 2 邻菲罗啉配合物的稳定性 六 结果与讨论 3 标准曲线的测定 Excel作图 得标准曲线 计算样本浓度 1 要使比色皿中测定溶液与原溶液浓度保持一致 需用原溶液荡洗比色皿2 3次 装溶液至皿高的2 3为宜 过满溢出会使仪器受损 2 遵守平行原则 配制标准系列时 空白与标准系列均应按相同的操作步骤进行操作 包括加入试剂的量 顺序 时间等均应一致 3 加入