（中药学专业论文）桃仁的质量标准研究.pdf

战芑l l 目录 舢j i f f l f i f i i 川 f i i f 洲 17 7 9 8 4 4 中文摘要 1 英文摘要 5 研究论文桃仁的质量标准研究 第一部分桃仁的薄层鉴别研究 前言 1 0刖舌 1 0 材料与方法 l o 结果 1 1 附图 1 2 附表 1 3 讨 仑 1 4 小结 1 6 参考文献 1 6 第二部分桃仁中苦杏仁苷的含量测定 前言 1 7刖舌 l 7 材料与方法 1 7 结果 2 l 附图 2 4 附表 2 7 讨论 3 3 小结 3 4 参考文献 3 5 第三部分桃仁的指纹图谱的研究 前言 3 6刚舌 3 6 材料与方法 3 6 结果 3 9 附图 4 2 附表 4 5 讨论 5 4 5 6 6 7 4 5 5 5 5 5 6 6 一r 5 展 r 一 一 进 r j 究 t丁 1j 一 砂 献 的 文 一仁 结考 桃 历 小参 简论述谢人结综致个 中文摘要 桃仁的质量标准研究 摘要 桃仁为蔷薇科植物桃p r u n u sp e r s i c a l b a t s c h 或山桃p r u n u s d a v i d i a n a c a r r f r a n c h 的干燥成熟种子 果实成熟后采收 除去果肉 和核壳 取出种子 晒干 性平味苦甘 归心 肝 大肠经 功能为活血 祛瘀 润肠通便 止咳平喘 孕妇慎用 本品始载于 神农本草经 现 代研究表明桃仁对心脑血管疾病疗效显著 近年来受到广泛关注 但一直 以来对桃仁的有效成分缺乏系统的研究 也没有具体的质量评价系统 致 使桃仁药材市场流通处于混乱 故本试验采用t l c h p l c 以及指纹图谱 法对采自山东 山西以及河北承德 安国等不同产地和不同品种的1 5 份 桃仁进行质量研究 为评价桃仁质量及临床合理用药提供科学依据 目的 通过试验对不同产地和品种桃仁的研究 建立桃仁药材的薄层 色谱 含量测定及指纹图谱的方法 为科学评价与有效控制桃仁的质量提 供依据 方法 1 薄层色谱方法的建立 1 提取条件 考察不同的提取方法 和提取溶剂对结果的影响 选用适宜的提取方法和提取溶剂 2 展开条 件 根据桃仁药材中主要指标成分化学性质的特点 确定适宜的固定相 展开系统 显色系统等 2 含量测定方法的建立 1 提取条件 考察不同提取方法 不同提取溶 剂对提取桃仁药材中主要指标成分的影响 继而选取影响提取效率的三个 主要因素 溶剂用量 提取时间 提取次数 采用正交设计对含量测定的 前处理工艺进行优化 以选择提取效率较高的提取条件 2 色谱条件 选择适宜的固定相 调整流动相的组成 配比 流速 进样量 调节柱温 以使苦杏仁苷色谱峰与其它杂质峰完全分离 3 系统适用性试验 在已 确定的色谱条件下 考察苦杏仁苷色谱峰的理论板数 分离度 4 标 准曲线的绘制 配制系列浓度的苦杏仁苷对照品溶液 分别进样 测定峰 面积 以苦杏仁苷进样量为横坐标 相应峰面积为纵坐标 绘制标准曲线 5 精密度试验 取同一份对照品溶液和供试品溶液 分别重复进样6 次 测定峰面积 6 重复性试验 取同一批桃仁药材6 份 制备供试品 中文摘要 溶液 分别进样 测定峰面积 7 稳定性试验 分别取同一份对照品溶 液和供试品溶液 分别于放置o 4 8 1 2 2 4 4 8h 后进样 测定峰面 积 8 回收率试验 取已知苦杏仁苷含量的桃仁药材适量 分别加入等 量的苦杏仁苷对照品 测定苦杏仁苷的含量 计算平均回收率和r s d 值 9 最低限检测的测定 将苦杏仁苷对照品溶液逐步稀释 当信噪比 s 小 3 时确定为最低检测限 1 0 样品测定 在上述色谱条件下 测定 1 5 批桃仁药材中苦杏仁苷的含量 3 指纹图谱方法的建立 1 提取条件 比较不同提取溶剂 不同提取方 法及不同提取时间的提取效果 选择提取成分较多 提取率较高的提取条 件 2 色谱条件 选用合适的色谱柱 检测器及检测波长 调整流动 相的组成 配比 流速 调节柱温 使色谱图符合指纹图谱研究的要求 3 系统适用性试验 在已确定的色谱条件下 考察苦杏仁苷色谱峰的 理论板数 分离度 4 精密度试验 制备样品溶液1 份 重复进样6 次 记录保留时间和峰面积 考察试验方法的精密度 5 重复性试验 平行制备样品溶液6 份 分别进样 记录保留时间和峰面积 考察试验方 法的重复性 6 稳定性试验 制备样品溶液1 份 分别放置0 4 8 1 2 2 4 4 8h 后进样 记录保留时间和峰面积 考察试验方法的稳定性 7 指纹图谱的建立 分别取同一品种不同产地桃仁药材l o 批 其他不 同品种的桃仁药材5 批 制备供试品溶液 进行指纹图谱分析 相似度评 价 结果 1 薄层色谱方法 1 提取方法 样品加甲醇1 0m l 超声处 理3 0m i n 离心 取上清液作为供试品溶液 2 展开条件 以三氯甲烷 一乙酸乙酯 甲醇 水 1 5 4 0 2 2 1 0 5 1 0 放置1 2h 的下层溶液为展 开剂 展开 取出 挥干溶剂后以o 8 磷钼酸的15 硫酸乙醇溶液 现 用现配 浸板 在1 0 5 加热至斑点显色清晰 供试品色谱中 在与对照 品色谱相应的位置上 显相同颜色的斑点 2 含量测定方法 1 提取条件 确定了对桃仁进行含量测定的前处理工 艺 5 0 倍甲醇超声提取一次 提取时间为3 0m i n 2 色谱条件 采用 安捷伦c 1 8 色谱柱 4 6m m x 2 5 0m m 5p m 以甲醇 水 1 5 8 5 为 流动相 流速1 0m l m i m 柱温3 0 检测波长为2 1 0n m 进样量1 0 山 在此色谱条件下 苦杏仁苷峰保留时间约为1 2m i n 分离度大于1 5 理 中文摘要 论塔板数不低于4 0 0 0 3 标准曲线的绘制 苦杏仁苷在o 1 3 8 1 3 8pg 范围内 线性关系良好 回归方程为y 5 1 3 5 7 x 2 0 7 0 4 r 0 9 9 9 9 1 1 6 4 精密度试验 仪器和方法的精密度良好 r s d 分别为o 7 1 1 2 2 5 重复性试验 样品的重复性良好 r s d 为0 5 3 6 稳定性试验 对照品和样品在4 8h 内均稳定 r s d 分别为1 4 4 o 9 6 7 回收率 试验 样品平均回收率为9 9 5 7 r s d 为2 5 0 8 苦杏仁苷的最低 检测限为4 0 1 0 3 2n g 9 桃仁药材中苦杏仁苷的含量为2 3 3 2 3 5 3 2 3 指纹图谱方法 1 提取 以7 0 甲醇超声6 0m i n 为佳 具有稳定和 效率高等优点 2 色谱条件 色谱柱为w a t e r ss y m m e t r yc 1 8 柱 4 6 m m x 2 5 0m m 5 岬 乙腈 水为流动相进行梯度洗脱 流速为1 0m l m i n 柱温为3 0 检测波长为2 2 5n m 进样量l o 山 3 系统适用性试验 在此色谱条件下 苦杏仁苷的保留时间约为2 0m i n 理论板数按苦杏仁苷 峰计算约为5 0 0 0 0 与其它色谱峰的分离度大于1 0 4 精密度试验 以苦杏仁苷峰为内参比峰 计算各主要色谱峰相对保留时间和峰面积占总 峰面积5 以上峰的峰面积值 其r s d 值分别为0 0 2 4 0 1 3 7 和 0 2 7 8 1 6 2 1 精密度良好 5 重复性试验 各主要色谱峰相对保 留时间和占总峰面积5 以上色谱峰的相对峰面积均无明显变化 其r s d 分别为0 0 6 9 0 5 7 3 和1 0 7 5 2 2 6 9 重复性良好 6 稳定性试 验 各主要色谱峰相对保留时间和峰面积占总峰面积5 以上峰的峰面积 比值均无明显变化 其r s d 分别为0 0 0 4 0 2 4 5 和1 0 7 5 1 9 5 1 稳定性良好 7 指纹图谱的建立 得到桃仁药材的指纹图谱及1 5 个共 有峰 同时得到不同品种来源桃仁药材的指纹图谱 8 数据分析 运用 中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2 0 0 4 年a 版 国家药典委员会开 发 对所得数据进行分析 所得结果能反映桃仁药材的质量 结论 1 薄层色谱 该方法显现斑点清晰 重复性和稳定性良好 能 够更好的作为桃仁的定性鉴别方法 2 含量测定 以苦杏仁苷含量为其主要质量指标 建立了该药材定量分析 方法 该方法稳定性 重复性和精密度良好 为科学评价与有效控制桃仁 的质量提供了科学依据 3 指纹图谱 通过建立桃仁的h p l c 指纹图谱 得到特征对照图谱 计算 相似度 该方法重复性和精密度良好 有助于桃仁的质量控制 同时为桃 中文摘要 仁药材的鉴别提供了新的依据 关键词 桃仁 苦杏仁苷 薄层色谱 高效液相 指纹图谱 4 a s c r i p t i o n e dt h em e r i d i a no fh e a r t l i v e ra n d c o l o n i th a sm a n ye f f e c t s s u c ha s r e m o v a l i n gt h es t a s i so fb l o o d l u b r i c a t i n gi n t e s t i n a l r e l i e v i n gc o n s t i p a t i o n s u p p r e s s i n gc o u g ha n dr e l i e v i n gc o n s t i p a t i o n p r e g n a n tu s i n gi t s h o u dw i t h c a u t i o n t h i sp r o d u c ti sc o n t a i n e di nt h e s h e nn o n g sm a t e r i am e d i c a m o d e mr e s e a r c hs h o w st h a tp e r s i c a es e m e ne f f e c t so nt h ec a r d i o c e r e b r a l v a s c u l a rd i s e a s es i g n i f i c a n t l y w h i c hi sr e c e i v e de x t e n s i v ea t t e n t i o ni nr e c e n t y e a r s b u ts y s t e m a t i cr e s e a r c ho na c t i v ei n g r e d i e n t so fp e r s i c a es e m e ni s p e n u r i o u s a n dt h e r ei sn os p e c i f i cq u a l i t ye v a l u a t i o ns y s t e m w h i c hl e d i n gt h e c i r c u l a t i o no fp e r s i c a es e m e nm e d i c i n em a r k e ti nd i s a r r a y b e c a u s et h em a i n i n g r e d i e n t so fp e r s i c a es e m e n i sa m y g d a l i n t h i ss t u d yc h o o s ea m y g d a l i na s t h em a jo rc o m p o n e n t s r e s p e c t i v e l yu s i n gt l c h p l ca sw e l l a st h e f i n g e r p r i n tm e t h o d t h ec o n t e n to fa m y g d a l i no ft h e15s a m p l e sw h i c h i st a k e n f r o ms h a n d o n g s h a n x i a n dh e b e ic h e n g d e a n g u od i f f e r e n to r i g i na n d d i f f e r e n tv a r i e t i e so fp e r s i c a es e m e ni sq u a l i t a t i v ea n dq u a n t i t a t i v es t u d i e d p r o v i d i n gas c i e n t i f i cb a s i sf o re v a l u a t i n gt h eq u a l i t yo fp e r s i c a es e m e na n d r a t i o n a ld r u gu s i n g o b j e c t i v e t oe s t a b l i s ham e t h o do ft l c am e t h o d t od e t e c tt h ec o n t e n t o fa m y g d a l i ni np e r s i c a es e m e na n dam e t h o do ff i n g e r p r i n t t h r o u g h e x p e r i m e n t so nd i f f e r e n tb a t c h e so fp e r s i c a es e m e n w 1 1 i c hp r o v i d i n gab a s i s f o rs c i e n t i f i ce v a l u a t i o na n de f f e c t i v ec o n t r o lo fp e r s i c a es e m e nq u a l i t y m e t h o d s 1t h ee s t a b l i s h m e n to ft l c 1 e x t r a c t e dc o n d i t i o n s i n v e s t i g a t i n gt h e e f f e c t so fd i f f e r e n te x t r a c t i o nm e t h o d sa n de x t r a c t i o n s o l v e n t so nt h er e s u l t s a n ds e l e c t i n gt h eb e s ta p p r o p r i a t ee x t r a c t i o nm e t h o d 5 英文摘要 a n de x t r a c t i o n s o l v e n t 2 t h es e l e c t i o no fd e v e l o p m e n tc o n d i t i o n s a c c o r d i n gt ot h ec h e m i s t r yo fm a i ni n d i c a t o r sc o m p o s i t i o nf r o mp e r s i c a e s e m e n d e t e r m i n gt h ea p p r o p r i a t es t a t i o n a r yp h a s e e x p a n ds y s t e m c o l o r s y s t e m s 2t h ee s t a b l i s h m e n to fc o n t e n td e t e r m i n a t i o nb yh p l c 1 e x t r a c t i o n t o e x a m i n et h ei n f l u e n c eo fd i f f e r e n te x t r a c t i o n sa n dd i f f e r e n te x t r a c t i o ns o l v e n t s o nd i s t i l l i n gt h ee f f e c t i v ei n g r e d i e n tf r o mp e r s i c a es e m e nb yo p t i m i z i n gt h e b e f o r e h a n dh a n d l i n gp r o c e d u r eo fq u a l i t yc o n t r o lt h r o u g he x p e r i m e n tw h i c h f o c u s e so nt h r e em a j o rf a c t o r sa f f e c t i n gt h ee f f i c i e n c yo f e x t r a c t i o n i n c l u d i n g t h er a t e so fs o l v e n ta n dm e d i c i n em a t e r i a l e x t r a c t i o nt i m ea n de x t r a c t i o n t i m e s 2 c h r o m a t o g r a mc o n d i t i o n s c h o o s ea p p r o p r i a t ef i x e dp h a s e a d j u s t d i f f e r e n tf o r m u l a t i o na n dp r o p o r t i o no fm o b i l ep h a s e r e g u l a t ef l o wr a t e t h e i n je c t i o nv o l u m ea n dc o l u m nt e m p e r a t u r ei no r d e rt os e p a r a t et h ep e a ko f a m y g d a l i n f r o mo t h e r s w e l l 3 s y s t e ms u i t a b i l i t y t e s t i nt h i s c h r o m a t o g r a p h i cc o n d i t i o n c a l c u l a t et h er e s o l u t i o na n dt h e o r e t i c a lp l a t eo f a m y g d a l i np e a k 4 p r e p a r a t i o no fs t a n d a r dc u r v e p r e p a r eas e r i e so ft h e r e f e r e n c es o l u t i o n e x a m i n ep e a ka r e a t h e nt h er e g r e s se q u a t i o nw a so b t a i n e d w i t ht h ec o n t e n to fa m y g d a l i na sa b s c i s s a t h er e l e v a n tp e a ka r e aa so r d i n a t e 5 i nt h ee x p e r i m e n to fp r e c i s i o n t a k et h es a m et e s ts o l u t i o n i n j e c tt ot h e a p p a r a t u sf o rs i xt i m e s d e t e r m i n et h er e l e v a n tp e a ka r e ao fa m y g d a l i n a n d t h e nc a l c u l a t et h ep r e c i s i o n 6 i nt h ee x p e r i m e n to fr e c o v e r y t r a n s f e r6 s h a r e so fp e r s i c a es e m e na n da d dt h er e f e r e n c es o l u t i o n so fa m y g d a l i no n s a m el e v e l s d e t e c tt h er e l e v a n tp e a ka r e a t h e nc a l c u l a t et h ec o n t e n to f a m y g d a l i na n dt h er s d 7 i nt h ee x p e r i m e n to fs t a b i l i t y t r a n s f e rt h es a m p l e s o l u t i o nf r o ms e m e na r m e n i a c a ea m a r u mt od e t e r m i n et h er e l e v a n tp e a ka r e a a t0 4 8 1 2 2 4a n d4 8h t h e nc a l c u l a t et h ec o n t e n ta n dr s d 8 i nt h e e x p e r i m e n to fr e c o v e r y t r a n s f e r9s h a r e so fp e r s i c a es e m e na n da d dt h e r e f e r e n c es o l u t i o n so fa m y g d a l i no nt h r e el e v e l sa n de v e r yl e v e lr e p e a tt h r e e t i m e s d e t e c tt h er e l e v a n tp e a ka r e a t h e nc a l c u l a t et h ec o n t e n to f a m y g d a l i n 9 d e t e r m i n a t i o no ft h el o w e s td e t e c t i o nl i m i t a t i o n d i l u t et h er e f e r e n c e s o l u t i o no fa m y g d a l i nu n t i lt h ev a l u eo fs nw a sm o r et h a no re q u a lt o3 t h e 英文摘要 r e l e v a n tc o n c e n t r a t i o nw a st h el o w e s td e t e c t i o nl i m i t a t i o n 1o a s s a v u n d e r a b o v e m e n t i o n e dc o n d i t i o n s d e t e r m i n et h ec o n t e n to fa m v 2 4 4 l l ni nd i f f e r e n t b a t c h e so fp e r s i c a es e m e n 3e s t a b l i s h m e n to ff i n g e r p r i n t 1 e x t r a c t i o n a no p t i m a le x t r a c t i n gc o n d i t i o n w a sc h o s eb yc o r n p g e l st i l e e x p e r i m e n t a lr e s u l t s 2 c h r o m a t o g r a p h i c c o n d i t i o n c h o o s ea p p r o p r i a t ec o l u m na n da d j u s td if f e r e n tf o r m u l a t i o na n d p r o p o r t i o no fm o b i l ep h a s ea n dc o l u m nt e m p e r a t u r ei no r d e rt oe s t a b l i s ha b e t t e r f i n g e r p r i n tc h r o m a t o g r a m 3 s y s t e ms u i t a b i l i t yt e s t i nt h i s c h r o m a t o g r a p h i cc o n d i t i o n c a l c u l a t et h er e s o l u t i o na n dt h e o r e t i c a lp l a t eo f a m y g d a l i np e a k 4 p r e c i s i o nt e s t i nt h ee x p e r i m e n to fp r e c i s i o n t a k et h e s a m et e s ts o l u t i o n i n je c tt ot h ea p p a r a t u sf o rs i xt i m e s d e t e r m i n et h er e l e v a n t r e t e n t i o nt i m ea n dp e a ka r e a r e s p e c t i v e l y 5 r e p r o d u c i b i l i t yt e s t i nt h e e x p e r i m e n to fr e p r o d u c i b i l i t y p r e p a r eo n ec o n c e n t r a t i o ns a m p l eo fp e r s i c a e s e m e n r e p e a te a c hc o n c e n t r a t i o ns o l u t i o nf o rs i xt i m e si nt h es a m ew a y d e t e r m i n et h er e l e v a n tr e t e n t i o nt i m ea n dp e a k a r e a r e s p e c t i v e l y 6 s p e c i f i c i t yt e s t i nt h ee x p e r i m e n to fs t a b i l i t y t r a n s f e rt h es a m p l es o l u t i o n f r o mp e r s i c a es e m e nt od e t e r m i n et h er e l e v a n tr e t e n t i o nt i m ea n dp e a ka r e aa t 0 4 8 12 2 4a n d4 8h r e s p e c t i v e l y 7 d e v e l o p m e n to ff i n g e r p r i n t s t h et e s t s o l u t i o nw a sp r e p a r e df r o md i f f e r e n tp r o d u c i n ga r e a sa n dd i f f e r e n tv a r i e t i e s a n dt h e nt h e i rr e l e v a n tf i n g e r p r i n tc h r o m a t o g r a m sw e r eo b t a i n e d r e s u l t s 1t h em e t h o do f t l c 1 e x t r a c t i o n p u t10 m lo fm e t h a n o li nt o t h es a m p l e a n du l t r a s o n i ct r e a t e d3 0m i n t a k es u p e m a t a n ts o l u t i o na sf o r t h e s o l u t i o nf o rt h et e s tp r o d u c t 2 d e v e l o p m e n tc o n d i t i o n t a k et h el o w e r s o l u t i o no f c h l o r o f o r m e t h y l m e t h a n o l w a t e r 1 5 4 0 2 2 1 0 w h i c hi sp l a c e d1 2 h o u r so n5 10 a sf o rd e v e l o p m e n ts o l v e n t d e v e l o p i n g t a k i n gi to u ta n d d r y i n g p u t t i n gi ti nt ot h es o l u t i o no fo 8 p h o s p h o m o l y b d a t ea c i do f15 s u l f a t ee t h a n o l h e a t i n ga n dw a i t i n gt h es p o tc l e a r l yo n10 5 t h e p r i n c i p a l s p o t i nt h ec h r o m a t o g r a mo b t a i n e df r o mt h et e s ts o l u t i o nw a ss i m i l a ri n p o s i t i o n c o l o u ra n di n t e n s i t yt ot h ep r i n c i p a ls p o ti nt h ec h r o m a t o g r a m o b t a i n e df r o mt h er e f e r e n c es o l u t i o n 2t h em e t h o do fc o n t e n td e t e r m i n a t i o nb yh p l c 1 e x t r a c t i o n t h e 7 英文摘要 e x p e r i m e n t a s c e r t a i n st h a tt h eb e f o r e h a n d h a n d l i n gp r o c e d u r eo fq u a l i t y a n a l y s i so fp e r 5 i c a es e m e ni st h eu l t r a s o n i ce x t r a c t i o no ft h em i x t u r eo ff i f t y p o r t i o no f m e t h a n o la n du n ep o r t i o no fp e r s i c a es e m e n w h i c ha r ep e r f o r m e d o n c ea n dl a s t sf o r3 0m i n u t e s 2 c h r o m a t o g r a mc o n d i t i o n s t h eh p l c s y s t e mw a sp e r f o r m e do nac isa n a l y t i c a lc o l u m ng r a d i e n te l u t e dw i t ha m i x t u r ec o n s i s t i n go fm e t h a n o l w a t e r 1 5 8 5 a taf l o wr a t eo f1 0m l m i n t h e t e m p e r a t u r eo fc o l u m nw a s 3 0 c t h eu vd e t e c t i o nw a v e l e n g t hw a ss e ta t210 a m i n j e c t i o nv o l u m ew a s109 1 u n d e rt h ea b o v ec o n d i t i o n t h ep e a k so f s a m p l e sw e r es e p a r a t e dw e l lw i t ht h er e s o l u t i o no fn o tl e s st h a n1 5 n e r e t e n t i o nt i m ei sa b o u t12m i n t h et h e o r e t i c a lp l a t e sw e r em o r et h a n4 0 0 0 3 t h ed r a wo fs t a n d a r dc u r v e t h el i n e rr a n g ef o ra m y g d a l i nw a so 13 8 13 8u g r e g r e s s i o ne q u a t i o nw a sy 5 l3 5 7 x 2 0 7 0 4 r 0 9 9 9 9 n 6 4 p r e c i s i o n t h ep r e c i s i o no fi n s t r u m e n ta n dm e t h o dw e r eg o o da n dt h er s dv a l u e so f a m y g d a l i nw e r eo 71 a n d1 2 2 5 r e p r o d u c i b i l i t y t h er s dv a l u eo f r e p e a t a b i l i t yw a so 5 3 6 s t a b i l i t y t h ec o n t r o ls o l u t i o na n dt e s ts o l u t i o n w e r es t a b l ei n4 8ha n dt h er s dv a l u e so fa m y g d a l i nw e r e1 4 4 a n do 9 6 7 r e c o v e r y t h ea v e r a g er e c o v e r i e so fa m y g d a l i nw a s9 9 5 7 a n dt h er s d v a l u ew a s2 5 0 8 t h el o w e s td e t e c t i o nl i m i t a t i o nw a s4 0 10 3 2n g 9 t h e r e s u l t ss h o w e dt h ec o n t e n t so fa m y g d a l i ni np e r s i c a es e m e no fd i f f e r e n t s o u r c e sw e r eb e t w e e n2 3 3 2 3 5 3 2 3t h em e t h o do ff i n g e r p r i n tc h r o m a t o g r a p h y 1 e x t r a c t i o n t h em e t h o do f s u p e r s o n i cw a v e e x t r a c t i o nw i t h7 0 m e t h a n o lf o r6 0m i n w a ss i m p l e q u i c k a n ds t a b l e 2 t h eh p l cs y s t e mw a sp e r f o r m e do naw a t e r ss y m m e t r y c ts a n a l y t i c a lc o l u m ng r a d i e n te l u t e dw i t ham i x t u r ec o n s i s t i n go fa c e t o n i t r i l e w a t e ra taf l o wr a t eo f1 0m l m i n t h et e m p e r a t u r eo fc o l u m nw a s3 0 t h e u vd e t e c t i o nw a v e l e n g t hw a ss e ta t2 2 5n n l i n j e c t i o nv o l u m ew a s109 1 3 s y s t e ms u i t a b i l i t yt e s t u n d e rt h ea b o v ec o n d i t i o n t h ep e a kc o r r e s p o n d i n gt o a m y g d a l i no ft h et e s ts o l u t i o nw a ss e p a r a t e dw e l lw i t ht h er e s o l u t i o no fm o r e t h a n1 0a n da b o u t5 0 0 0 0o ft h e o r e t i c a lp l a t e 4 t h ep r e c i s i o no fs a m p l ew a s g o o d a m y g d a l i np e a ka sr e f e r e n c ep e a k t h er s dv a l u e so fr e l a t i v er e t e n t i o n t i m ea n dr e l a t i v ea r e aw e r eb e t w e e n0 0 2 4 0 137 a n d 英文摘要 b e t w e e n o 2 7 8 一1 6 21 r e s p e c t i v e l y 5 t h er e p r o d u c i b i l i t yo fs a m p l ew a s g o o da n dt h er s dv a l u e so fr e l a t i v er e t e n t i o nt i m ea n dr e l a t i v ea r e aw e r e b e t w e e n 0 0 6 9 0 5 7 3 a n db e t w e e n 1 0 7 5 一2 2 6 9 r e s p e c t i v e l y 6 t h e t e s t s o l u t i o nw a ss t a b l ei n4 8ha n dt h er e l e v a n tr s dv a l u e so fr e l a t i v e r e t e n t i o nt i m ea n dr e l a t i v ea r e aw e r eb e t w e e n0 0 0 4 0 2 4 5 a n d b e t w e e n1 0 7 5 一1 9 51 r e s p e c t i v e l y 7 d e v e l o p m e n to fr e l e v a n tf i n g e r p r i n t c h r o m a t o g r a m s f i n g e r p r i n tc h r o m a t o g r a m sf r o m 15b a t c h e so fp e r s i c a e s e m e nw e r eg o t i na d d i t i o n t h ef i n g e r p r i n tc h r o m a t o g r a m so fd i f f e r e n t v a r i e t i e sw e r ea l s oo b t a i n e d 8 d a t aa n a l y s i s s i m i l a r i t yc l u s t e r i n ga n a l y s i s w a sp e r f o r m e da n dt h er e s u l tc a ns i g n i f i c a n t l yr e f l e c tt h eq u a l i t yo fp e r s i c a e s e m e nf r o md i f f e r e n tp r o d u c i n ga r e a sa n dd i f f e r e n tv a r i f i e s c o n c l u s i o n 1t l c t h i sm e t h o dr e v e a l e dac l e a rs p o t s r e p e a t a b i l i t ya n d s t a b i l i t yi sw e l l i ti st h eb e t t e rq u a l i t a t i v ei d e n t i f i c a t i o nm e t h o dt ob eu s e dt o d i f f e r e n t i a t ep e r s i c a es e m e n 2c o n t e n td e t e r m i n a t i o n t h i ss t u d yc h o o s et h ec o n t e n to fa m y g d a l i 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