shrna和sirna的区别.doc_第1页
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shrna和sirna的区别现在常用的RNAi的研究策略有三种:第一种即为直接合成针对靶基因的siRNA(合成的是RNA,不是DNA),通过转染(有用于siRNA转染的试剂)的方法使之进入细胞内,参与到RNAi途径,发挥使靶基因沉默的效应。这一方法受转染效率的影响较大,而且能顺利的进入RNAi途径的效率怎么样,还有待验证。不过目前有不少基因的siRNA已经有商业产品,所以使用时买来就可以了,比较方便。而且直接合成的siRNA可以进行小分子多肽等配体标记,可进行体内研究,注入体内后,通过配体的识别,被特定的细胞吸收,在特定的靶细胞内实现RNAi研究。二是构建shRNA的质粒表达载体,转染细胞,在细胞内转录生成shRNA,利用细胞内的Dicer酶,生成相应的siRNA,发挥RNAi作用。三是构建shRNA的病毒表达载体,常用的病毒载体有腺病毒载体、腺相关病毒载体、慢病毒载体等,机制与质粒载体相似,利用了病毒感染细胞效率比较高的特点,解决了用质粒载体转染效率低的缺陷。

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