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文档简介
1首先将内层灭菌桶取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。 2放回灭菌桶,并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤,以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。 3加盖,并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。 4用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。本实验用 105kg/cm2,1213,20分钟灭菌。 5灭菌所需时间到后,切断电源或关闭煤气,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的压力降至0时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。如果压力未降到0时,打开排气阀,就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染。 6将取出的灭菌培养基放入 37温箱培养24小时,经检查若无杂菌生长,即可待用。 一、选择题(在每小题的四个备选答案中,选出一个正确的答案,并将其号码填入括号内。每题1分,共10分)1、菌种的分离培养、接种、染色等研究微生物的技术的发明者是 : ( )A. 巴斯德 B. 柯赫 C.列文虎克 D.别依林克2、支原体的细胞特点是 : ( ) A. 去除细胞壁后的细菌 B.有细胞壁的原核微生物C. 无细胞壁的原核微生物 D.呈分枝丝状体的原核微生物3、酿酒酵母的无性繁殖方式是: ( )A 裂殖 B芽殖 C假菌丝繁殖 D子囊孢子繁殖4、微生物生长所需要的生长因子是: ( )A. 微量元素 B. 氨基酸和碱基C. 维生素 D. B,C二者5、下列葡萄糖生成丙酮酸的糖酵解途径中,最普遍、存在于大多数生物体内的一条主流代谢途径是: ( ) aA. EMP途径 B.HMP途径 C.ED途径 D.WD途径6、杀死所有微生物的方法称为: ( )A.消毒 B.灭菌C.防腐 D.抑菌7、溶原性细菌对( )具有免疫性:A.所有噬菌体 B.部分噬菌体C.外来同源噬菌体 D.其它噬菌体8、抗药性质粒(R因子)在医学上很重要是因为它们: ( )A.可引起某些细菌性疾病B.携带对某些抗生素的特定抗性基因C.将非致病细菌转变为致病菌D.可以将真核细胞转变为癌细胞9、空气并不是微生物良好的栖息繁殖场所,因为: ( )A.缺乏营养 B.高pHC.夏季高温 D.无固定场所10、下列物质中,属于抗体的是 ( )A.外毒素 B.内毒素 C.类毒素 D.抗毒素二、填空题(每空分,共10分)1、根据微生物生长所需要的碳源、能源和( )的不同,可把微生物分为( )、( )、( )、( )四种营养类型 。2、连续培养的两种类型是有( )和( )。3、16S( )目前被认为是原核生物谱系分析的一把“分子尺”;4、用人为方法除尽细胞壁的细菌称为( ),未除尽细胞壁的细菌称为( )。三、判断题(认为对的,在题后的括号内打“”,认为错的打“”。每小题1分,共10分)1、蓝细菌又称蓝藻,为单细胞藻类,属真核生物。 ( )2、磷壁酸是革兰氏阴性细菌细胞壁中的特有成分。 ( )3、单纯扩散不能进行逆浓度运输,而促进扩散则能进行逆浓度运输。 ( )4、底物水平磷酸化只存在于发酵过程中,不存在于呼吸作用中。 ( )5、巴斯德消毒法不能杀死细菌的芽孢。 ( )6、原噬菌体即插入寄主染色体DNA上的噬菌体DNA。 ( )7、F质粒是最早发现的一种与大肠杆菌的有性生殖现象有关的质粒,F质粒整合到宿主染色体上的菌株称之为F。 ( )8、因为碱性染料能与细胞中带正电的组成成分结合,所以常将其用于细菌染色。 ( )9、干扰素是宿主细胞在病毒等多种诱生剂刺激下产生的一组低分子量的糖蛋白,具有抗病毒及免疫调解作用。 ( )10、根际微生物对于植物来说都是有害的,因为它们共同竞争有限的营养或造成病害。( )四、名词解释(每小题4分,共24分)1 噬菌斑 鉴别培养基 发酵 同步培养 营养缺陷型 菌株五、简答题(每小题8,共32分) 1简述革兰氏染色机理和方法;2简述烈性噬菌体的复制周期;3简述Ames实验的原理和方法;4什么是抗原?抗原物质应具备哪些条件?六、论述题(共14分)论微生物的发展促进了人类的进步。(从医疗保健、工业、农业、生态环境和生物学基础理论方面论述)卷答案及评分标准选择题(每小题1分,共 10分)B C B D A B C B A D二、填空题(每空1 分,共10分)1、电子供体、光能无机自养、光能有机异养、化能无机自养、化能有机异养2、恒浊连续培养、恒化连续培养3、rRNA 4、原生质体、原生质球(球状体)三、判断题(每小题1分,共 10分) 四、名词解释(每小题4分,共24分)1、经适当稀释的噬菌体标本接种于细菌平板,经过一定时间培养后,在细菌菌苔上形成的圆形局部透明溶菌区域。 2、在培养基中加入能与特定微生物的代谢产物发生特征性化学反应的化学物质,用于鉴别不同类型微生物。3、广义的发酵,泛指一切利用微生物进行生产的过程,多指传统的与实际生产有关的工业化生产,多是好氧过程,如氨基酸发酵、抗生素发酵、单细胞蛋白生产等。微生物生理学上的发酵有称狭义的发酵,是指微生物将有机物氧化释放电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物,同时释放能量并生产各种不同的代谢产物的过程。4、使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞培养方法。5、一种缺乏合成其生存所必须的营养物质的突变型,只有从环境或培养基上获取这些物质才能生长.6、从自然界中分离得到的任何一种微生物的纯培养都可称为微生物的一个菌株,用实验方法得到的某一菌株的变异型,也可称为一个新的菌株,以便与原有菌株相区别。五、简答题(每小题8,共32分)1、革兰氏阳性菌细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密,脱水时网孔缩小,把结晶紫和碘复合物留在壁内,呈紫色;阴性菌壁薄、含类脂高、肽聚糖薄且交联度差,脱色呈无色,复染成红色。(4分)初染(1分);媒染(1分);脱色(1分);复染(1分);2、吸附(2分)、侵入和脱壳(2分)、生物合成(2分)、装配释放(2分)3、人和细菌的DNA结构及特性是一致的,能使微生物发生突变的诱变剂必然也会作用于人的DNA,使其发生突变。(2分)化学药剂对细菌的诱变率与其对动物的致癌性成正比(1分)检测鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型菌株(his-)的回复突变率(4分)由于生物体内、体外可能存在的差异,加入哺乳微粒体酶系统,使待准确率增高。(1分)4、能诱导机体产生体液抗体和细胞免疫应答,并能与抗体和致敏淋巴细胞在体内外发生特异接合反应的物质。(4分)免疫原性(2分)、反应原性(2分);六、论述题(14分)医疗保健方面(3分);工业方面(3分);农业方面(3分);生态与环境保护方面(3分);生物学基础理论方面(2分)一、名词解释(每小题4分,共5小题20分)1.无菌技术:在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染,自身也不污染操作环境的技术称为无菌技术。2.菌落:固体培养基中,单个或少数细菌细胞生长繁殖后,会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团是菌落。3.平板:是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,是冷却凝固后固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面称作平板。4.发酵:发酵是指在无氧条件下,底物脱氢后产生的还原力H不经过呼吸链传递而直接交给某一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。5.培养基:人工配制的、适合微生物生长、繁殖和产生代谢产物用的混合营养基质。二、填空题(每空0.5分,共6小题12分)1.球形,杆形,螺旋形2.无隔菌丝,根霉,毛霉,有隔菌丝,青霉,曲霉3.芽孢,鞭毛,菌毛,糖被4.碳源,氮源、无机盐,生长因子,水5.双命名法,属名,种名6.螺旋对称,二十面体对称,复合对称三、选择题(每小题1分,共10小题10分) 1.A 2.D 3.A 4.B 5.A6.C 7.B 8.B 9.C 10.D四、判断题(每小题1分,共10小题10分)1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 五、简答题(共4小题28分)1.革兰氏染色原理是什么?(本题10分)答:G+ 菌:细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内,细胞不能被酒精脱色,仍呈紫色。G菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙黄复染后呈红色。2.简答嗜盐菌产能方式及过程? (本题6分)答:紫膜在光照射下起质子泵的作用能够将膜内产生的H泵至膜外,产生膜内外的质子梯度,膜外H要回到膜内,需要经过ATP合成酶孔隙,因此产生ATP。3.简答二次生长现象?(本题6分) 答:例如用葡萄糖和乳糖培养大肠杆菌时,由于乳糖酶是诱导酶,大肠杆菌先利用易被代谢的葡萄糖生长,达到一个生长高峰,在葡萄糖消耗尽时,才开始利用乳糖生长,再次达到一个生长高峰的现象称二次生长。4.微生物的营养类型有哪些?各举一例。(本题6分)答:1)光能自养型微生物,例如蓝细菌;2)光能异养型微生物,例如红螺菌;3)化能自养型微生物,例如硫化细菌;4)化能异养型微生物,例如黑曲霉。六、论述题(共1小题20分)试述根据F质粒的有无,可以把大肠杆菌分为几种类型菌株,请对它们进行说明,它们之间如果发生杂交结果是什么?答:根据F质粒的有无,可以把大肠杆菌分为四种类型菌株:1)F+菌株, F因子独立存在,细胞表面有性菌毛;2)F-菌株, 不含F因子,没有性菌毛,但可以通过 接合作用接收F因子而变成雄性菌株(F+);3)Hfr菌株,Hfr菌株仍然保持着F+细胞的特征,具有F性菌毛,并象F+一样与F-细胞进行接合。4)F菌株,Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时,形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子,特称为F因子。杂交结果:(1) F+F-杂交:F+菌株的F因子通过性菌毛向F-细胞转移,杂交的结果是给体细胞和受体细胞均成为F+细胞。(2)Hfr F-杂交:Hfr菌株的F因子插入到
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