红外分光光度仪标准操作规程.doc

深圳市翰宇药业有限公司标准操作规程题目：红外分光光度仪标准操作规程文件编号：Qc-SOP-6544-1替代文件编号：页码：05-05制订部门：质量管理部制定人/日期： 20 年 月 日部门审核/日期： 20 年 月 日QA审核/日期： 20 年 月 日批准人/日期： 20 年 月 日生效日期：20 年 月 日目的：建立红外分光光度仪的标准操作方法及技术要求。范围：适用于红外分光光度仪的操作。责任：质量管理部对本规程的实施负责。规程：1 开机1.1开机前，先检查仪器室内的温度及湿度是否符合要求，并检查样品室内有无阻挡物。1.2 打开光谱仪开关，如果光谱仪很长时间没有开机，开机后至少需要稳定30 min，以便达到工作温度（稳定前开始采集数据，数据的准确性可能不高），打开resolution 软件。2 设置参数系统校正Scimitar 傅立叶变换红外光谱仪设定了开机自动校准功能。从 Scan 菜单中选择Scan选项，出现扫描界面，在这个界面中可以定义扫描参数，控制背景和样品扫描。Sample 参数 设置值Number of scans 32Scan Type %TransmittanceResolution 4Truncation Range 4000-400cm-1Background 参数 设置值Scan to co-add 32Spectrum Name Background3 光谱测定3.1 背景扫描 采集背景的目的是消除仪器及环境对样品光谱的影响，每个样品光谱都需要背景光谱。可以选择以前采集的背景，在ScanBackgroundSelect 选入背景。如果不是选定以前的背景，需要在采集样品光谱前先扫描背景，建议每个样品都分别扫描背景。一般扫描空气作为背景。设置好背景参数后，点击Background，进行背景扫描。采集完背景，会自动推出扫描图框，提示进行背景保存。输入背景的名字，点击Save保存背景光谱。点击SAVE 保存后，会直接在图框中显示采集到的背景光谱图。3.2 样品扫描 3.2.1 打开样品仓，把样片放在样品架上，点击Scan Scan按钮，准备开始进行样品光谱采集。在Sample栏里定义扫描图框里面的参数，点击Scan开始样品扫描，在光谱栏里可一直接看到采集到的光谱图。3.2.2 采集完成后，光谱图和背景同时在一个文件中，可以把Name里面文件名字修改成样品的名字，以便于记忆。4 图谱打印4.1 光谱显示在需要放大的区域，点住鼠标左键，把该区域拉进光栏，即可放大观看。4.2 光谱差减 4.2.1 使用File-Close 关闭所有光谱文件，使用File-Open来打开文件，选中该文件，该文件会被作为被减数。4.2.2 选择Transforms 中的Define Reference 来定义减数，出现文件选择框后选中文件，并选中use this spectrum as the default reference for spectral subtraction，表示以这张光谱作为默认的减数。4.2.3 选择Transforms中的Spectral Subtract 进行光谱差减。可以通过调节Subtraction Factor来调节减数因子。减完的结果可以在Subtraction Result 中实时看到，当调节到合适的差减数值后，点击OK完成。4.2.4 如果选中Add ,点击OK，相减的结果将和原光谱共存。4.2.5 如果选中Replace，点击OK，相减的结果将覆盖原光谱。4.3 标峰4.3.1 打开Peaks菜单，点击Peak pick ，出现Peak pick标峰对话框，标峰灵敏度Sensitivity 的值为1，可以通过箭头改动这个值，1是最低灵敏度，灵敏度最大是8。点击OK，在主光谱显示区域就显示出光谱中主要峰的标识。4.3.2 定义标峰的具体参数4.3.2.1 在某一标峰处点击右键，选择Properties，出现Edit Peak Properties 对话框，在General处点击Center，表示标峰中心点，4.3.2.2 点击Display 来定义标峰表示方法，只选中Center，表示在图中只显示峰的中心位置，选中Vertical 让所有的标峰显示都是垂直的。4.3.2.3 切换到General，选中Apply Style to all existing peaks ,让软件把所有的标峰的格式都改成刚才定义的样子。如果不选中这个选项，则只有一个峰会按以上定义的方式显示。4.3.2.4 峰表和光谱列表之间切换。标完峰后会出现一个峰信息的详细列表。可以通过工具栏上的口的按钮，切换到光谱信息显示栏。4.3.2.5 单独标峰，可以使用鼠标右键对单个峰进行独立操作，把鼠标放在需要标峰的峰位上，电击右键，在出现的菜单中选中New-Peak ，直接标出该峰信息，可以用前篇的方法对这个峰进行性质定义。可以点击右键删除这个标出的峰。4.3.3 基线校正4.3.3.1 基线校正是要对吸收图进行操作，如果是透射图，在做基线校正之前，要把其转化成吸收图，4.3.3.2 使用Transforms 里面的Absorbance转化为吸收图。点击Transforms 中的Baseline Correction。4.3.3.3 出现基线教正图框，分上下两个图框，上图框是原光谱，下图框是校正后的光谱，校正后光谱实时显示校正操作对光谱的影响。4.3.3.4 把鼠标移到原始光谱上，在光谱的底部处点击鼠标左键，在光谱上就会出现一个白色的方块，也可以点中左键直接拉动基线，校正后的图会直接出现在图框下。选中Add ，点击OK。4.4 打印模版4.4.1 选择File/Print Composition/Open 打开已经有的打印模版,varian公司提供部分打印模版，可以在VarianResolutionSample Data 选中Notebook Page 模版。4.4.2 选择File/Print Preview对光谱图进行打印预览。如果觉得格式合适，直接电击File/Print打印图谱。5 关机5.1 退出resolution 软件并关闭其他所有应用程序。从windows “开始”菜单中选择关机。5.2 移走样品仓中的样品，清洁样品室及压片装置。5.3填写好使用登记6注意事项6.1 只有在相对湿度20%50%，温度2030的条件下方可开机。适当通风换气，以避免聚集过量的二氧化碳和有机溶剂蒸汽。6.2 随时保持仪器内置干燥剂及样品室内的干燥剂处于有效状态。6.3 供试品测试完毕后应及时取出，长时间放在样品室中会污染光学系统，引起性能下降。6.5在进行样品扫描前均需做背景扫描，若空白片的初始透光率或整体透光率较差，均需重新进行背景扫描，直到背景扫描达到要求方可进行样品扫描。6.6 压片所用KBr应预先在120干燥4小时以上，空白片应透明无裂纹。6.7 压片模具应放于油压机中央，以免油压机损坏，压片模具用毕后，一定要拭净，凉干。决不能留有样品或赋形剂上面，以免腐蚀模具。6.8 测试样品时，尽量减少室内人数，使CO2降低到最低限度，以保证图谱质量。6.11禁止使用计算机的屏保和任何省电功能，这些功能可能对数据采集，尤其长时间数据采集产生影响。7 仪器维护7.1 定期更换样品室内的干燥剂7.2