晚期糖基化终末产物对高血压及其合并早期肾损害相关性分析.doc

晚期糖基化终末产物对高血压及其合并早期肾损害相关性分析作者：俞晓军,袁国裕,邓爱玲单位：舟山市人民医院心内科，浙江?舟山晚期糖基化终末产物对高血压及其合并早期肾损害相关性分析作者：俞晓军，袁国裕，邓爱玲 单位：(舟山市人民医院心内科，浙江?舟山 316000) 【关键词】 晚期 糖基化终末产物 高血压 早期肾损害 Association of Serum Advanced Glycosylation End Products(AGEs) and Early Renal Damage in Essential Hypertension(EH) Patients. YU Xiao_jun, YUAN Guo_yu, DENG Ai_ling. Department of Cardiology, Zhoushan Peoples Hospital, Zhejiang 316000, ChinaAbstract Objective The purpose of this study is, by measuring the serum levels of AGEs and urine microalbumin (mALB) in both hypertensive patients and healthy people to probe the relationship of AGEs, EH and the early renal damage of EH and to provide some theory base of the pathogenesis of EH and the prevention and treatment of early renal damage in EH. Methods 100 EH patients (42 cases with normal mALB level， and 58 cases with higher mALB level) were selected as EH group, and 41 healthy people were as normal control group. There was no statistical significance difference in age, sex, blood glucose, blood lipids, creatinine among these three groups. Radioimmunoassay(RIA) and enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) test were used to detect the mALB level in the morning urine and the serum AGEs level in all objects. Results Compared with the control group, the serum AGEs level in EH patients (both in normal mALB group and abnormal mALB group) was significantly higher(P<0.001); and the serum AGEs level in EH abnormal mALB group was markedly higher than that in EH normal mALB group(P<0.001). Linear correlation analysis showed AGEs concentration was notably positive correlated with SBP, PP and mALB (r=0.448_0.687,P<0.001); mALB concentration was significantly positive correlated with SBP, PP(r=0.271_0.354,P<0.001). Conclusions AGEs, SBP participated in the process of hypertensive renal damage. AGEs and SBP, PP had a significant positive correlation. SBP increased as AGEs level increased.Key words Advanced glycation end products; Hypertension; Renal dysfunction高血压(EH)是危害人类健康的常见病，可导致心、脑、肾等靶器官损害，重者可致死、致残1，肾脏是高血压损害的重要靶器官之一2。目前认为内皮损伤、血管重塑、脂质代谢紊乱参与了EH及其合并征的发生发展。大量实验研究表明：血清晚期糖基化终末产物(AGEs)不仅在糖尿病及糖尿病肾病的发生、发展中起到重要作用，而且在心血管病中也起重要作用3。本文通过测定高血压病患者与正常人血清AGEs及尿微量白蛋白(mALB)的水平，探讨AGEs与EH及其早期肾功能损害的关系，为高血压发病机制及其早期肾功能损害防治研究提供理论依据。1 资料和方法1.1 一般资料：选自我院2008年5月至2009年1月新发现或停药两周的EH患者100例，男51例，女49例，年龄2983(平均57.6±13.5)岁。根据尿mALB的量(正常参考范围0.828.68mg/L)分为EH mALB异常组58例(第3组)和EH mALB正常组42例(第2组)。对照组选健康体检者41例，男23例，女18例，年龄2872(平均53.3±11.2)岁(第1组)。三组间性别、年龄、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL_C)、低密度脂蛋白(LDL_C)、血肌苷(Cr)均无统计学差别。1.2 方法：用负压促凝管取肘静脉血5ml，离心分离血清，测血清AGE试剂采用天津瑞爱金生物科技有限公司提供的AGE ELISA试剂盒。随后以Korotkoff法测量右上臂收缩压(SBP)、舒张压(DBP)。取早晨第一次尿立即送检测定mALB，采用北京原子高科股份有限公司提供的mALB放射免疫试剂盒，和美国Bioelisa公司提供的Bioelisa ReaderE lx800酶标仪。采用竞争机制原理，125I_ALB与抗体的结合量与标准或样品中ALB的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后，测定结合部分的放射性强度，并计算相应结合率B/Bo。用已知标准ALB含量与对应结合率作图，即得出标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中ALB的含量。1.3 统计学处理：采用SPSS13.0软件分析，计量资料用均数±标准差(x-±s)表示，各组均数间比较前先行正态性及方差齐性检验，组间均数比较采用单因素方差分析，构成比之间的比较用χ2分析，相关分析用Spearman分析，线性回归分析采用Enter、Stepwise法。以P<0.05为差异有统计学意义。2 结果2.1 三组间AGEs的比较：AGES(u/L)在第1组为3.24±2.08，第2组9.86±3.75，第3组12.86±5.69。与对照组比较，EH mALB正常组、EH mALB异常组血清AGEs显著增高(P<0.01);与EH mALB正常组比较，EH mALB异常组血清AGEs显著增高(P<0.01)。附图1。2.2 EH组的AGEs、mALB与SBP、DBP、PP间相关分析：结果显示AGEs与SBP、PP、mALB之间有显著的相关性(r值分别是0.687、0.463、0.448，P<0.001);mALB与SBP、PP之间有显著的相关性(r值分别是0.354、0.271，P<0.001)。AGEs、mALB与DBP无相关性，见表1，附图2。表1 EH组的AGEs、mALB与SBP、DBP、PP间相关分析注：r值,P<0.001图2 AGEs与mALB相关性分析：r=0.448,P<0.0012.3 线性回归分析：EH组中以mALB为应变量，AGEs、SBP、DBP、PP为自变量行线性回归分析(Stepwise法)，结果示AGEs,SBP进入回归方程，是mALB独立的危险因子，回归方程为:mALB=1.58AGEs+0.138SBP-25.664;以SBP为应变量，AGEs为自变量行线性回归分析(Enter法)，回归方程为：SBP=1.044AGEs+153.408。见表2，3。表2 各因素对mALB的线性回归分析表3 SBP的线性回归分析注：与第1组比较P<0.01;与第2组比较P<0.013 讨论AGEs是由还原糖的羰基与游离氨基反应形成的复合物。AGEs与细胞表面特异性受体的相互作用是其致病的关键途径，AGEs与细胞表面RAGE结合后，可引起多种蛋白质基因表达水平的改变，内皮损伤、血管重塑、脂质代谢紊乱。RAGE在体内广泛存在，主要分布在内皮细胞、单核巨噬细胞、淋巴样细胞、肾小球系膜细胞和平滑肌细胞等4,5。高血压病患者血管内皮功能紊乱，血管平滑肌由“收缩表型”向“合成表型”的转化而导致心血管重塑已成为探索高血压发病机制及靶器官损害研究的热点6,7。AGEs对高血压病的发生发展起着重要作用。AGEs与RAGE结合后可改变血管内皮的形态和RAGE细胞骨架，使细胞间形成裂隙，增加血管的通透性，内皮细胞表面存在AGEs的特异性结合系统。在本文中AGEs与SBP、PP呈显著的正相关性(r值分别是0.687、0.463，P<0.001);以SBP为应变量，AGEs为自变量行线性回归分析(Enter法)，每增加1U/LAGEs，SBP就会增加1.044mmHg;线性回归方程提示SBP随AGEs水平升高而增高。实验的结果说明AGEs可能与高血压有关，表明AGEs可能参与高血压的形成，是高血压发病的危险因子。随着高血压患病率的增加，高血压引起的肾脏损害将是危及人类健康的常见原因之一。微量白蛋白尿是早期发现和监测高血压患者肾脏损害程度的指标之一8。正常的肾小球中用免疫组化的方法几乎检测不到AGEs,而在弥漫性或结节性改变的肾小球的系膜、基底膜及小管基底膜和许多血管壁上却能大量检测到AGEs9。AGEs在这些部位的沉积除了可以引起蛋白质的共价交联,尤其使细胞外基质蛋白性质的改变、改变细胞外基质的分子结构和理化特征,使肾小球基底膜支架结构孔径增大,通透性增高引起蛋白尿之外,更重要的是能与细胞表面的RAGE结合而激活第二信号系统,产生大量细胞因子包括TGF_α、PDGF、IL_1等10,对肾小球及小管间质造成不可逆转的损伤。在本文中2、3组与1组比较，血清AGEs在EH mALB正常组、EH mALB异常组显著增高(P<0.001);AGEs与mALB之间有显著的相关性(P<0.001);mALB与SBP、PP之间有显著的相关性(P<0.001)。AGEs、mALB与DBP无相关性。SBP、PP与mALB呈显著的正相关性与以往的研究结果一致。EH组行线性回归分析显示AGEs、SBP进入回归方程，是mALB增高的危险因子，AGEs、SBP是高血压病患者肾小球损害的危险因子。本文同时发现每增加1U/LAGEs，mALB就会增加1.58mg/L;每增加10mmHg,mALB就会增加1.38mg/L。上述结果均提示AGEs与SBP共同参与了高血压早期肾功能损害。综上所述，AGE_RAGE系统与高血压病早期肾功能损害关系密切,在其发病机制尚未完全明确的情况下提供了一个研究的思路;同时，相关AGEs抑制剂的研究开发可为高血压病的治疗提供一个新的途径。【参考文献】 1王砚青，刘平，赵艳芳，等.老年高血压病患者24h动态脉压对靶器官损害的影响J.实用医学杂志,2007,23(19);3017-3018. 2Singh GR, Hoy WE. Kidney volume, blood pressure, and albuminuria :finding in an Australian aboriginal communityJ. Am J Kidney Dis, 2004,43(2):254-259.3Susan J•Zieman, David A. Kass. Division of Cardiology, Advanced Glycation EndproductCrosslinking in the Cardiovascular System:Potential Therapeutic Target for Cardiovascular DiseaseJ. Drugs, 2004,64(5):459-470.4VlassaraH, BucalaR, StrikerL. Pathogenic effects of advanced glycoslylation Biochemical, biologic, and clinical implicantion for diabetes and agingJ. Lab Invest, 1994,70:138-147.5Brett J,Schmidt AM,Yan SD, et al. Survey of the distribution of a newly characterized receptor for advanced glycation end products in tissuesJ. Am J Pathol, 1993,143(6):1699-1712.6Yong Zhang, Kathy K. Griendling, Anna Dikalova, et al. Vascular Hypertrophy in Angiotensin II_Induced Hypertension Is Mediated by Vascular Smooth Muscle Cell_Derived H2O2J. Hypertension, 2005,46(9):732-7