毛茛提取液对离体子宫平滑肌作用及其机制的研究.doc

毛茛提取液对离体子宫平滑肌作用及其机制的研究【关键词】 毛茛提取液摘 要 目的：观察毛茛提取液（Ranunculus japonicus Thumb Extractant, RJTE）松弛离体子宫平滑肌条的作用，并初步探讨其作用机制。 方法：制备离体大鼠子宫平滑肌条，观察不同剂量RJTE对子宫肌条自发活动和由缩宫素诱发收缩活动增加的影响。结果：RJTE可抑制缩宫素所致的离体子宫平滑肌兴奋作用，表现为收缩幅度的减小和频率的减慢；在使用普萘洛尔后，该松弛作用未被完全阻断。结论：RJTE能抑制由缩宫素所引起的离体子宫兴奋作用，该作用与2受体无明显关系。关键词 毛茛提取液；子宫平滑肌条；缩宫素 Effects of Ranunculus japonicus Thumb Extractant on uterinesmooth muscle and its mechanismCAI Sa，TAN Yuzhi，LI Shufang，LI Xiaokun(1.Section of Pharmacology，Guangdong College of Pharmacy，Guangzhou,Guangdong 510240； 2.Guiyang Medical College, Guiyang 550004;3.Research and Development Center of Biomedicine,Jinan University，Guangzhou，Guangdong 510630)Abstract Objective: To observe the relaxing effect of Ranunculus japonicus Thumb Extractant on uterine smooth muscle and study its possible mechanism. Method: The isolated uterine strips of rats were prepared. The spontaneous contractions and contractions evocated by oxytocin were used to observe the relaxing effects of RJTE. At the same time, propranolol is used in advance to study the influences on the effect of RJTE. Results: RJTE did not influence the spontaneous actions of isolated uterine smooth muscle of rats. However, it could markedly inhibit the contractile function of uterine strip for oxytocin. It decreased the contraction range and the contraction frequency, and showed no significant difference in the absence or presence of propranolol. Conclusion: The experiment of isolated uterine strips of rat proved that RJTE had significant anticonvulsive effect in uterine smooth muscle without obvious relation with 2receptor. Key words Ranunculus japonicus Thumb extractant; uterine smooth muscles; oxytocin毛茛（Ranunculus japonicus Thumb），为毛茛科毛茛属植物。全草含毛茛苷，其化学成分为原白头翁素（Protoanemonin，C5H4O2）1。传统医学认为，毛茛具有利湿退黄，温寒止痛，散寒通滞等功效，主要用于治疗疟疾、黄疸、偏头痛、胃痛、扁桃体炎、闭经等2。国外研究表明，毛茛=70乙醇提取物对乙酰胆碱、5-羟色胺所致的非妊娠大鼠子宫的收缩有明显的松弛作用。为进一步了解药物对子宫的作用，本研究采用离体子宫平滑肌实验观察毛茛提取液（Ranunculus japonicus Thumb Extractant, RJTE）对缩宫素诱发子宫收缩效应的影响。 1 材料1.1 实验动物 雌性未孕Wistar大鼠由贵阳医学院实验动物中心提供。合格证号为SCXK（黔）2002-0001。1.2 主要药品和主要试剂毛茛提取液（由贵阳医学院药学系药化教研室提供，已经鉴定，浓度为200%，批号：991231）；普萘洛尔（Prop，河南平原制药厂，批号：980421）；缩宫素（Oxy，上海生物制药厂，批号：970905）；维拉帕米（Ver，江苏连云港制药厂，批号：971104）。1.3 仪器BL-410型生物机能实验系统（成都泰盟电子有限公司），离体器官恒温水浴箱(江苏太仓医疗器械厂)。2 方法2.1 离体大鼠子宫肌条的制备3选择健康雌性大鼠，体重(180.425.3) g，于实验前2 d，每天皮下注射己烯雌酚0.1 mg?kg-1，促使动物处在动情前期或动情期，以提高子宫对药物的敏感性。第3 d，用颈椎脱臼法迅速处死大鼠，剖腹取出子宫，立即置于盛有乐氏液的平皿中。剥离附着于子宫角的结缔组织和脂肪组织。剪成长约1.52 cm子宫段，两端分别穿线，一端固定于通气钩，将标本转入盛有乐氏液的浴槽中，另一端系于联有BL410系统的张力换能器上，浴槽中温度保持在(370.5) ，浴槽中不断通予95O2和5CO2的混合气体，负荷1 g张力，平衡30 min，描记一段正常运动曲线，每组加药前，冲洗标本3次，待舒缩恢复到用药前水平后再加下一组药，标本数为10条。实验中所用药物浓度均以最终浴槽浓度计算。2.2 RJTE对离体大鼠子宫自发活动的影响描记一段正常子宫运动曲线后，分别向浴槽内加入RJTE（即0.1、0.5、5、10 mg?mL-1）5个浓度，Ver（0.3 mol?L-1），给药10 min后，开始记录每10 min子宫收缩频率（times?10 min-1）、幅度基线到最大波峰的距离（cm）二项指标，连续观察1 h。2.3 RJTE对缩宫素诱导离体大鼠子宫兴奋作用的影响描记正常运动曲线后，向浴槽内加入缩宫素005 U?10 mL-1，作用10 min后，分别给予RJTE和Ver（剂量同“2.2”）。10 min后，记录每10 min子宫收缩频率和幅度两项指标，连续观察1 h。2.4 RJTE舒张子宫平滑肌效应与2受体的关系用210-5 mol?L-1普萘洛尔处理标本5 min，之后加入缩宫素0.05 U?10 mL-1，待作用明显后，加入RJTE（1 mg?mL-1），观察在应用普萘洛尔后，RJTE对缩宫素所致子宫收缩的舒张作用，以舒张幅度百分数为指标即（给药前收缩振幅给药后收缩振幅）给药前的收缩振幅，并与未经普萘洛尔处理的对照组进行比较。统计处理：实验中各项数据均以s表示，在进行方差齐性检验后，用t检验比较各组间差异。3 结果3.1 RJTE对离体大鼠子宫自发活动的影响在给予RJTE后，离体子宫肌条的收缩振幅和频率与给药前比较，差异无显著性（P0.05），Ver组有所降低正常子宫收缩幅度和频率（P0.05，P001），见表1。表1 毛茛提取液对离体大鼠子宫平滑肌条自发活动的影响（略） 注：与给药前比较，*P0.05，*P0.01。3.2 RJTE对缩宫素诱导离体大鼠子宫兴奋作用的影响加入缩宫素后，子宫肌条逐渐收缩到最大张力，且收缩频率增加，给予相应浓度药物后，标本随即出现相应的舒张和频率的减慢，与给药前比较差异均有显著性（P0.05，P0.01），提示药物对缩宫素诱导的子宫平滑肌兴奋具有明显抑制作用，见表2。表2 毛茛提取液对缩宫素诱导离体大鼠子宫平滑肌兴奋的影响（略）注：与给药前比较，*P0.05，*P0.05)，见表3。表3 普萘洛尔对RJTE效应的影响（略）3 讨论毛茛在我国的应用已有一定的历史。现代医学用毛茛制成各种制剂或提取有效成分应用于临床，对许多疾病均有较好的疗效，如疟疾、黄疸、偏头痛、胃痛、痈肿、闭经等。国外研究表明，毛茛70乙醇提取物对乙酰胆碱和5-羟色胺所致的非妊娠大鼠子宫的收缩有明显的松弛作用，并有剂量依赖性。由此看出，毛茛在调节子宫收缩这一方面具有较好的研究价值和应用前景。对子宫平滑肌来说，刺激肾上腺能受体可引起子宫平滑肌的松弛，其中由2受体主要介导产生松弛作用。本次离体子宫平滑肌实验的结果显示，RJTE对正常子宫的自发收缩活动无影响，却能显著抑制由缩宫素所致的子宫平滑肌兴奋作用，表现为收缩幅度的减小和频率的减慢，同时，在使用肾上腺素受体阻断剂普萘洛尔后，该松弛作用未被完全阻断，说明药物的舒张作用与激动2受体无密切关系。但欲了解其具体的作用机制，尚需进行进一步的实验研究。参考文献1熊辅信,寸树芬编著. 中药现代研究荟萃M.昆明：云南科技出版社, 2002.158.2吴贻谷编著.中药大辞典M. 上海：上海科学技术出版社, 2002