液相色谱LC-20A(操作手册)V1.0.0.doc

目录目录 一一导读导读 2 二二软件安装软件安装 2 三三初步认识初步认识 2 四四实训内容介绍实训内容介绍 4 1 实训目的 4 2 实训原理 4 3 仪器与试剂 5 4 色谱条件 6 5 实验内容 7 五五仿真界面仿真界面 7 液相色谱测定柠檬黄 日落黄 胭脂红的含量液相色谱测定柠檬黄 日落黄 胭脂红的含量 一一 导读导读 本仿真系统是根据岛津 LC 20A 气相分析仪器及岛津 LCsolution 工作站软件进行开发的仪器分析系统 本操作手册主 要包括系统的基本操作知识以及模块的简单描述 其中工作站 的使用不在本手册范围 请参加相关手册 具体的实验要求参 见教师的相关教案 二二软件安装软件安装 参见 仿真软件安装 三三初步认识初步认识 1 软件启动 安装完软件后 可以通过下属两种方式启动仿真软件 启动方式一 在桌面点击仿真软件快捷方式 气相分析 软件 双击后可以运行软件 启动方式二 进入软件安装目录 找到 PISPNETRun exe 文件 双击后可以运行 2 运行方式选择 启动软件后 将会出现形如下图的界面 图 1 如果进行单机练习 则点击 单机练习 按钮 如果需 要连接教师站运行 请根据教师站配置信息输入相关基本信 息以及教师站地址 然后点击 局域网模式 按钮 出现培训项目选择界面后根据需要选择相关的培训项目 具体细节及变动根据软件培训而定 3 主界面认识 在程序加载完相关资源后 出现仿真操作主界面 图 3 3 1 程序主界面上部是软件标题栏 菜单栏 主场景上部是 五个功能按钮 分别是实验总览 原理图 理论测试 理论 知识 实验帮助 左下方是实验室场景缩略图 其余区域为 仿真操作区 四四实训内容介绍实训内容介绍 1 1 实训目的实训目的 认识液相色谱设备结构 学习定性分析方法 学习外标法定量分析成分含量 了解工作站功能和操作方式 学习色谱的理论知识 2 2 实训原理实训原理 色谱法的分离原理是 溶于流动相 mobile phase 中的各组分经 过固定相时 由于与固定相 stationary phase 发生作用 吸附 分配 离子吸引 排阻 亲和 的大小 强弱不同 在固定相中滞留时间 不同 从而先后从固定相中流出 又称为色层法 层析法 色谱法最早是由俄国植物学家茨维特 Tswett 在 1906 年研究 用碳酸钙分离植物色素时发现的 色谱法 Chromatography 因之得名 后来在此基础上发展出纸色谱法 薄层色谱法 气相色谱法 液相 色谱法 液相色谱分离系统也由两相 固定相和流动相组成 液相色 谱的固定相可以是吸附剂 化学键合固定相 或在惰性载体表面涂 上一层液膜 离子交换树脂或多孔性凝胶 流动相是各种溶剂 被 分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱 根据各组分在固定相及 流动相中的吸附能力 分配系数 离子交换作用或分子尺寸大小的 差异进行分离 色谱分离的实质是样品分子 溶质 与溶剂 即流 动相或洗脱液 以及固定相分子间的作用 作用力的大小 决定色 谱过程的保留行为 根据分离机制不同 液相色谱可分为 液固吸附色谱 液液分 配色谱 化合键合色谱 离子交换色谱以及分子排阻色谱等类型 3 3 仪器与试剂仪器与试剂 仪器仪器 日本岛津公司 型号 高效液相色谱 包括 LC 20AT vp PLUS 溶剂输送泵 A B 泵 柱温箱 自动进样器 CBM 10A VP PLUS 色谱数据工作站和电脑系统 分析实验室常用的玻璃仪器 容量瓶 移液管 安玻瓶等 超声波脱气仪 真空抽滤机 超纯水制水机 溶剂过滤系统等 试剂试剂 合成着色剂 柠檬黄 日落黄 胭脂红 标准溶液 国家标准物 质中心 甲醇 HPLC 级 蒸馏水 4 4 色谱条件色谱条件 色谱柱 梯度洗脱 5 5 实验内容实验内容 1 样品预处理样品预处理 选择仪器和试剂 选择仪器和试剂 制备超纯水 制备超纯水 配置流动相 配置流动相 流动相过滤 流动相过滤 2 样品制备样品制备 配置标准溶液 配置标准溶液 3 数据采集数据采集 开机 开机 开机清洗 开机清洗 平衡系统 平衡系统 新建数据采集方法 新建数据采集方法 批处理 批处理 清洗系统 清洗系统 关机 关机 4 数据处理数据处理 积分 积分 数据比较 数据比较 标准曲线 标准曲线 分析未知样 分析未知样 五 实验详细步骤提示五 实验详细步骤提示 实验过程 详细步骤 给值 配置标准样品 配置标准样品 1 号 单标 点击 确定 按钮确认信息 柠檬黄 10 胭脂红 0 日 落黄 0 配置标准样品 2 号 单标 点击 确定 按钮确认信息 柠檬黄 0 胭脂红 10 日 落黄 0 配置标准样品 3 号 单标 点击 确定 按钮确认信息 柠檬黄 0 胭脂红 0 日 落黄 10 配置标准样品 4 号 混标 点击 确定 按钮确认信息 柠檬黄 5 胭脂红 5 日 落黄 5 配置标准样品 5 号 混标 点击 确定 按钮确认信息 柠檬黄 7 胭脂红 7 日 落黄 7 配置标准样品 6 号 混标 点击 确定 按钮确认信息 柠檬黄 10 胭脂红 10 日落黄 10 配置标准样品 7 号 混标 点击 确定 按钮确认信息 柠檬黄 15 胭脂红 15 日落黄 15 配置标准样品 8 号 混标 点击 确定 按钮确认信息 柠檬黄 20 胭脂红 20 日落黄 20 目的 考察配置标准样品和样品过滤 开机 开机前检查 确认流动相配置完毕 并且放到摆放流动相的架子中 开机前检查 确认色谱柱已经连接好 开机前检查 确认已将电源插头分别插入插座 接通不间断电源 打开 CTO 20A 柱温箱电源开关 打开色谱泵 A 泵电源 打开色谱泵 B 泵电源 开启检测器电源 待泵和检测器自检结束后 打开自动进样器 SIL 20A 电源 打开电脑主机 打开色谱工作站软件 LCsolutionLite 点击 分析 图标 启动 实时分析 系统 考察目的 开机顺序 能正常开机 平衡 系统 在工作站 实时分析 窗口 点击 泵开关 启动双泵 确认启动色谱泵 B 确认启动色谱泵 A 新建数据采集方法 确认选择 高级 设定 新建 点击工作站 文件 菜单上 新建方法 按钮 根据分析物质 填写实验方法 方法 数据采集 在 LC 停止时间 L 上输入时间 方法 数据采集 点击 应用于所有采集时间 按钮 将 LC 停止时间应用于采集时间 其余默 认设置 LC 时间程序 根据分析物质 填写 LC 时间程序表 方法 泵 在泵的 模式 上选择 二元梯度洗脱 在 泵总流速 上输入流速 1mL min 质量分 泵总流速 为 1mL min 方法 泵 在 泵 B 浓度 B 上输入初始浓度 10 质量分 泵 B 浓度 B 为 10 方法 泵 压力设置 泵 A 的 最大值 上输入最大压力 15 19MPa 质量分 压力设置 泵 A 的 最大值 为 15 19MPa 方法 PDA 检测器 选择检测器灯 L 为 D2 W 即氘灯和钨灯两种 方法 PDA 检测器 设置 开始波长 方法 PDA 检测器 设置 结束波长 其余默认 保存 点击 文件 菜单上 方法另存为 按钮 将所编辑的方法保存在预先设置好的文件夹 中 发送方法 点击 下载 按钮 调出 LC 实时分析 提示框 点击 确定 将参数发送至仪器 点击 绘图 按钮 绘制流出曲线图 目的 新建数据采集方法 发送方法 批处 理 调出批处理系统 点击 新建 按钮 准备新建一个批处理文件 点击 向导 调出 批处理表向导 批处理表向导 填写方法文件名和其他设置 点击 下一步 批处理向导 标准位置 选择样品类型 点击 下一步 批处理表向导 标准样品 填写数据文件名 校准级别书等 点击 下一步 批处理表 未知样品 填写数据文件名和其他信息 点击 下一步 批处理向导 汇总报告 点击 完成 自动生成批处理表 点击 文件 另存批处理文件 保存刚刚生成的批处理文件 点击批处理 开始 按钮 运行批处理表 采样结束 数据处理 积分 启动工作站 再解析 进入 PDA 数据分析 窗口 打开 实时分析 得到的数据文件 点击 向导 打开 化合物表视图 界面 设置化合物表 向导 完成每个页面设置 点击 完成 此时即完成了对样品峰的积分 定性 定量标准的设 定 保存数据文件 点击 文件 保存 保存积分处理后的数据文件 保存方法文件 点击 文件 另存方法为 保存数据分析的方法文件 数据处理 数据比较 在 LC 数据分析 窗口点击 数据比较 打开 LC 数据比较 窗口 通过标准样品的单标图谱和未知样图谱对比 确认未知样图谱中待测组分的峰 数据处理 标准曲线 在 LC 数据分析 窗口点击 校准曲线 打开 LC 校准曲线 窗口 点击 文件 打开方法文 件 打开数据分析方法 在 化合物表视图 中 点击 编辑 输入目标化合物名称 其标准保留时间和相应的浓度 点击 查看 自动生成标准曲线 校准曲线 点击 文件 菜单中 另存方法文件 保存标准曲线文件 数据处理 分析未知样 切换至 PDA 数据分析 窗口 打开一个未知样图谱 并进行积分 点击 文件 加载方法 导入已经设定好的