子宫内膜腺癌组织B7-H4表达及意义.doc

子宫内膜腺癌组织B7-H4表达及意义作者：吕艳华,祁秀娟单位：青岛大学医学院附属医院妇科，山东 青岛【摘要】 目的 探讨B7同源体4（B7-H4）在子宫内膜腺癌组织表达情况以及与预后的关系。方法 用免疫组织化学PV-6000二步法测定B7-H4在50例子宫内膜腺癌、20例正常子宫内膜组织中的表达情况，并评价其与临床病理特征的关系。结果 子宫内膜腺癌组织中B7-H4在胞浆和（或）胞膜表达，阳性表达率为94.0% (47/50)，显著高于正常子宫内膜组织中的表达率（Z=-6.340，P<0.05）。子宫内膜腺癌组织中B7-H4表达与组织分化、FIGO分期有关。结论 B7-H4在子宫内膜腺癌中表达上调，与肿瘤分期及分级密切相关。B7-H4有望成为子宫内膜腺癌新的诊断和预后判断指标。 【关键词】 子宫内膜肿瘤 B7-H4 免疫组织化学研究结果显示，肿瘤细胞能逃逸机体的免疫监视而发生发展与肿瘤细胞高表达B7分子有关，B7同源体4（B7-H4）是B7家族中最新发现的一个新成员。目前国外研究表明，B7-H4在子宫内膜癌组织中高表达，而在正常子宫内膜组织中不表达或低表达2。本研究用免疫组化方法检测50例子宫内膜腺癌组织中B7-H4的表达情况，探讨B7-H4的表达强度与子宫内膜腺癌临床病理特征之间的关系，同时分析B7-H4在恶性肿瘤诊疗及预后判断等方面的潜在价值。 1 材料和方法 1.1 标本来源 选取本院2000年4月2007年4月间行手术治疗的子宫内膜腺癌病人标本50例。病人年龄为4080岁，平均（54.4±8.8）岁；术前均未接受任何治疗。病人均无子宫肌瘤、子宫内膜异位症等其他雌激素相关疾病,诊断均经病理检查证实。 标本组织学分化：高分化16例，中分化20例，低分化14例； FIGO分期（2000年标准）：期18例，期17例，期15例。同时，选取因宫颈癌a 期行子宫切除病人的正常子宫内膜20 例（增生期10例，分泌期10例）作为对照组。 1.2 检测方法 鼠抗人B7-H4抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。采用免疫组化PV-6000二步法，按其试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）说明书进行操作，用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。 1.3 结果判定 以细胞浆及细胞膜出现棕黄色颗粒状物为B7-H4阳性染色。染色结果判断标准采用Fromowitz阳性细胞半定量分级法：阳性细胞数<10%为0分，10%25%为 1分，26%50%为2分， 51%80%为3分，>80%为4分；细胞染色强度，阴性为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。根据阳性细胞数与相应染色强度之和判定染色结果：01分为阴性；27分为阳性，其中25分为低表达(+)，67分为高表达()。 1.4 统计学分析 采用SPSS 13.0及PPMS 1.53统计软件包，应用 Wilcoxon W 秩和检验、Fisher精确检验法进行统计学处理。 2 结 果 2.1 子宫内膜腺癌组织中B7-H4的表达 B7-H4蛋白表达于子宫内膜癌细胞的细胞浆及细胞膜，呈弥漫性颗粒状染色，在正常子宫内膜中低表达或未表达。B7-H4在子宫内膜腺癌中阳性表达率为94.0%（47/50），显著高于正常子宫内膜组织（Z=-6.340，P<0.05）。见表1。 2.2 子宫内膜腺癌组织中B7-H4的表达与临床病理特征的关系 B7-H4在子宫内膜腺癌中表达与癌细胞组织分化、FIGO分期有关，低分化子宫内膜腺癌B7-H4的表达率显著高于高中分化者（P=0.011），B7-H4在子宫内膜腺癌组织中的表达随手术病理分期上升而明显增强（P=0.035）。B7-H4的表达与血清中CA125水平无关。见表2。表1 B7-H4在正常子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的表达表2 子宫内膜腺癌组织B7-H4表达与临床病理特征的关系 3 讨 论 B7-H4是最近新确定的B7共刺激分子家族中的成员,是细胞表面糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族。B7-H4的转录形式可以表达于肺、睾丸、胰腺、肾和肝等组织中,然而,在蛋白水平上却表达很少。鼠模型中,注入B7-H4单抗能够促进细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对微量的同种异型抗原的反应4。在体外,抗原信号刺激后B7-H4可阻止T细胞周期的活性,降低细胞的增殖和细胞因子的分泌4。上述研究表明，B7-H4在T细胞免疫中起抑制作用。 本研究结果显示，B7-H4在子宫内膜腺癌中呈弥漫性颗粒状强表达，而在正常子宫内膜中呈稀疏点滴状弱表达，子宫内膜腺癌中表达率显著高于正常子宫内膜组织，且子宫内膜癌病人的B7-H4水平随内膜癌病灶范围的扩大、肿瘤肌层浸润深度的增加而升高，阳性率随子宫内膜腺癌分期的增高而升高。说明B7-H4可能为子宫内膜腺癌新的具有诊断价值的肿瘤标志物。 肿瘤细胞分化程度为肿瘤恶性生物学活性的标志之一，分化越差恶性度越高，肿瘤预后越差57。本研究结果显示，B7-H4表达强度与肿瘤的细胞分化明显相关，低分化癌细胞B7-H4的表达强度明显高于高中分化癌细胞。 尽管B7-H4 在恶性肿瘤细胞上表达的意义还没有确定,但是一些基础研究表明，B7家族及其受体可以通过抑制T细胞活化细胞因子的分泌和抑制细胞毒效应来调节抗原特异性的免疫反应7。肿瘤细胞上B7-H4 所激活的信号通路有待于进一步明确。肿瘤微环境可以导致局部的免疫功能低下,而肿瘤微环境则包括肿瘤细胞分泌的可溶性抑制因子和直接诱导的细胞间的抑制信号。B7-H4 可使细胞连接抑制作用加强7。因此,肿瘤细胞B7-H4的表达很可能有助于肿瘤细胞逃避免疫攻击。 综上所述,B7-H4高表达于子宫内膜腺癌细胞中,并与肿瘤的浸润程度及级别显著相关,表明B7-H4可能与肿瘤的进展和预后相关, 有望成为子宫内膜腺癌诊断和预后价值判断的新的分子标志物。但B7-H4在子宫内膜腺癌发生、发展中具体作用机制尚不十分明确，仍需要进一步的研究。【参考文献】 SICA G L, CHOI IH, ZHU G, et al. B7-H4, a molecule of the B7 family, negatively regulates T cell immunityJ. Immunity, 2003,18(6):849-861.2TAKASHI M, BARBARA T, LIU W H, et al. B7-H4 (DD-O110) is overexpressed in high risk uterine endometrioid adenocarcinomas and inversely correlated with tumor T-cell infiltrationJ. Gynecologic Oncology, 2007,106:119-127.3周晓彬,纪新强,徐莉. PPMS统计软件的功能及其应用J. 青岛大学医学院学报, 2009,45(1):91-93.4PRASAD D, RICHARD S, MAI X, et al. B7S1, a novel B7 family member that negatively regulate T cell activationJ. Immunity, 2003,18(6):863-873.5曹泽毅. 中华妇产科学M. 第2版.北京:人民卫生出版社, 2004:1736-1780.6孟丽,山峰,刘相萍,等. 子宫内膜癌组织uPA 和PAI21mRNA表达及其意义J. 青岛大学医学院学报, 2008,44(3):241-246.7CA