全自动生化分析ABS界限简介.doc

生化仪ABS界限值说明ABS limit：即吸光度界限值，对于速率法的项目来说的。当浓度或活性超过定量范围时，就无法得到正确的数据，因此对吸光度设定一个界限值。 举ALT下降反应来说，一般反应ABS要求在1.0A以上，目的是为了当遇到试剂的定量范围高值时，比如1000U/L时，反应检测点的曲线仍为线性，因此需要有一定的吸光度保证，这个1.0A就是保证1000U/L时反应检测点的曲线仍为线性（注意：不是整个曲线），当然低于1.0A并不是不能用，检测低值还是可以的，但对高值就不准了，一般仪器也会报警告诉线性不好，结果不可靠。 当然低于1.0A并不是不能用，检测低值还是可以的。不可以这么说，因为此处的1.0A指示的是反应底物的浓度，低于1.0就是底物浓度过低，在酶类反应过程中当底物浓度过低时反应速度不再与酶活性成正比，造成线性段缩短，线性限降低，再因为测定时间参数都是测试前设置好的，不可能临时去调整（GLP也不允许），这样即便是低值样品也很有可能读取到非线性段，结果就不可靠了。所以，试剂厂家为了从反应底物方面保证结果可靠性，会给出具体的吸光度限定值。再从另一个角度说:样品值的高低事先是不知道的，只有测定了才知道，如果审核结果时不看反应曲线，单看结果数值，真值是高值样品就会发出错误报告。这和看血常规的直方图、散点图去审核结果一样。 教科书上关于酶类反应速度的解释： 我可能对楼主的ABS limit理解有误，楼主的概念可能是反应中的ABS limit，那么其意义就如同我下面所说的第二点。在这里不想就ABS limit到底是什么来谈，就想说仪器是如何保证速率法结果准确的。以下以日立仪器，ALT试剂来谈。1. 首先，仪器有S1ABS limit，在这里的设置是为了保证试剂的线性高值能达到要求说设的。具体可参照我9楼的内容。2. 然后，仪器有 ABS limit设置，这是对反应曲线的观察，这个设置是对试剂的经验指数，比如ALT，一般吸光度降到4000-6000后就很难保证反应成线性了，因此一般就将ABS limit设置为4000-6000，当反应的点低于此点后仪器就会报警。3. 最后，仪器有线性判断，对检测点间的线性进行判断，可以发现是否有跳点，或者底物耗尽等，当然此线性判断的标准是不高的。实际在反应中，虽然是零级反应，但由于试剂反应体系、仪器的误差，每个检测点间隔值并不是一样的，有时差别还不小。到后期时会越来越小。研发人员一般都是参照实际检测结果来调整试剂原料量。通过这三点，仪器基本就能保证速率法试剂检测结果的正确性，除试剂本身有问题除外。 在9楼时我说低于1.0A也可用，是基于省钱的目的，因为根据前面说述第2、3点，对于高值如果底物耗尽自然会报警的，现在有的仪器都允许用户检测后调整检测点，都是为了方便用户。当然同时能保证第一点就更好了。 至于10楼所说的低于1.0就是底物浓度过低，在酶类反应过程中当底物浓度过低时反应速度不再与酶活性成正比，造成线性段缩短，线性限降低。后半段正确，前半段不能说对错，看怎么理解。我这里只是说虽然空白在1.0A以上，但检测中检测点的吸光度在1.0A以下是很常见的，当然对计算也没啥问题，还有上面的第二点来保护结果的准确。我来说两句：1.S1ABS limit是用来监测校准的，就是水加试剂后的反应中A不能超过或低于某个值，报警说明试剂质量有问题或设置有误。2.ABS limit就是底物耗尽限，主用来监测标本测定的，报警说明样本浓度过高或试剂变质或设置有误。3.线性限