肺癌基因检测--赖仁胜？.ppt

肺癌分子靶向标志基因检测 江苏省中医院江苏省中西医结合肿瘤研究中心APEC KRAS中国区中心实验室 2010ASCO 肺癌生物标志 BestofASCOChina吴一龙 关键是生物标志筛选患者二线晚期NSCLC BR 21研究 厄罗替尼有效率仅8 9 筛选mEGFR后 OS 疾病控制率高达89 8 Rosell INTEREST研究 吉非替尼有效率仅9 7 PFS仅2个月 OS仅7个月 IPASS研究 生物标志筛选mEGFR 吉非替尼治疗RR PFS OS均显著改善 NSCLC EGFR TKI 未选治疗 RR30 左右临床指标选择 皮疹 优势人群 RR50 左右生物指标选择 EGFR RR70 80 左右 K RAS T790M 89 95 左右吴一龙中国医学论坛报B叠2010 7 22 NSCLC EGFR TKI研究方案选择mEGFR治疗 远优于化疗IPASSSLCGNEJGSGgefit pacli carbo PFSHR0 357 P 0 001 WJTOG 不选mEGFR治疗 疗效劣于安慰剂BR 19SWOGS0023 EGFR TKI疗效双刃剑 IPASS研究 mEGFR吉非替尼治疗 优于化疗wEGFR吉非替尼治疗 劣于化疗 我们不能对患者不加选择用TKI实验治疗无效再换 吴一龙 中国医学论坛报B叠2010722 TKI抑制剂和EGFR近年相关研究 EGFR突变 2010 3上海会议 EGFR基因 1906点突变 18缺失 30外显子 TKI区 17 32 66点突变 13种缺失 新突变 直接测序 重复性好 敏感性10 特异性99 18 21显子 已知29种突变和缺失 ARMS 多重PCR 18 21外显子 已知11种突变和缺失 PYSEQN 23bp 18 21外显子 已知多种突变 缺失 DHLPC 内参对照 其他 敏感性好 特异性差 重复性差 SATURN研究 1 特罗凯显著延长总人群和亚裔人群PFS HRO0 71 0 57 TTP RS降低 MEGFR90 WEGFR22 PFS改善 SD HR0 68 RR HR0 74 OS20 8mRS降低 全组19 亚裔33 2 除EGFR突变外 IHC FISH CA n K ras预测意义 2009ESMO ECCO 易瑞沙mEGFR改善PFS优于化疗 无种族 无病理差异wEGFRPT化疗 加大死亡风险 HR 2 8 wEGFRPFS低于化疗 中位OS6 4m IPASS INTEREST2009 mEGFRRR易瑞沙37 5 特罗凯30 0 wEGFRRR易瑞沙2 6 特罗凯7 5 总体 OS特罗凯6 7mo 安慰剂4 7moISEL NSCLCIIIB IV OS 易瑞沙5 6mo 安慰剂5 1mo BR 21研究2005 Paz Ares汇总分析 mEGFRPFS 特罗凯 365 13 2mo 易瑞沙 1065 9 8mo化疗 375 5 9momEGFR基因突变是NSCLC预测唯一独立因素注 50 患者在4 6m出现M617耐药突变 易瑞沙试验用药时间明显长于特罗凯和化疗 Paz Ares汇总分析 NSCLCII III线联合治疗 EGFR TKI无论w m型均有一定获益I线治疗EGFR TKI金标准 mEGFR外周血mEGFR检测率较低 RADIANT 注 本院2005年测序血液20例突变均 2005 2010测序肿瘤379例突变率32 mEGFR挑战 肿瘤标本获取 富集 部位 方法 途径 质量 Shepherd研究 NSCLC复治 无突变研究 死亡风险比 厄罗替尼与培美曲塞 2010NCCNv 2 MS6 EGFR 方法 突变 拷贝量 表达水平mEGFR10 15 Caucasian 30 40 Asian预后 Tsao 随机对照 二线易瑞沙和安慰剂40 177 20 50 E19del或L858R化疗 易瑞沙 OS突变组 20月野生组10月预测 初期 突变者对易瑞沙的反应近90 细支气管肺癌ORR 80 中位PFS13月北美NSCLCORR 55 中位PFS9 2月化疗 特罗凯 最近 突变者对特罗凯的反应 EGFR共识 吴一龙 mEGFR是吉非替尼和厄罗替尼疗效预测因子 推荐对初治晚期患者检测后决定治疗策略早期和局部晚期患者不确定mEGFR作为疗效预测因子推荐以直接测序法作为mEGFR常规方法直接测序法检测mEGFR效能优于EGFR基因拷贝数 EGFR基因表 免疫组化 不能作为疗效预测因子中国医学论坛报B叠2010 7 22 EGFR分子分期 循证医学的个体化分期时代EGFR突变类型与治疗分期TKI治疗敏感期 初治期 肿瘤细胞主要突变 19exon各种突变 66种 21exonL858L突变TKI治疗耐药期 IV期 CTC细胞主要突变 20exonT790MJCO2007 对III IV期PS3 4 吉非替尼治疗EGFR19 21突变 无T790M者中位OS16月未筛选含T790M者中位OS9 8月 K ras基因 NSCLC 预后与预测 K ras突变 生存预后差K ras突变 CIS 长春瑞滨辅助化疗不获益预测因子K ras突变 TKI类靶向治疗不敏感预测因子 META mK ras RR3 wK ras 26 尚存争议 2010NCCNV 2个体性化疗标志物 ERCC1 1 IALT随机对照研究 高表达铂类耐药预测因子NEJM2006低表达铂类化疗获益预测因子RR53 2 早期NSCLC复发低风险预后因子ERCC1 RRM1同时高表达复发低风险预后因子NEJM2007共识 qPCRmRNA高表达铂类耐药认可 不足以在治疗方案中推荐 2010NCCNV 2个体性化疗标志物 RRM1 qPCRmRNA表达是吉西他滨耐药预测因子局部晚期NSCLC吉西他滨 顺铂化疗肿瘤缓解与RRM1表达水平呈负相关认可 尚不足以推荐临床常规应用 2010NCCNV 2个体性化疗标志物 TS 肺腺癌TSqPCRmRNA表达水平较低 培美曲塞 伊罗泽疗效预测好肺鳞癌 肺小细胞癌的TSqPCRmRNA表达水平较高培美曲塞 伊罗泽疗效预测差TSqPCRmRNA表达对抗微管类药物预测高表达是敏感性预测因子 但不足以临床推荐 NSCLC 新的预测预后标志 EML4 AKL融合基因 NSCLCEML4 ALKpositive medianTTP9monthsmedianOS17monthsEML4 ALKnegative medianTTP6 2monthsmedianOS11monthsG Altavillaetal EML4 ALKfusiongeneinlungadenocarcinoma Aretrospectiveanalysisoftheoutcomeofcisplatinpluspemetrexedtreatedpatients 2010ASCOAnnualMeeting AbstractNo 7610 EML4 ALK分子标志作用 NSCLC Shawetal alsoconcludedthatpatientswithEML4 ALK positiveNSCLChaveasuperioroutcomecomparedwithWT WTpatientsbyusingthemethodsofFISHtodetect G Altavillaetal EML4 ALKfusiongeneinlungadenocarcinoma Aretrospectiveanalysisoftheoutcomeofcisplatinpluspemetrexedtreatedpatients 2010ASCOAnnualMeeting AbstractNo 7610 MariaPaolaMartellietal TheAmericanJournalofPathology 2009 174 2 661 670 RT PCR 5 variant1 E13 A20 variant3 E6 A20 0variant2 E20 A20 PCRsequencing comformRT PCRresultsFISH onlyaminorityofcellsharboredtheEML4 ALKgeneWesternblot failedtodetectImmunoprecipitation failedtodetect 我科EML4 ALK实例 Results RT PCR 5 variant1 E13 A20 variant3 E6 A20 0variant2 E20 A20 PCRsequencing comformRT PCRresultsFISH onlyaminorityofcellsharboredtheEML4 ALKgeneWesternblot failedtodetectImmunoprecipitation failedtodetect 我科EML4 ALK实例 variant1 我科EML4 ALK实例 variant2 我科EML4 ALK实例 variant3 我科EML4 ALK实例 BRCA1 b TUBULIN 微管类抑制剂疗效相关 BRCA1mRNA高表达b TUBULINmRNA低表达我院约300例NSCLC石蜡标本检测 SCLC 肺小细胞癌生物标志 2010ASCO 小细胞癌不是遗忘的角落旨在新药 靶疗和治疗模式的转化研究和探索SPEAR研究 新型化疗药物Picoplating ERCC1联合BSC 单用BSCMTS21周 20周OS18周 14周PFS TTP无差异ABT 263 bcl 2小分子抑制剂bcl 2重排 bcl 2融合基因qPCR表达ASCO 氨柔比星 托泊替康毒性增大 TOPOII扩增 SCLC 肺小细胞癌生物标志 EGFR突变ASCO报道 受外科手术标本的限制有一定的EGFR突变率本院病例 G06 196SCLC 肺穿刺活检直接测序 EGFRdel 2235 2246 19exonIRESSA口服 缓解 AbstractNo 7514 R Rosell Outcometoerlotinibinnon smallcelllungcancer NSCLC patients p accordingtothepresenceoftheEGFRT790MmutationandBRCA1mRNAexpressionlevelsinpretreatmentbiopsies Conclusions Thehighfrequencyofpretreatmentdoublemutationsconcurswithapreviousreport Maheswaranetal NEJM2008 ThestronginfluenceofT790MandBRCA1levelsonerlotiniboutcomecanleadtonovelpersonalizedtreatmentstrategies AbstractNo 7615 131patientswithstageIIIB wet andIVNSCLC qRT PCRwasusedtoanalyzethetumoralexpressionResults ThemRNAlevelsofTXR1 TSP1wereinverselycorrelated Spearman stest 0 37 p 0 001 LowTXR1mRNAlevelswereassociatedwithhigherresponserate RR p 0 018 longermedianprogressionfreesurvival PFS p 0 029 andmedianoverallsurvival mOSp 0 003 whilehighTSP1expressionwasalso correlatedwithhigherRR p 0 035 longerPFS p 0 0001 andmOS p 0 0001 Inaddition patientswhoseprimarytumorspresentedhigherBRCA1mRNAexpressionexperiencedhigherRR p 0 028 andincreasedPFS p 0 021 butnotmOS p 0 4 incomparisonwiththosewithlowBRCA1tumoralexpression chemotherapyresistanceinpatientswithadvanced metastaticnon smallcelllungcancer C Papadaki AbstractNo e18051 C Zhou TherelationshipofEGFRintron1 CA andmicrosatellitepolymorphismandtheefficacyofEGFR TKIinadvancedNSCLCpatients70patientssequencedinanABI3100Conclusions EGFR CA nrepeatsmaybeanotherbiomarkertopredicttheeffectofEGFR TKI patientswithalownumberofEGFreceptorCArepeats anyallele 17CA aremorelikelytohaveabetterclinicaloutcomethanpatientswithahighnumberofCArepeats bothalleles 17CA duringtargetedtherapywithEGFR TKI benefitedmorefrom anti tubulincontainingregimen platinum containingregimen gemcitabine containingregimen 85patients OS 13months range10 8 15 2 TTP 6 1months range5 5 6 7 OS Medianoverallsurvival ERCC1 LvsERCC1 H 16 5monthsvs 10 0monthsp 0 045 ERCC1 L ERCC1 H 6 5vs 5 1months p 0 001BRCA1 L BRCA1 H 5 2vs 6 5months p 0 019 TTP Timetoprogression AbstractNo e18045ERCC1 RRM1andBRCA1arepromisingpredictiveandprognosticbiomarkersinadvancednon smallcelllungcancer ERCC1 RRM1 andBRCA1mRNAexpressionlevelsandclinicaloutcomeofadvancednon smallcelllungcancer ProjectTest腺癌 无脑转移 Avasting 双药VEGFRmRNA腺癌 脑转移 力必泰 卡铂TS ERCC1mRNAC225 双药EGFR copy EGFR w FISH TKI 双药EGFR测序 FISHEGFR w FISH 双药EGFR测序 FISH 肺癌 FrombestofASCO2009 鳞癌以外的NSCLC力必泰 铂类 TS ERCC1mRNA鳞癌标准化疗 RRM1 ERCC1 BRCA1 TS 亚洲人用Avastin GP方案更好OS 17 4m 亚洲 10 9m 欧美 亚洲人低剂量Avastin比欧美人低剂量更好OS 28 2m 亚洲 13 6m 欧美 说明 人种基因在个体性化疗中存在差异 检测基因表达 VEGFR VEGF RRm1 ERCC1 肺癌 期 C225对OS未发现基因和免疫组化标志OS K ras EGFRm EGFRFISH和免疫组化C225对肺癌OS存在阳性意义 C225 CT皮疹 三周后 OS 8 8 m 15 6 m TKI一线选择女性不抽烟腺癌 安慰剂PFS12 16 m TKI首要选择EGFR突变 化疗 CP PFS20 8 m RR47 3 1 EGFR突变是影响TKI疗效的独立因素 性别 人种病理类型无关 特罗凯 易瑞沙 力比泰未见特别差异 免疫组化 EGFR EGFRFISH表达与疗效无明显差异 EGFR突变抗体 单中心报告 需要验证 中国肺癌500例 09 10结束 EGFR突变 特罗凯单药 n 143 150mg day标准一线 GC 有阳性结果我院单中心报告 附件70 中国人 CA n 16 60 欧美人 CA n 15 江苏省中医院病理科 单中心 五年EGFR突变TKI序贯治疗数据 附件 116例肺癌石蜡组织 20例肺癌血液对照 45例TKI治疗随访 JRW RSLai ASCO2009 116例肺癌EGFR CA n测序和TKI疗效 2005 2008 我院6年来EGFR直接测序统计 各种肿瘤检材 479例 总突变率19 7 肺癌石蜡肿瘤 277例 总突变率25 6 检材类型 石蜡切片 穿刺石蜡切片 穿刺涂片 痰涂片 胸水涂片 快速冰冻片 HE染色突变类型 31种 点突变15种 插入 缺失16种 CA n类型 16次重复184例 16次重复 39例 肺癌共338例 突变82例 总突变率24 26 石蜡277例突变71例突变率25 632 痰1例突变0突变率0涂片2例突变1例突变率50 血22例突变1例突变率4 545 新鲜组织5例突变3例突变率60 胸水31例突变6例突变率19 355 EGFR突变情况 EGFR突变亚型EGFR第19外显子缺失 插入突变 2235 2250 2235 2249 2236 2250 2236 2257 2236 2253 2238 2255 2239 2252 2239 2256 2239 2253 2239 2247 2240 2254 2240 2253 2240 2252 2240 2257 2241 2249 2235插入 CTC EGFR第19外显子点突变 2237A T P741P E746V L747P EGFR突变亚型EGFR第21外显子L833V H835L G857G L858R L859R L861Q 870位A G其他位置突变 第18外显子上游第104位T G第21外显子上游第39位G A第21外显子下游第94位A G EGFR无突变晚期肺癌 NSCLC一线治疗 OS 31 3 23 7一线标准化疗Gem CisRRM1 ERCC1三代化疗Gem S Tarciva序贯FAST中国人OS31 3 m 有EGFR CA n种族敏