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文档简介

实验针灸学实验指导实验针灸学教室编二零零四年二月目 录前言1实验(一) 循经感传的观测 4实验(二) 经穴低电阻特性的探测 5实验(三) 动物实验基本操作练习 7实验(四) 针灸作用的时间效应关系的实验观察 9实验(五) 针刺“肾俞”穴对家兔肾脏泌尿的影响11实验(六) 针刺对家兔失血性休充血压的影响13实验(七) 针刺“足三里”穴对家兔血管运动机能的影响15实验(八) 针刺对“瘀血“家兔球结膜微循环的影响(示教)17实验(九) 针刺“足三里”穴对家兔巨噬细胞吞噬机能的影响19实验(十) 痛阈测定和针刺镇痛实验21前 言一、实验针灸学实验课的目的和要求实验针灸学实验课的目的是对学生进行针灸基本实验方法和实验技能的训练,培养学生的科学思维方法和科学工作态度,提高分析问题和解决问题的能力,并验证一些基本的针灸理论,使学生在掌握了传统针灸学基本理论、基本知识和技能后又能了解近代针灸实验研究的基本原则与方法,具有进行针灸科学实验的初步能力,以适应针灸事业面向世界、面向未来的需要。实验课是理论教学进一步深化的过程。通过实验课教学,要求了解针灸实验(包括人体试验、动物急慢性实验)的一般原则和方法,理解实验设计、实验过程的观察及记录的重要意义,熟悉几种常用的针灸实验动物模型的复制方法及手术操作,熟识几种常用仪器的使用和操作。如果学生通过所安排的实验和分析讨论,产生了不满足于教科书或教师讲授的内容,甚至引出了更高水平的实验设计的构思和兴趣,那么这就达到了我们的主要目的。实验课的具体要求如下:(一)、实验前准备(1)、仔细阅读实验指导,了解实验目的、原理、要求、实验步骤和方法;(2)、复习本次实验内容有关的理论和测试仪器的原理,充分了解各项目预期出现的结果,并在实验中加以验正。(二)、实验中(1)、弄清每次实验的目的、原理、实验步骤、操作方法和注意事项后才开始实验;(2)、在实验过程中,要有严格的科学态度,要严肃认真地进行操作,仔细观察,如实记录,要边观察边思考,做到理论联系实际;(3)、在实验操作过程中,遇有解决不了的疑难时,找教师或技术员帮助,要爱护实验器材,节约动物及实验用品。(三)、实验后(1)、整理好实验器材和实验用品,实验过的动物要放到指定地方。所用的器材要擦干净后放回原处,如有缺少或损坏,应立即报告负责教师并进行登记;(2)、整理实验结果,写好实验报告并按时交给任课老师批阅。二、书写实验报告的要求(一)、实验结果的处理和表达(1)、凡属测量数据均应以正确的单位和数据定量,不能简单地提示(如呼吸变快或温度上升等),而应标出具体数值及单位;(2)、凡有曲线记录的实验,尽量用曲线记录结果。在曲线上应标注说明,要有刺激、给药或针刺(电针、艾灸)施加符号和时间标记,要准确反映出效应变化与处理之间的时相关系;(3)、实验结果的表达要选择最佳形式,用文字或用图表,原则是力求最省篇幅、最利于揭示某种变化过程的差异或规律。(二)、书写实验报告的注意事项(1)、书写实验报告是培养自己有科研论文写作能力的最好机会,每个初学者均应重视,并把它当成一篇科研论文来写作,而且要按时完成,以供任课教师评阅和考核; (2)、要求文字简练、通顺,书写清楚整洁、数据准确、图表清晰、布局合理,篇幅也要严格控制; (3)、实验结果的表达是实验报告的重要部分,既要忠实、准确,又要简明扼要,并且要选择最能显示出对效果或差异性的表达形式;(4)、讨论 :这是用自己现有的理论知识,对实验结果进行分析、解释和评价,从而引出结论的理性思维过程,要判断结果是否为预期的?若出现非预期的结果则要分析其可能的原因,还需指出实验结果包含的意义及价值、这里要求紧紧扣住主题,突出重点,论证有据,推理正确,文字精练。三、实验规则(1)、自觉遵守学习纪律,不迟到早退,不无故缺席,有要事须向教师请假;(2)、实验前须认真预习实验指导及有关理论的内容,认真地进行实验操作,在实验中不进行与实验无关的活动;(3)、实验室要保持安静,不要喧哗;(4)、爱护仪器,节约试剂,凡属贵重仪器不得随意搬弄;(5)、损坏仪器必须向任课教师报告,必要时要赔偿;(6)、不得把污物扔进水池,以免堵塞;(7)、实验完毕必须洗净仪器,放回原处;(8)、实验结束,清洁桌上、地面,关好水、电和门窗。二零零四年二月实验(一) 循经感传的观测 (一)实验目的 掌握循经感传(包括显性感传和隐性感传)的观测方法,了解循经感传的基本特征。 (二)实验器材 G6805型治疗仪一台,小叩诊锤一个,钟型听诊器一副(学生自备),色笔二支,直剪刀一把,胶布少许,生理盐水,刺激导线一副。 (三)实验步骤 (1)、循经感传的观测 填写好受试者基本情况表,全组各人轮流担任受试、观测及记录者。受试者脱去鞋袜,静卧l0分钟,标出十二井穴位置,以湿电极 (填塞生理盐水棉球)置于一条经脉的井穴,逐渐加大强度,以受试者能耐受为度,测试顺序先手后足,先左后右,测左手时将无关电极(铜片)握于右手,测右手时握于左手,测足时握于同侧的手。每测一经脉激发井穴时即按受试者感传情况依以下标准填入表中: 局部感传或感传不到腕踝关节处为(+); 感传超过腕踝关节但未过肘膝关节为(+); 感传超过肘膝关节但未过肩髋关节为(+); 感传超过肩髋关节为(+)。 最后按所记录情况依感传显著程度标准评定等级,标准参阅上课的教材。 (2)、感传基本特征观察对感传超过腕、踝关节的经脉,选取一条敏感的经,由受试者主诉感传方向、性质、宽度,并以手指用力按压经脉,观察有无阻滞现象。如无敏感的经脉可不作此项观察。 (3)、隐性感传的观测 受试者静卧,在中冲穴处固定湿电极,另手握无关电极,逐渐加强电流强度到能耐受为度。在感传未到达的心包上用小锤轻轻叩击l0个等距截面,找出各截面上针感放射点,用色笔标出,全部测完后用另一色笔标出经典穴位,并自中冲穴至曲泽穴作一连线,测量各叩击敏感点距离此线的距离,以在0.5厘米以内为(十),超过0.5厘米为(一),算出阳性点的百分率。 (4)、高叩诊音的观测 在另一只手上先用色笔标出心包经穴位点并连接成线,同样以电极刺激中冲穴引起心包经感传现象,再以钟型所诊器固定于曲泽穴上,在心包经连线上选取l0个截面(尽可能包括所有穴位点在内)。垂直叩击心包经上穴位点及两侧各l厘米处对照点,每点连续叩击2次,3点轮流交替叩击,反复进行。听诊者闭目静听何点为高叩诊音,报告给叩击者,并用色笔标出。最后统计高叩诊音点是否与心包经连线重合。重合者为(十)阳性,否则为(一)阴性。阳性为在 0.5厘米以内,超过0.5厘米为(一)。计算出阳性率。把所得结果分析讨论,并写成实验报告。实验(二) 经穴低电阻(高导电量)特性探测(一)、实验目的国内外许多研究都认为穴位具有低电阻(高导电量)的特性。本实验探测穴位导电量(或电阻)以观察穴位的电学特性。 (二)、实验器材 穴位皮肤导电量测定仪一台,G6805-1型治疗仪一台,色笔二支,酒精棉球少许,刺激导线一副。 (三)、实验步骤 (1)、受试者按经典方法用色笔点出:合谷、内关、孔最、尺泽、曲泽、足三里、阳陵泉、阴陵泉、三阴交,左右共十八个穴位。 (2)、在选出的十八个穴位上,以穴点为中心,直径1厘米的范围内为穴区。 (3)、受试者静卧5分钟,然后用G6805l型治疗仪寻找针感点,即在穴区范围内(包括边缘部分)以探测电极依次轻放在被测穴区内,依皮肤厚薄可选用不同刺激强度,找出受试者有麻胀感传等感觉点,并以最强的一点为针感点,以色笔做出标志。 (4)、在测出的针感点两侧及上下(避开经络走向)距离为主厘米处任取4点作为对照点,也做出标志。 (5)、全组每人都依上述步骤测出针感点,计算出每人的针感点与点出的穴点符合率。 (6)、用穴位皮肤导电量测定仪测定穴位皮肤导电量。受试者静卧,测定时受试者手握无关电极,测试者用测试电极放置于测点上,力度保持一致,待仪表上的指针稳定后(约2秒钟)记录下读数。每个穴位区共测6个点,其顺序为:针感点对照点(4个点)针感点。(7)、每人测试一连,将实验结果进行分析讨论,并写成实验报告。 (四)、注意事项 (1)、由于皮肤导电量(或电阻)均与皮肤干湿程度有关。所以测量前应先将皮肤擦拭干净,不能有汗液,不能潮湿,待皮肤外观恢复常态后方可测试。 (2)、测量探头每次压力要一致,电极的棉球湿润程度也应一致,每点测量时间为2秒钟。 (3)、测试者应由一人操作以便减少误差,有利于分析比较结果。 (4)、 测量结果以穴点导电量比4个对照点均高才作为高导电量 (低电阻)点,即为阳性(十),否则为阴性(一),也就是穴点导电量 (测量2次)结果数值4个对照点,方可作为阳性(十)。实验(三) 动物实验基本操作练习(一)、实验目的 了解动物实验过程中的一些基本的手术操作,手术器械及其使用方法,练习手术操作。 (二)、实验器材手术刀柄一把,手术刀片一张,直止血钳二把,弯止血钳二把,皮肤钳二把,直剪刀一把,弯剪刀一把,缝针一根,缝线少许,5ml注射器一个,4号针头一个,气管插管一支,输尿管插管一条,200ml烧杯一个,lOml烧杯一个,1.5%戊巴比妥钠,生理盐水,纱布块3块,兔台一张。 (三)、实验步骤 (1)、简要介绍常用手术器械。 (2)、先将家兔称体重,按30mg/Kg体重由耳缘静脉注入戊巴比妥钠(1.5%即为2ml/kg)进行麻醉,开始可稍快推注,余l/3量要缓慢推注,并注意观察动物的呼吸和角膜反射。 (3)、将家兔仰卧于兔台上,剪去颈部、腹部及腹股沟部的毛。 (4)、在颈前部及锁骨、气管甲状软骨间切开皮肤34厘米长,分离出气管并穿以缝线。在软骨环上以倒“T”字形切开气管,插好气管插管并结扎好。在分离时要小心,勿伤及神经和血管,遇有大出血点时,应用缝线结扎上血,小出血点可用纱布块压迫止血。 (5)、分离出两侧颈总动脉,分离时要顺血管纵向分离,切勿损伤血管及神经。分离出颈总动脉后用缝线穿之以标记。 (6)、从剑突至耻骨结节沿腹白线切开腹部,观察腹腔器官 (肝、胆、胃、肠、肾、膀胱等)。 (7)、在膀胱腹面膀胱三角区附近可见动脉血管,在其附近找出白色管状的输尿管的一段23厘米,注意勿伤血管以免出血影响插管。在巳分离好的输尿管下方穿两段结扎线,先结扎输尿管的膀胱端。 在输尿管上用眼科剪剪一小口,可见到有尿液流出。然后,插入输尿管插管的斜口端,结扎固定,注意勿仅插入输尿管鞘膜中而来真正插入输尿管中。在插管前应在输尿管插管中充满生理盐水。同时,观察一段时间有否尿液流出。(8)、切开腹股沟处皮肤,切口23厘米长,分开肌肉,在股静脉下方找出较细,颜色淡红的股动脉,分离出股动脉1.52厘米,穿双股结扎线。注意神经、动脉和静脉的位置关系。 (9)、上述实验做完后,打开胸腔观察心肺的情况,注意心脏跳动。 (10)、实验完毕后,清洗手术器械放在实验台上。 (11)、书写实验体会及分析手术过程中所发现的问题,分析其原因。实验(四) 针灸作用的时间效应关系的实验观察(一)、实验目的 足三里穴为强壮穴,现代实验证明它具有多种功能。本实验以白细胞数为指标,观察针刺家兔“足三里”穴对机体防卫免疫机能的影响以及针刺效应与时间之间的关系(针灸作用的时间效应曲线)。 (二)、实验器材 显微镜一台,G6805型治疗仪一台,血球计数板一套,20立方毫米吸管一支,试管架一个,小试管6支,兔架一个,5号针头一个,针灸针2根,腰形(或方形)盘一个,毛细吸管一支,纱布3块,棉球、擦镜纸少许,白细胞稀释液,1ml吸管一支,蒸馏水,纯乙醇,捆蝇4条,200ml烧杯一个,50ml烧杯一个。 (三)、实验步骤 (1)、用lml吸管吸取0.38ml白细胞释液于试管内(6支试管标明序号,每个试管加入0.38ml白细胞稀释液)。 (2)、在兔耳缘静脉处(从远端开始),用5号针头刺破取血。待血流出后擦去第一滴血,然后用20立方毫米吸管吸取血液至20刻度以上,略超过一点,但不要超过太多,尽快用棉球在吸管口轻轻擦拭,使血液正好在减至20刻度处。立即将血液放入盛有白细胞稀释液试管中,并小心吸取少量稀释液(在试管内)冲洗血液,小心地吸取少量稀释液(在试管内)冲洗血液,以冲下附在吸管壁上的血液,同时轻轻摇匀。吸管立即冲冼干净待下次用。 (3)、立即用毛细吸管吸取白细胞稀释液,滴入已准备好的洁净细胞计数室的横槽中,放置片刻,待白细胞下沉。 (4)、用低倍镜(目镜10,物镜10)计数细胞计数室四角的四个大方格内的白细胞。按次序数各格内的白细胞,压线者计上不计下,计左不计右。将四个大方格内的白细胞数再乘以50即得每立方毫米血液中的白细胞数。 (5)、电针“足三里”穴(双),其频率1016次/秒,电压1.5伏左右,短续波,缓慢地增加刺激强度观察兔腿部有不断轻微抽动即可,电针20分钟后退针。 (6)、针后立即如前取血计数白细胞数量,以后每隔30分钟取血一次。针前为对照,针后共取5次血,最后将结果绘成时间效应曲线,并写成实验报告。 (四)、注意事项 (1)、取血次序宜从耳尖向耳根沿血管道次向下取血。本实验共取血6次,取血时间要严格按时进行,取血也应迅速,以免血液凝固。血样试管号不得混乱。(2)、显微镜镜头及计算室光学部分,只能用擦镜纸擦拭。计算室洗涤用自来水冲洗,然后用纱布吸干水份,再用擦境纸擦拭干净。吸管、试管等洗涤用自来水冲洗,然后用蒸馏水冲洗,再用纯乙醇冲洗一次。 (3)、计算: 在稀释液0.38毫升中加入血液20立方毫米已将血液稀释20倍。在计算室内仅数0.4立方毫米(即四个大方格的容积为40.1毫米1毫米1毫米(0.4立方毫米)中的白细胞。故换算到每立方毫米时应乘以1立方毫米0.4立方毫米2.5( =2.5) 白细胞总数是指未稀释血液在每立方毫米中的数值。四个大方格得白细胞数202.5,即得四个大方格数得白细胞数量50=每立方毫米血液中白细胞数。 (4)、家兔白细胞数正常参考值:600013000/mm3 (5)、白细胞稀释液配制: 冰醋酸 1.5毫升 1%龙胆紫 几滴 蒸馏水加至100毫升(6)、兔“足三里”穴依中国医学科学院基础医学研究所文云:位于胫骨粗隆下方22.5厘米,胫骨旁开o.51厘米处。实验(五) 针刺“肾俞”穴对家兔肾脏泌尿的影响 (一)、实验目的 肾俞穴有调瞥气、强腰脊的效能,故能治水肿、消渴、遗尿、肾炎等病症,这提示肾俞穴对肾功能有调整作用。本实验是要观察家兔在水负荷情况下,针刺双侧“肾俞”穴对家兔肾脏泌尿机能的调整作用。 (二)、实验器材 输液架一个,G6805型治疗仪一台,手术器械一套,静脉点滴输液器一套,兔台一张,5毫升注射器一个,4号针头一个,针灸针2根,输尿管插管一条,烧杯(200ml一个,50ml一个),生理盐水,胶布,纱布,棉球,缝线,1.5%戊巴比妥钠。 (三)、实验步骤(1)、兔称体重,耳缘静脉戌巴比妥钠麻醉(按30mg/公斤体重,1.5%戊巴比妥钠2ml/kg),固定于兔台上,剪去下腹部的毛(耻骨联合以上的7cmx4cm),以备开腹。 (2)、在耳缘静脉进行生理盐水滴注,滴速为3040滴/分。 (3)、由耻骨向上近中线切开腹部,切口长57cm,沿腹白线切开肌肉层,注意勿损伤膀胱,切开肌肉后即可见到膀胱。 (4)、轻轻取出膀胱,在膀胱腹面膀胱三角区附近可见到动脉血管,在其附近找出白色血管状的输尿管约23cm一段,注意勿损伤血管以免影响插管。在已分离好的输尿管下方穿两股结扎线,先结扎输尿管的膀胱端。 (5)、在输尿管上用眼料剪剪一小口,可见到有尿液流出。然后插入输尿管插管的斜口端,结扎固定,注意勿仅插入输尿管鞘膜中而来真正插入输尿管中。在插管商应将输尿管插管充满生理盐水,并将家兔改成侧卧位,以便于针刺“肾俞”穴。 (6)、记录正常肾脏分泌尿滴数,待分泌稳定后,记录lo分钟尿滴数作为对照,取其平均值(即5分钟尿滴数)。 (7)、电针双侧“肾俞”大,用连续波,频率为lo16赫芝,电压l1.5伏,强度万针刺部位出现轻微抽动即可。电针20分钟,注意针刺动作宜迅速。 (8)、停止电针后即起针,观察尿滴数,记录尿滴11.54小时 (以每5分钟记录一次读数)。 (9)、计算每5分钟尿滴数,绘成曲线,分析结果并写成实验报告。 (四)、注意事项(1)、麻醉药的前1/2剂量可较快注入,待兔安静后则可缓慢地注入后1/2剂量,并注意观察兔的呼吸状态和角膜反应,发现异常立即停止注射。因为动物个体差异较大,有的动物不必全量即可达到麻醉目的。 (2)、“肾俞”穴位于兔腰椎前内角(12肋骨水平),离背中线 1.5cm的凹陷处,左右各一。 (3)、耳缘静脉滴注生理盐水,滴速要一致,以免因静滴数量差异影响实验结果。点滴数量因兔个体差异及正常泌尿量可以不同,不宜强求各组一致。实验(六) 针刺对家兔失血性休充血压的影响(一)、实验目的 针刺水沟是通常的急救手段,可以用于各种休克。本实验的目的在于通过针刺家兔“水沟”穴,观察失血性休克血压下降时,针刺的升压作用。 (二)、实验器材 G6805型治疗仪一台,水银检压计一个,气管插管一个,动脉插管一个,静脉套管一个,手术器械一套,注射器(5ml)一个、 (50m1)一个,注射针头二个,动脉夹二个,针灸针二根,兔台一张,董筒(100m1)一个,烧杯(250m1)一个、(50m1)一个,缝针,棉球,生理盐水,3.8%枸橼酸钠,1.5%戌巴比妥钠,肝素,缝线若干,持针钳一把。 (三)、实验步骤(1)、在水银枚压计中注以3.8斯枸橼酸钠,联结动脉插管,勿使管中有气泡,先将水银栓压计中的压力升高土100120mmHg,并在动脉插管注入少许肝素备用。 (2)、将兔称体重,按30mgkg体重由耳缘静脉缓慢注入戊巴比妥钠(1.5%戊巴比妥钠按2ml一公斤体重)进行麻醉。 (3)、将兔仰卧捆缚于兔台上,颈部及腹股沟部备皮剪毛。 (4)、在兔颈部锁骨及气管甲状软骨间切开皮肤34cm,分开胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌,暴露气管,分离并穿线,倒“T”字形剪开气管,插好气管插管,并结扎好,注意结扎要过气管插管的分叉处才能结扎牢固。 (5)、分离出一侧颈总动,长约23cm,穿入双股缝线结扎,用动脉夹住动脉的近心端,并结扎其远心端,用眼料剪在动脉上剪开一小口,用注射器注入少许肝素,插入动脉插管,结扎固定。接通水银检压计,观察正常血压。 (6)、切开腹股沟处皮肤,切口23cm,分开肌肉,在股静脉下方找出较细、颜色淡红的股动脉,分离出殷股动脉23cm,穿双股结扎线,结扎其远心端,用动脉夹夹住其近心端,在其上用眼科剪剪一小口,注入少许肝素。插入静脉套管,结扎固定,以备放血。 (7)、为防止实验过程中凝血,可在耳缘静脉中注入肝素,每公斤体重300单位。 (8)、记录正常血压为对照(兔正常值血压通常在土1OOmmHg左右)。 9)、待血压稳定后,迅速于股动脉处放血,使血压下降至 50mmHg左右,立即停止放血,大致放血量为体重的2左右,并要量出其放血量。(10)、电针“水沟”及“素髎”穴(鼻尖部位),观察血压的变化,一般可持续针刺1520分钟,每5分钟(或3分钟)记录一次血压。 (11)、停针后可观察1520分钟血压的变化情况。 (12)、整理实验记录,写成实验报告。 (四)、注意事项 (1)、注射麻醉药时,前1/2剂量可较快注入,待动斡较安静后,后1/2剂量应缓慢注入。同耐注意兔的呼吸情况和角膜反应,出现异常情况,立即停止注射。 (2)、在分离颈总动脉时,小心勿损伤其附近的神经(迷走、交感及减压神经),勿损伤通向甲状腺的血管。 (3)、注意动脉插管与颈动脉的位置,勿使扭转,影响血压测 (4)、气候较冷时,要用手术灯照射动物以保温。(5)、电针强度及针刺时间依各组情况不同,可以各异。实验(七) 针刺“足三里”穴对家兔血管运动机能的影响(一)、实验目的 针刺对血管的舒缩活动,均有一定的调整作用。本实验以血管容积变化为指标,观察针刺“足三里”穴对家兔外周血管运动机能的影响。 (二)、实验器械血流圈仪(或生理记录仪)一台,光敏电阻一个,换能器一个,针灸针二根,兔台一张,记录纸,1.5%戊巴比妥钠,酒精,生理盐水,棉球,纱布,胶布,注射器(5ml)一个,4号针头一个,弯剪一把,250ml烧杯一个。 (三)、实验步骤 (1)、调试好血流圈仪正常工作状态(生理记录仪调好频率100赫芝)时间常数2秒,纸速50毫米/分)。 (2)、兔称重量,按30mg/kg体重由耳缘静脉注入(1.5%戊巴比妥钠按2ml/kg)进行麻醉。 (3)、将已麻醉的兔仰卧于兔台上,并捆缚四肢,剪去一后肢膝关节下2cm处的毛,以备放置光敏电阻(或安放测试装置)。 (4)、于剪毛后肢处放置光敏电阻,并固定好,接好所有线路,开始记录5分钟的正常血管容积脉搏波。 (5)、针刺“足三里”穴,行针5分钟,并记录血管容积脉搏波。同时观察其波幅的变化。 (6)、出针后再记录5分钟血管容积脉搏波。 (7)、将实验结果分析讨论,并写成实验报告。 (四)、注意事项 (1)、麻醉时前1/2剂量可较快地注入,待动物安静后,后1/2剂量庄缓慢地注入,并观察家兔的呼吸情况和角膜反应,发现异常情况时应停止注射。 (2)、兔“足三里”穴在胫骨粗隆下22.5cm,胫骨旁开0.51cm处。 实验(八) 针刺对“瘀血“家兔球结膜微循环的影响(示教) (一)、实验耳的 针朝具有疏通短路,促进气血运行、活血化瘀的作用。大量临床资料表明,针刺能够治疗痹血性病证。本实验以“瘀血”家兔球结膜微循环变化为指标,观察针刺对微循环的影响。 (二)、实验器械 微循环显微镜一台,兔台及兔头夹各一套,2ml及20ml注射器各一个,4号及7号针头各二个,针灸针二根,G6805型治疗仪一台,鳄鱼夹联线十付,开眼睑器二个,5高分子右旋糖酐(HHWD分子量20万),生理盐水,家兔两只。 (三)、实验步骤 (1)兔称重后固定于兔台上,右侧卧位,用开眼睑器暴露左眼,以2ml注射器抽取少量生理盐水,滴于兔眼以保护眼球。 (2)、先用80倍星微镜观察球结膜上兔眼血管分布及血流状态,然后用140倍镜下仔细观察记录微血管的流态(主要为毛细血管和微静脉,也可用血流测速仪测血液流速。 (3)、兔耳缘静脉注射5%高分子右旋糖酐5ml,然后再隔5分钟观察一次流态(或流速)及红细胞聚集的出现。大约1020分钟开始出现“瘀血”。 (4)、“瘀血”模型成功后,电针“素髎”穴,频率10赫芝,电压1.52伏,连续波,强度以局部轻微抽动为度。留针1015分钟,正极置于“素髎”穴,无关电极置于立臀部任何部位。对照兔除不电钎外,其它同实验兔。 (5)、起针后立即观察流态(速度)和红细胞豪集的变化,以后每隔15分钟观察记录实验兔和对照兔各一次。 (6)、整理实验结果,分析讨论(或写出实验报告)。 附注: (一)、“瘀血”模型成功的标准 (1)、静脉呈粒线流、粒流或粒缓流(正常为粒流或粒线漉);毛细血管呈粒缓流或粒摆流甚至停滞(正常为粒流或粒线流)。也可用血流测速仪测速。 (2)、微血管中出现明显的红细胞聚集甚至可见到血流中的虹细胞团块(正常血流中无红细胞聚集现象)。模型成功即为“+”。 (二)、半定量流态分类 活体观察时,可以半定量的流速分为七神情况: (1)、线流:血流快呈光滑的索条状,毫无颗粒感,形如塑料带。 (2)、线粒流:血流快呈光滑的索条状,稍有颗粒感,形如绸带。 (3)、粒线流:血流较慢,连续成线,有明显颗粒感,影如布带。 (4)、粒流;血流较慢,轴流、缘流混杂,如泥沙流,形如麻带。 (5)、粒缓流:血流呈泥沙状、连续缓慢流动。 (6)、粒摆流:血流呈泥沙状,前后摆动,似能向前流动。 (7)、停滞:血流停滞不动。 (三)、疗效评定标准 (1)、有效:针刺90分钟(对照兔注射“高右”后20以内)。血流明显加快(用血流测速仪)血液流态上升一个流态以上;血细胞聚集明显减少“+”或消失“”。(模型成功即为“+”)。 (2)、无效:针刺后90分钟(对照兔注射“高右”后的120以内),流速无明显加快,血液流态无改善或加快,血细胞聚集无明显减少或转为加重。实验(九) 针刺“足三里”穴对家兔巨噬细胞吞噬机能的影响(一)、实验目的 针刺某些穴位能治疗炎症性疾病,表明针刺具有抗炎作用。巨噬细胞吞噬功能是抗炎免疫的重要机制。本实验通过静脉注入一定量的刚果红,根据血浆中刚果红含量的变化(比色),来观察针刺对巨噬细胞吞噬作用的影响。 (二)、实验器材 722型分光光度计一台,C06805型治疗仪一台,试管架一个,试管12只(含对照组),移液管l0ml一支,动脉夹一个,注射器(5ml、lml)各一个,5号注射针头二个,离心机一台,兔固定架(含对照组)二个,2%刚果红,3.8%拘橼酸钠,2公斤左右健康家兔二只。 (三)、实验步骤(1)、兔称重后固定于兔架上,耳廓剪去毛以备采血,用手术灯照射耳部,使血管扩张便于取血。洗净试管并标号以免差错,在每个试管中放入3.8%的构橼酸钠lml(若低于光度计测试时可加入2m1),注射器用3.8%构橼酸钠冲洗防止凝血。 (2)、用动脉夹夹住取血静脉的近心端,然后用注射针头刺破静脉血管远心端,使血液自然流出,立即用1ml注射器缓缓吸入血液 0.2ml,注意勿使气泡过多影响血董准确性,把采到的血液迅速注入 1号试管,摇匀,准备离心,洗净注射器,并以3.8%构橼酸钠冲洗以备再次采血用。 (3)、血样离心5分钟,转速2000/分,取出上清液,用分光光度计测定其透光率(或光密度),并以此血样进光牟为100%标定分光光度计;作为针前空白对照。 (4)、耳蟓静脉注射2%刚果红溶液,按每公斤体重注射lml,注射5分钟后依上法取0.2ml血液注入2号试管中,摇匀 并离心,测上清液的透光率(或光密度)。 (5)电针双侧“足三里”穴15分钟,电压1.52伏。频率16赫芝,强度以下肢微微抽动为度。 (6)

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