高血压机能设计.doc

七年制学生机能实验设计项目申 请 书项 目 名 称：氢氯噻嗪和卡托普利治疗高血压时对血钾的影响 指导教师：王冬梅年级、班级：七年制2010级3班学生姓名：杜娟 马宁 刘荣俊 刘梦雪联 系 电 话：大连医科大学 基础医学院机能实验室2012年10月一.立题依据及意义：1.高血压（ hypertension）为常见、多发心脑血管疾病，是冠心病及脑卒中的重要危险因素，为全球范围内的重大公共卫生问题。近年来，我国高血压的发病率逐年上升，普查资料显示我国的高血压患者已超过一亿，据统计， 15 岁以上人群高血压平均发病率为 11%。以高血压为原发病的各种心脑血管疾病已成为人类死因之首。因此，对高血压病的研究成为心血管研究领域中的热点问题。为更好地研究人类高血压的发病机制及治疗方法，动物实验是其研究的重要手段。这一领域的发展十分迅速，人们试图制作犬、大鼠、兔等多种高血压动物模型。通常采用的复制高血压模型的方法有暴露于 5 的环境中三周，予以足够浓度（ 4%NaC1） 高盐及足量时间（ 8 周以上），一肾一夹法，双肾双夹法等，本实验采用的是两肾一夹加压法，这样结扎更有经济有效，2.卡托普利为血管紧张素转换酶抑制剂，氢氯噻嗪为利尿降压药，二者价格便宜，服用方便，降压疗效确切卡托普利与氢氯噻嗪联合应用对降低血压有协同作用，在降压效果上比单独用药者好，且不易引起血钾异常，安全，价格低廉，值得临床推广。但单药治疗疗效差，且容易引起血钾异常。本实验采用卡托普利联合氢氯噻嗪与单用氢氯噻嗪、卡托普利作对比，观察降压疗效及对血钾的影响。3.本实验的创新性在于把血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利和利尿剂氢氯噻嗪联合用药治疗高血压，并监测两种药物对血钾浓度的影响。二技术路线1. 动物：健康成年家兔5只。2. 仪器设备，手术器械：银针,手术器械一套，离心机，原子吸收分光光度计，家兔血压测量仪（光敏电阻数字式电子压力显示器）。3. 试剂：氨基甲酸乙酯溶液，氢氯噻嗪片剂，卡托普利片剂，肝素生理盐水，75%乙酸溶液。4. 试验方法：（1） 兔高血压模型建立：取健康成年家兔5只，分别编号为1,2,3,4,5.用氨基甲酸乙酯（4ml/kg）分别麻醉，固定。在脊柱旁用止血钳钝性分离肌肉，暴露左侧肾脏，打开肾蒂，小心分离出肾动脉。对2,3,4,5号家兔在靠近腹主动脉处，用针灸银针紧贴左肾动脉，用手术线将二者一起捆扎，抽出银针，制成左肾动脉血流部分被阻断，1号兔做假手术，不进行肾动脉部分阻断手术；缝合伤口，在相同适宜条件下饲养两周待其恢复。(2)动物给药及检测指标恢复后第一天，用兔血压测量仪（用法见附表），测5只家兔的血压，耳中动脉采血0.5ml到4.5ml肝素生理盐水中稀释，至离心机离心，取上清液，用原子吸光分光光度计（用法见附表）测血钾浓度。用含氢氯噻嗪的饲料喂养3号家兔（每天食药1.5mg）；用含卡托普利的饲料喂养4号家兔（每天食药0.6mg）；用既含氢氯噻嗪（含量1mg）又含卡托普利(含量0.3mg)的饲料喂养5号家兔；1号和2号家兔用正常饲料喂养，于第2天，第4天，第6天，第8天，第10天分别测5只家兔的血压和血钾浓度。三进度安排1. 复制家兔高血压模型15天。2. 给药并进行指标检测10天。四预期结果时间 组号 平均血压（mmHg） 血钾（mmol/L）1 1 90 3.5 2 110 3.8 3 121 3.8 4 115 3.7 5 124 3.82 1 89 3.8 2 121 3.7 3 110 3.7 4 107 3.8 5 100 3.64 1 91 3.6 2 118 3.8 3 100 3.6 4 96 3.9 5 95 3.76 1 90 3.7 2 117 3.1 3 90 3.4 4 90 4.0 5 90 3.88 1 89 3.6 2 115 4.0 3 88 3.2 4 91 5.0 5 88 4.010 1 88 3.7 2 120 3.9 3 89 3.0 4 88 5.6 5 89 4.2附表：1. 兔血压测量仪的使用方法:如下图,测压时,将兔耳于上活动夹板与弹力膜之间,使耳中动脉通过指针,打开指示灯,通过透明的上活动夹板,可以看到耳中动脉的血流,经压力气球向气压腔内打气,使弹力膜向上活动夹板隆,压迫耳中动脉至血流阴断,然后缓慢放气,使气压腔内压力慢慢下降,当被阻断的血流再通时的压力计指数即为兔收缩压。 2 3 2. 原子吸光分光光度计的使用方法：【试剂】钾钠标准液：K+ 4mmol/L； Na+ 140mmol/L。【测定操作步骤】（ 6400-A K-Na浓度火焰光度计使用说明）开机测定程序按下地面插座上红色开关，马达自行开动。向上扳动仪器面板上的电源开关，见指示灯亮。持续按住红色点火按扭同时逆时针缓慢转动燃气开关，观察窗内电热丝变亮，出现由小火，逐渐变成大火。放开点火按扭，进样开关逆时针转至开的位置，观察窗内见兰色火焰。调节燃气开关，使观察窗内火焰呈绿色轮廓清晰的梅花圈状。用去离子水将仪表表头指针调至零点。标准K、Na溶液以100倍稀释后，将钠离子仪表表头指针调至70，将钾离子仪表表头指针调至40。再用去离子水将仪表表头指针调至零点。样品血清用去离子水100倍稀释，进样后读数。根据以下公式换算，可得到血清钾浓度：血清钾浓度 = 血清读数标准液读数标准液钾浓度读数与钾浓度的关系如下：40 4mmol/L30 3mmol/L20 2mmol/L若样品读数大于50，则将血清对信稀释，进样后读数与钾浓度的关系如下：40 8mmol/L30 6mmol/L20 4mmol/L关机程序关闭仪器面板上的电源开关。关闭马达开关。等待观察窗内火焰熄灭后，将燃气开关顺时针关闭到底。将进样开关顺时针转动到底。使用完毕，做好仪器周围的清洁整理工作，并做好仪器使用登记。五.参考文献1.Grant p T et al:A device for estimating blood pressure in the rabbit: J physiol,1934,81:265.2.Wilson D M et al:Indirect blood pressure measurents in the rabbit:Corrlation with direct aortic and ear pressure J.lab clin M Ded 1975,86:1032.3. 马铼枫，刘梅颜，董露霖，等.依那普利及吲达帕胺对2型糖尿病伴高血压者血糖血钾影响.中国医药导刊，2007，9(6)：495-496. 4.马虹，黄洁夫.临床医生用药大全.广东科技出版社，2000：683-685. 5. Ambrosioni E，Safar M，Degaute JP，et al.Low-dose antihypertensive therapy with 1.5 mg sustained-release indapamide：results of randomized double-blind controlled studie