糖原PAS染色液使用说明.pdf

糖 原糖 原 PASPAS 染 色染 色液 使用 说明液 使用 说明 产 品简 介产 品简 介 糖原染色 是病理学中常 规的染色方法 之一 McManus在1946年最先使 用高碘 酸 雪夫技 术显示黏蛋白 该法常 用来显示糖原 和其他多糖 该染色 液 不 仅 能 够 显示 糖 原 还 能 显 示 中 性黏 液 性 物 质 和 某 些 酸性 物 质 以 及 软 骨 垂体 霉 菌 真菌 色 素 淀粉样物 质 基底膜等 过碘酸 又称高碘 酸 是一种强 氧化剂 它能氧化 糖类及有关物 质中的1 2 乙二 醇基 使之 变为二 醛 醛与Schiff试剂 能结 合成一 种品红 化合 物 产 生 紫 红 色 由 于 高 碘 酸 还 可 氧 化细 胞 内 其 他 物 质 使用 时 应 注 意 选 择 好 高 碘 酸 浓 度 和氧 化 时 间 使 氧 化 控 制在 即 能 把 乙 二 醇 基 氧化 成 醛 基 又 不 至 于 过氧化 这是很关键的 步骤 本 糖 原PAS染 色 液 的 特 点 采 用Solarbio特 有 配 方 技 术 大 大 增 强 了染色效 果 性能稳定 特异性强 操作简捷 仅 需1h左右 产品组成 名称 编码 4 50ml4 100mlStorage 试剂 A 过碘酸 溶液 50ml100ml4 避光 试剂 B Schiff Reagent 50ml100ml4 避光 试剂 C 苏木素 染色液 50ml100mlRT避光 试剂 D 酸性乙 醇分化液 50ml100mlRT 使用说明 书1 份 自自备 材料备 材料 1 10 福尔马林 固定液 2 蒸馏水 3 乙醇 操 作步 骤操 作步 骤 仅 供参 考仅 供参 考 1 常规固 定 常采用10 的福尔马 林 常规脱水 包埋 2 石蜡切 片脱蜡入蒸馏 水 冰冻切片 直接入蒸馏水 3 自来水 冲洗2 3min 再用蒸 馏水浸洗2 次 4 置于过 碘酸溶液中 室温放置5 8min 一般不 宜超过10min 5 自来水 冲洗1 次 再用 蒸馏水浸洗2 次 6 样本放 入Schiff Reagent 置于室 温阴暗处 浸 染10 20min 7 自来水 冲洗10min 8 样本置 于苏木素染色 液中 染细胞 核1 2min 9 酸性乙 醇分化液分化2 5s 10 自来水 冲洗10 15min后 更换 双蒸水清洗 使其返蓝 11 逐级常 规乙醇脱水 二甲苯透 明 中性树胶 封固 染 色染 色结 果结 果 PAS反应阳性 物质红色或紫 红色 细胞核蓝色 细胞质深浅不一 的红色 备注 颜色深 浅很大程度上 取决于样品 在过碘酸溶液 和Schiff Reagent 中作用时 间的长短 阴 性对 照阴 性对 照 可 选可 选 1 对 照切 片可以 用唾 液 取 唾液 片 过 滤后 用 处 理30 60min后 与其他切 片共同入过碘 酸溶液 结果应为 阴性 2 对照片 可以淀粉酶 取淀粉酶1g于双蒸水 或PBS pH5 3 100ml 处理30 60min后 与其 他切片共同入 过碘酸溶液 结果应为阴性 3 如果对照 片采用其自身 样本 对照片不 经过碘酸溶液 这一步 直接入 Schiff Reagent 染色结 果 对照片呈 阴性反应 无 紫红色颗粒 注 意事 项注 意事 项 1 切片脱蜡 应尽量干净 否则影响染色 效果 2 过碘酸氧 化时间不宜过 久 氧化时的 温度以18 22 最佳 3 过碘酸溶 液和Schiff Reagent应置于4 密闭保存 使用时避免 接触过 多的阳光和 空气 使用前 最好提 前30min取出恢 复到在室温 后 避 光暗处使 用 4 酸 性乙 醇 分化 液 应经 常 更换 新液 其分 化 时间 应 该依 据 切片 厚 薄 组 织 的 类 别和 酸 性 乙 醇 分 化 液 的 新旧 而 定 另 外 分 化 后自 来 水 冲 洗 时 间 应 该 足够 5 在过碘酸 溶液和Schiff Reagent中作用时 间非常重要 该依据切 片厚薄 组织的类别等 决定 6 本 染色 液 常用 于 常规 组 织切 片染 色 对 于 真菌 细胞 极其 薄 的切 片 建 议 采 购 糖 原PAS染 色 试 剂 盒 细 胞 真 菌 专