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文档简介

方法一:1. 化疗药物结合当前实际及常用化疗方案从中选用五种化疗药,四种一线药物长春瑞滨(NVP)、依托泊苷(VP - 16)、长春新碱(VCR)、吉西他滨(GEM)以及一种二线药物多西他赛(TAX)。试验药物浓度即峰浓度(ugmL)=(mg平均体表面/平均体重)(10060),其中mg为临床用药剂量(mgkg-1d-1),国内大多数教科书介绍体表面积的计算公式是:SA=0.035W +0.1(W30)1.05+(W-30)0.02(W 30)SA为人体表面积(m2 );W为体重(kg);按照平均体重60 kg计算,平均体表面积为1.65。化疗药物配制浓度及产地,见表1。2实验方法种96孔板,分设加药孑L,阴性对照孔,空白孔,设3复孔。加药孔与阴性对照孔,每孔100 uL细胞悬液,空白孔每孔100 ul完全1640,最后每孔补加100 ul完全1640,每孔终体积为200 ul。在培养箱培养24 h。加化疗药,加药孔加20 ul化疗药,阴性对照孔加20 ul完全1640,空白孔加20 ul完全1640。将96孔培养板密封后继续放人培养箱中培养,观察48 h。每孔加人5mgmL的MTT 20ul,继续培养4 h。吸去上清后,每孔加入二甲基亚砜150ul ,混匀,振荡培养板10 min,使孔中沉淀完全溶解。在酶联免疫检测仪上,以空白孔较0,以490 nm为测量波长,690 nm为参考波长,测每孔吸光度值(A值)。计算活性抑制率:活性抑制率= (阴性对照组A值-加药组A值)阴性对照组A值100。当加药组血浆高峰浓度水平时的抑制率大于50时,即为高敏,小于30为耐药,介于两者之间为中敏。二、方法二1. 化疗药物:选用目前常用的化疗药物9 种,用生理盐水配制(表1) 。配好的实验

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