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文档简介
溶菌酶 溶菌酶 溶菌酶 lysozyme 又称胞壁质酶 muramidase 由129个氨基酸组成的一种无毒 无副作用 又具有一定的溶菌作用碱性球蛋白 可溶于水和酸性溶液 而且耐热 pH4 7的范围内 在100 处理1min仍有近100 的活力 但在碱性环境条件下 酶稳定性较差 耐干燥 在室温下可长期存放 性质稳定 溶菌酶存在于人体的各个组织中 如心 脏 脾 肺和肾等 其中以肾和肺中含量最高 鸟类和家禽的蛋清 哺乳动物的泪 唾液 血浆 尿 乳汁等体液以及微生物中也含此酶 其中以蛋清含量最为丰富 植物中有溶菌酶 目前已从木瓜 无花果 芜菁 大麦等植物中分离出溶菌酶 其分子量较大 约为24000 29100 溶菌酶的应用 医药方面溶菌酶作为一种存在于人体正常体液及组织中的非特异性免疫因素 具有多种药理作用 它具有抗菌 抗病毒 抗肿瘤等功效 目前日本已生产出医用溶菌酶 其适应症为出血 血尿 血痰和鼻炎等 食品和发酵工业 溶菌酶是一种无毒 无副作用的蛋白质 又具有一定的溶菌作用 因此可用作食品防腐剂 现已广泛应用于水产品 肉食品 蛋糕 清酒 料酒及饮料中的防腐 还可以添入乳粉中 使牛乳人乳化 以抑制肠道中腐败微生物的生存 同时直接或间接地促进肠道中双歧杆菌的增殖 此外 还能利用溶菌酶生产酵母浸膏和核酸类调味料等 细胞工程 溶菌酶具有破坏细菌细胞壁结构的功能 以此酶处理细菌可得到原生质体 因此 溶菌酶是基因工程 细胞工程中细胞融合操作必不可少的工具酶 鸡蛋清中提取溶茵酶 材料原料 鸡蛋 NaOH NaCl 丙酮仪器与设备 搅拌器 200 300r min 离心机 4000r min 抽滤机 工艺流程 原料 清洗 去蛋壳 分离蛋清 搅拌 过滤 加盐 调节pH值 结晶 干燥 成品 包装 实验步骤 选择新鲜鸡蛋 蛋清的pH值不能低于8 0 否则不能用 清洗 用水洗掉蛋壳表面的不洁之物 将鸡蛋的两端各敲一个小洞 使蛋清流出 用搅拌机搅拌 将蛋清搅拌稠度均匀即可 以不引起泡沫为宜 防止由于起泡引起蛋白质的泡沫变性 而影响溶菌酶活性及产率 过滤 用双层纱布将稠度均匀的蛋清过滤 滤除蛋清溶液中的脐带块及蛋壳等 加盐 按50 1的比例 NaCl 蛋清液 向蛋清液中加入NaCl细粉 边搅拌边加入促使NaCl细粉及时溶解 以避免NaCl沉于容器底部 而因局部浓度过高而产生大量的白色沉淀 结晶 用1mod l的NaOH溶液调节PH为9 5 10 0 边搅拌边加 避免过碱引起蛋白质变性 于4 条件下静置过夜 至结晶析出 结晶过滤或分离 用滤纸或尼龙布过滤 或用离心机离心10min 得到溶菌酶结晶 结晶洗涤 用丙酮将溶菌酶结晶洗涤数次 一般3次即可 干燥 将溶菌酶结晶在常温或 50 60 条件下干燥制成成品
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