禽沙门氏菌的分离和鉴定.pdf

试 验 研 究 禽 门 氏 菌 的 分 离 和 鉴 定 王利 明 刘宏艳 2 1 辽宁省农业经济学校 锦州 1 2 1 0 0 1 2 辽宁省朝阳市喀左县兴隆庄乡动物防疫监督所 朝阳 1 2 2 3 0 8 禽沙门氏菌病是由沙门氏菌属中的某一种或多种沙门 氏菌引起的禽类急性或慢性疾病的总称 沙门氏菌是肠杆菌 科中一大属 有 2 0 0 0多个血清型 广泛存在于人和各种动物 的肠道内 在 自然界中 家禽是其最主要的贮存宿主 沙门氏 菌依病原体抗原结构的不同分为鸡白痢沙门氏菌 鸡伤寒沙 门氏菌和其他有鞭毛能运动的沙门氏菌 鸡白痢沙门氏菌 鸡伤寒沙门氏菌主要引起鸡和火鸡发病 其他有鞭毛能运动 的沙门氏菌广泛感染各种动物和人 它不但会对畜牧业生产 造成严重的经济损失 而且会严重威胁人类的健康 进行禽 沙门氏菌的分离和鉴定不但能为禽沙门氏菌病的防治奠定 基础 而且也为沙门氏菌耐药性的监测和沙门氏菌的耐药性 机制的研 究打下基础 1 材料 1 1 痛料被检的病料来 自辽宁省的锦州 阜新 盘锦和 葫芦岛等地区2 9个鸡场正在发生沙门氏菌病的鸡群 1 2 培养基麦康凯培养基 营养琼脂培养基 L B 液体培养 基本实验室自作 煌绿培养基 购 自中国兽药监察所 1 3 冻存液L B液体培养基 2 0 mL 甘油 8 0 mL 高压灭菌备用 1 4 鉴定沙门氏茵所用试剂 肠杆菌科细菌生化编码微量 鉴定管 购 自杭州天和微生物试剂有限公司 沙 门氏菌属诊 断血清 购自兰州生物制品研究所 2 方法 2 1 沙门氏茵的分离 取待检病料分别无菌接种麦康凯平 板 煌绿平板和营养琼脂平板 3 7 C 培养 l 8 2 4 h 在麦康凯 平板上生长出无色 透明菌落 在煌绿平板上生长出红色 透 明菌落 在营养琼脂上生长出无色 透明 水滴样菌落 初步 判断为沙门氏菌 将可疑沙门氏菌单菌落在 L B平板中进行连续三代纯培 养后 取单菌落接种到 3 m L L B液体培养基中 3 7 培养 1 8 2 0 h培养 无菌条件下取 0 9 m L冻存液 然后加入等量 菌液 放人 一 8 O 冰箱备用 2 2 沙门氏菌的鉴定 1 生化鉴定取 一 8 0 冰箱中保存的沙门氏菌接种到 L B平板中 3 7 培养 1 8 2 0 h 取少量菌落分别无菌接种到 硫化氢 苯丙氨酸 赖氨酸 鸟氨酸 靛基质 甲基红 枸橼酸 盐 尿素 葡萄糖 棉子糖 侧金盏花醇 木胶糖中 3 7 培养 2 4 7 2 h 2 血清学鉴定在载玻片上加少量沙门氏菌属诊断血 清 将沙门氏菌加到少量生理盐水 中制成浓菌液 然后取少 量滴到血清 中 2 m i n内观察结果 毒 目圜番蟊圜 3 结 果 3 1 细菌形态学观察结果分离菌株均能在麦康凯平板上 生长出无色 透明菌落 在煌绿平板上生长出红色 透明菌 落 在营养琼脂上生长出无色 透明 水滴样菌落 3 2 生化试验结果分离菌株能分解葡萄糖 木胶糖 产酸 产气 不利用侧金盏花醇 棉子糖 不产生 甲基葡萄糖 苷 能利用枸橼酸盐 鸟氨酸和赖氨酸脱羧酶阳性 对苯丙氨 酸不脱羧 不分解尿素 甲基红试验 阳性 硫化氢试验产生 H 2 s 吲哚 靛基 质 试验 阳性 3 3 血清学试验结果分离菌株鉴定为四种沙门氏菌 分别 为肠炎沙门氏菌 s e n t e r i t i d i s 纽波特沙门氏菌 s n e w p o r t 鼠伤寒沙门氏菌 s t y p h i m u r i u m 和鸡 白痢沙门氏菌 s p u l l o r u m 各种菌株数及所占百分比见表 1 表 1 禽源沙门氏菌鉴定结果 血清型 菌株数 百分比 肠炎沙 门氏菌 纽波特沙门氏菌 鼠伤寒沙 f q氏菌 鸡自痢沙 门氏菌 5 1 7 2 4 1 3 4 5 2 6 9 0 21 7 2 41 4 小结与讨论 对 2 9株禽沙门氏菌进行了鉴定 经生化试验和血清学 试验共鉴定出肠炎沙 门氏菌 s e n t e r i t i d i s 5株 纽波特沙门 氏菌 s n e w p o r t 1 株 鼠伤寒沙门氏菌 s t y p h i m u r i u m 2株和 鸡白痢沙门氏菌 s p u l l o r u m 2 1 株 结果说明鸡自痢沙门氏 菌是危害养鸡业的主要病源菌 其中8株 2 7 5 9 是人畜共 患的非伤寒沙门氏菌 沙门氏菌是一种常见的人畜共患病原菌 不仅能导致鸡 白痢 禽伤寒和禽类副伤寒等疾病 而且是人类伤寒 副伤 寒 败血症 胃肠炎等疾病的病原菌 目前 受其污染的家禽 及相关产品已成为人类沙门氏菌感染和食物中毒的主要来 源之一 因而进行沙 门氏菌 的分离和鉴定在公共卫生方 面也 有重要的