尿液检测标准操作规程PPT课件.pptx

尿液检测标准操作规程 1 尿液常规检测 尿液分析仪标准操作显微镜复检标准其他项目检测 尿本 周氏蛋白定性尿乳糜定性检测尿绒毛膜促性腺激素 hCG 2 尿液常规检测项目 化学检查pH亚硝酸盐葡萄糖蛋白质隐血比重胆红素尿胆原酮体白细胞维生素C 显微镜检查WBC白细胞 0 5 hpf RBC红细胞 0 3 hpf 鳞状上皮细胞圆形上皮细胞细菌霉菌毛滴虫管型结晶 3 准备事项 禁食 特种饮食禁食大剂量青霉素 洗必泰 VitC 链霉素等药物 控制饮食饮水病人的准备事项控制饮食饮水 限制体育锻炼等样品采集特殊要求1 应留取新鲜尿 以清晨第一次尿为宜 急诊可随时留取 2 标本应避免经血 白带 精液 粪便等污染3 标本留取后应及时送检 以免细菌繁殖 细胞溶解等 4 容器上应贴上检验条形码 3 2样品类型及处理方法样品量最佳量 10ml最少量 5ml收集容器清洁的或无菌密闭容器 一次性容器为好 运输要求室温 冷藏稳定性及储藏要求室温2小时冷藏温度 2 8 C 6小时 20 C禁用 70 C禁用时间要求室温2小时内或冷藏温度 2 8 6小时内检测样品拒收及采取措施1 由药物或大量血块引起的深颜色尿液 因为颜色的干扰无法进行检测 2 体积小于5ml样品的显微镜下尿液分析 因为样本体积太少未达到检测要求的最小体积 3 室温保存超过2小时的样本或冷藏温度 2 8 保存超过6小时的样本 4 pH值 通过pH指示剂法测定4 0 8 5的范围内尿液的pH值 亚硝酸盐 反应依赖于尿液中革兰阴性细菌把硝酸盐还原成亚硝酸盐 亚硝酸盐与对氨基苯砷酸反应生成重氮化合物 重氮化合物再与萘基乙二胺二盐酸结合呈现出桃红色 葡萄糖 根据葡萄糖氧化酶法原理 葡萄糖氧化酶特异性氧化 D 葡萄糖 生成葡萄糖醛酸和过氧化氢 过氧化氢在过氧化物酶的作用下 使指示剂氧化而呈现出蓝色 蛋白质 根据指示剂蛋白质误差法原理 蛋白质与染料结合形成复合物产生色变 特别是对白蛋白的反应比对球蛋白 血红蛋白 本 周氏蛋白和粘蛋白更为敏感 隐血 根据血红蛋白接触活性法原理 通过血红蛋白的类过氧化物酶样作用催化分解过氧化物 使邻联甲苯胺氧化呈色 比重 根据多聚电解质方法 尿中电解质与聚电解质发生离子交换的原理 阳离子存在时 多聚物氢离子通过交换释出 使溴百里酚蓝指示剂发生颜色变化 颜色由蓝经过蓝绿最后变成黄色 胆红素 根据偶氮偶合法的原理 2 4 二氯苯胺重盐与胆红素进行特异性反应 并与胆红素的浓度相对应产生不同的颜色 尿胆原 根据偶氮结合法原理 尿胆原在强酸条件下和重氮盐偶联形成胭脂红色素 对此特别敏感 白细胞 粒细胞胞浆内含有酯酶 可水解催化3 羟基吡咯类底物 释放出酚与重氮试剂作用产生紫红色化合物 SYSMEXUS 2100尿液分析仪原理 5 开机 开机之前检查电源和外接线连接是否正确接好 打开机后开关 仪器运行自检 自检通过后可以进行下一步操作 在每一次检测开始时检测质控品 应将其视为常规尿液样品进行检测 在仪器操作界面序号处键入500作为阴性质控编号 按回车键保存 准备好试纸条 将试纸条浸入尿液并保证试纸条上所有的检测垫都被浸湿 将试纸条从尿液中取出放置于吸水纸上吸取多余的尿液 将试纸条放在进样槽内 检测垫面朝上 仪器可以自动载入试纸条进行检测 结果可以自动打印 在仪器操作界面序号处键入501作为阳性质控编号 按回车键保存移走使用过的试纸条将其扔掉 在每天工作结束后用酒精棉签擦拭进样槽 确保仪器清洁后关闭电源 SYSMEXUS 2100尿液分析仪标准操作规程 6 尿液常规显微镜复查 镜检方法 尿沉渣离心定量镜检 9 3尿沉渣检查操作步骤9 3 1取尿沉渣专用刻度离心管 倒入混匀后的新鲜尿液10ml 采用水平式离心机 以相对离心力 RCF 400g速度 普通离心机1500rpm min 离心5min 离心时 离心机转速与相对离心力的换算公式 g 11 18 rpm 1000 2 R或rpm 1000 400 11 18 R 1 2 注 rpm 每分钟转数 R 半径 指从离心机轴中央到离心管底部的距离 单位为厘米 g 相对离心力 9 3 2待离心机停止后 轻轻取出离心管 防止沉淀物重新浮起 9 3 3手持离心管 倾斜45 160 弃除上层清液 或用吸管吸取并弃除9 8ml上清液 留下0 2ml沉渣 轻摇离心管 使尿沉渣中的有形成分混合均匀 9 3 4用一次性吸管吸取混合均匀的尿沉渣 滴在干净玻片上 7 8 9 10 11 操作步骤1先将尿液用磺基水杨酸法作蛋白定性检查 如阴性反应 则可认为尿液标本中本 周氏蛋白阴性 2取透明尿液4ml于试管中 再加入醋酸盐缓冲液1ml 混匀后 放置560C水浴中15min 如有浑浊或出现沉淀 再将试管放入沸水中 煮沸3min 观察试管中浑浊或沉淀的变化 如浑浊变清 浑浊减弱或沉淀减少 均提示本 周氏蛋白阳性 若煮沸后 浑浊增加或沉淀增多 表明此尿液中还有其他蛋白质 此时应将试管从沸水中取出 立即过滤 如滤液开始透明 温度下降后浑浊 再煮沸时又透明 提示本 周氏蛋白阳性 结果判断1浑浊为阳性 2结果在 临检检验项目结果记录表 LIS版 登记 再输入LIS 临床意义一般认为当浆细胞恶性增殖时 可能有过多的免疫球蛋白轻链产生或免疫球蛋白重链的合成被抑制而导致过多的轻链通过尿液排出 干扰物质1干扰因素1 1白蛋白 球蛋白等干扰性物质 1 2甲基苯磺酸法比热沉淀反应法灵敏度高 但有假阳性 1 3煮沸过滤除去尿中白 球蛋白时 动作要迅速 并需保持高温 否则本 周氏蛋白也会滤去 1 4过多的本 周氏蛋白 在900C以上不易完全溶解 故需与对照管比较 也可将尿液稀释后再测 尿本 周氏蛋白定性 12 操作步骤取尿5 10ml 加乙醚2 3ml 混合振摇后 使脂肪溶于乙醚 静置数分钟后 2000r min离心5min 吸取乙醚与尿液的界面层涂片 加苏丹III醋酸乙醇染色液1滴 镜检观察是否有红色脂肪小滴 如下图 参考范围正常人为阴性 结果审核1浑浊尿液因加入少量乙醚而澄清 则为脂肪或乳糜尿 2镜检下可见红色脂肪滴 临床意义因丝虫或其他原因阻塞淋巴管 使尿路淋巴管破裂而形成乳糜尿 丝虫病患者的乳糜尿的沉渣中常见红细胞 并可找到微丝蚴 尿乳糜定性检测 13 14 操作步骤取出试剂条 在1小时内应尽快使用 将试剂条按箭头方向插入尿液标本中 注意 尿液液面不能超过试剂条的标记线 至少5秒钟后取出平放于干净的台面上 亦可以不取出 一直放在尿杯中直到读结果 等待紫红色条带的出现 测试结果应在3分钟时读取 10分钟后判定后无效 结果判断阴性 质控区出现红杠线 测定区无红杠线出现 阳性 质控区和测定区都出现红杠线 无效 质控区