活化部分凝血酶时间(APTT)测定.doc

操作规程出凝血3.1活化部分凝血酶时间（APTT）测定（第四版）出凝血3.2 原理： 在37条件下用激活剂（糅花酸）激活因子XII和XI，以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面，在因子IX的参与下，测定贫血小板血浆的凝固时间。部分活化凝血酶时间测定（APTT）是内源性凝血系统的筛选实验。标本处理：患者处于休息状态下，采空腹静脉血（急诊病人除外）。采血者应技术熟练，“一针见血”，以防止组织损伤，使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后，将血液沿管壁缓缓注入试管，避免产生气泡；然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡。全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时，要在室温下3000rpm离心10分钟，室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时内完成，应将乏血小板血浆分装在0.51.0ml的小试管中快速冷冻，储存于-20冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果会不准确。冷冻血浆融化时，应将盛冷冻血浆的容器置于37水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化。出凝血3.4 试剂： APTT试剂：试剂购于天津威士达公司。德灵Actin试剂（试剂盒代号B4218-1）。每瓶试剂内含磷脂（从兔脑中提取），1.0104mol/L糅花酸，稳定剂共2ml。0.025M氯化钙：实验室自制。 试剂从冰箱中取出，室温平衡15min后上机分析。出凝血3.5 仪器：使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。出凝血3.6 操作：按仪器操作步骤执行标准操作。出凝血3.1开机：按下机器侧面的POWER 按钮。开机后机器进行自检，当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。出凝血3.2检查消耗品：1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。（一次性最多可放1000 个杯子）2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把试剂准备好，放到仪器内相应位置，注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时，可在主屏幕上选Reagent Setting，按屏幕显示放置试剂。3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶出凝血3.3准备标本：将样本放入样本架，再将样本架放到仪器进样器上。出凝血3.4输入检测项目：主菜单上按下Work List 键，进入工作菜单，输入APPT项目。出凝血3.5输入样本号： 按屏幕下菜单的ID No.键，按顺序输入样本的序号。出凝血3.6开始检测：录入完所有测试信息，按下屏幕右上角START 键，开始检测。出凝血3.7质量控制：使用德灵公司的leve11质控品做质量控制。每批质控品的值不超过2SD。（详见出凝血1质量控制）出凝血3.8 计算：仪器自动计算出结果。出凝血3.9 参考值：23s33s,由DADE BEHRING公司推荐。出凝血3.10 临床意义：APTT是内源性凝血系统的筛选实验。 APTT延长：见于凝血因子VIII、IX、XI、XII、V、II减低或缺乏，纤维蛋白原缺乏症，抗凝物质存在等。 APTT缩短：见于高凝状态、血栓性疾病等。出凝血3.11 参考文献：1） 主编王鸿利.止血与血栓检验技术.（第一版1992.6）上海科学技术出版社.2） 主编李家增 王鸿利 韩忠朝.血液实验学.(第一版1997.10)上海科学技术出版社.3） 主编邓家栋 杨崇礼 杨天楹.临床血液学.(第一版1985)上海科学技术出版社.4） 主编邓家栋 杨天楹 杨