果蝇的饲养及其遗传性状的分析.doc

果蝇的饲养及其遗传性状的分析一实验目的（1） 了解果蝇的生活史；（2） 掌握果蝇的麻醉及观察方法；（3） 通过实验学习掌握果蝇性别的鉴定方法；（4） 了解果蝇的饲养方法；（5） 仔细观察并记录实验室各品系果蝇的性状；（6） 理解和验证伴性遗传和分离、连锁交换定律。二实验原理（1） 果蝇的生活史及遗传学分析优点 果蝇属于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种。它的生活史包括：卵幼虫蛹成虫。 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度2025。 生长迅速，生活史较短，短时间内可获得大量子代；容易饲养，在常温下以玉米粉做饲料就可使之生长繁殖；染色体数目少，加之唾腺染色体巨大，是细胞学观察的好材料；突变性状多，且多数是形态突变，便于观察。（2） 果蝇杂交实验原理红眼与白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因（W）位于X染色体上，且红眼（+）对白眼（w）为完全显性。当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，无论雌雄均为红眼，F2中红眼:白眼=3:1，但雌蝇全为红眼，雄蝇中红眼:白眼=1:1；反交时F1中雌蝇为红眼，雄蝇为白眼，F2中红眼:白眼=1:1，雌蝇和雄蝇中的红眼与白眼的比例均为1:1。正常翅（+）对残翅（vg）为显性，且为常染色体遗传。当正常翅与残翅杂交时，无论正交还是反交，F1全表现出正常翅，将F1自交，F2中出现性状分离，且理论性状分离比为3:1。正常灰体（+）对黑檀体（e）为显性，且为常染色体遗传。当正常灰体（+）与黑檀体（e）杂交时，无论正交还是反交，F1全表现出灰体，将F1自交，F2中出现性状分离，且理论性状分离比为3:1。三实验内容及方法步骤（1） 果蝇培养基的配制及培养指管的消毒目前本实验室所用的果蝇培养基配方如下：A：白糖6.5g，琼脂1.0g，加100ml水，煮沸溶解。B：玉米粉8.5g，加水50ml，混合均匀。将B慢慢倒入A中，并不断搅拌混合，加热成糊状后，再加入少许酵母粉，少冷却后加入1ml丙酸，调匀后即可分装到事先经过高温灭菌锅灭菌后的指管中，以备接种培养。（2） 原种培养 在作为新的留种培养时，事先检查一下果蝇有没有混杂，以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶510对，移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇清醒过来后，再把培养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。 原种每24周换一次培养基（按温度而定），每一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称，培养日期等，作为原种培养，可控制到1015，培养时避免日光直射。（3） 黑腹果蝇成虫雌雄的鉴别在视体显微镜下可以观察到，雌雄果蝇成虫在在形态上有一些明显的区别，比如雌果蝇外生殖器较简单，有阴道板和肛上板等结构；雄果蝇外生殖器较复杂，有生殖弧，肛上板等结构。但通过这种辨认方法较繁琐，如图给出几种常见辨认方法：比较项目雄雌个体大小较小较大腹部末端较尖钝圆腹部背面条纹3条黑色条纹，上两条窄，最后一条极宽，并延伸到腹面，致使整个腹部背面的后部分呈黑色5条黑色条纹，彼此分开性梳第一对足的跗节基部有黑色性梳，形似小梳子，在显微镜下较明显无 （4）果蝇杂交 1. 实验材料及仪器试剂材料：野生型果蝇（+),白眼残翅果蝇（w），残翅果蝇（vg），黑檀体果蝇（e）仪器：放大镜、显微镜、麻醉瓶、白瓷板、毛笔、记录本试剂： 乙醚、酒精棉球、培养基 2.果蝇麻醉方法麻醉前先在实验台上放一干净的白瓷板，取一麻醉瓶，在瓶塞棉球滴一滴乙醚，将指管口与麻醉瓶口对好，轻拍指管，使果蝇落入麻醉瓶中迅速塞好棉塞，等观察到麻醉瓶中果蝇不再乱飞打开瓶塞，将果蝇倒在白瓷板上，拿放大镜观察。麻醉程度的大小要依据实验需要而定，如要做杂交实验，不可过度麻醉，否则影响其生活能力；如要观察性状，可以深度麻醉，麻醉后，如果果蝇翅外展，表明已死亡；如果翅膀仍紧贴在背腹上，表明果蝇只是暂时处于麻醉状态。 3.实验步骤挑选处女蝇：选择处女蝇时，先把亲本除去，收集10小时以内羽化出来的新果蝇，再把雌雄分开，这时得到的雌蝇应该都是处女蝇，如需验证，则先不放入雄蝇，3天后看其是否产卵，不产卵就是处女蝇了。挑选出白眼雌果蝇若干接入一只指管中编号为1，另外选出红眼雌果蝇若干接入另一只指管中编号2，挑选出黑檀体雌果蝇接入编号3的指管中，挑选出残翅雌果蝇接入编号4的指管中。杂交：向1号指管中接入红眼雄果蝇若干只，向2号指管中接入白眼雄果蝇若干只，向3号指管中接入灰体残翅雄果蝇若干只，向4号指管接入黑檀体正常翅雄果蝇若干只，在实验记录本上记载好每只指管接种果蝇类型及实验日期。 4.F2的自交 将上一代的成虫放掉，挑选F2中处女蝇，然后进行同指管中雌雄杂交，杂交转入另外指管中编号记录好，等F2产子后将亲本放飞，再观察其子代果蝇的性状分离，并记录好实验数据。4 实验数据的处理（1） 一对相对性状观察黑腹果蝇的白眼红眼性状的观察，实验观察对象为1号指管及由1号指管繁殖得到的F2代果蝇，将两次杂交实验的果蝇数量记录于表一与表二中表一 正交F1代果蝇的性状时间 正交（白眼红眼）红眼白眼总数比例表二 正交F2代的性状时间正交F2红眼白眼红眼白眼总数比例 （2）两对相对性状的观察黑腹果蝇的正常翅与残翅的观察，黑檀体体色与正常灰体体色的观察，实验对象为3号指管及由3号指管繁殖得到的F2代果蝇，同样将两次实验结果记录于下表三和表四中表三 正交F1代果蝇的性状时间正交（黑檀体正常翅灰体残翅）黑檀体正常翅黑檀体残翅灰体正常翅灰体残翅总数比例表四 正交F2代果蝇的性状时间正交F2黑檀体正常翅黑檀体残翅灰体正常翅灰体残翅总数比例5 实验结果分析分析正交图谱分析正交 P： 雌红眼雄白眼 F1: 雌红眼 雄红眼 理论： 1 ： 1 F2： 雌红眼 雌白眼 雄红眼 雄白眼 果蝇眼色遗传图谱分析 正交 P： 黑檀体正常翅（雌）灰体残翅（雄 ） F1: 黑檀体正常翅 黑檀体残翅 灰体正常翅 灰体残翅 理论： 全为灰体正常翅 F2： 黑檀体正常翅 黑檀体残翅 灰体正常翅 灰体残翅 果蝇体色和翅型遗传分析讨论 对于以上正交的结果，发现理论值之比与实际值值比有一定的差距，产生数据偏差的原因可能可能有：1.进行试验的环境条件有差异，由于不同环境条件下的重组值是有变化的。2.观察果蝇时，有一些观察不到放走的，死掉的或者没有观察清楚的等等