29血管壁和血小板检验.doc

课题29：血管壁和血小板检验授课班级：授课日期：学 时 数：2学时一、目的要求：1. 掌握出血时间测定、血块收缩试验的原理、方法、质量保证和临床意义2. 熟悉血小板粘附试验、聚集试验的原理、方法及临床意义3. 了解束臂试验、血管性血友病因子抗原测定原理及临床意义二、讲授重点：1 出血时间测定2 血块收缩试验三、讲授难点：1 血小板粘附试验2 血小板聚集试验四、教学方法：运用多媒体课件，以讲授为主，解释课本中的难点五、教学内容概要与学时分配：第二十七章 血管壁和血小板的检验第一节 血管壁的检验（40分钟）一、束臂试验二、出血时间测定三、血管性血友病因子抗原测定第二节 血小板的检验（50分钟）一、血小板形态观察二、血块收缩试验三、血小板粘附试验四、血小板聚集试验五、其它六、授课内容：第二十七章 血管壁和血小板的检验 第一节 血管壁的检验一、束臂试验：一定血压下，束臂一定时间，观察5cm2范围内新出血点数，与血管及血小板相关。 二、出血时间（Bleeding time, BT）：是指皮肤受特定条件的外伤后自然出血到自然止血所需的时间。是反映毛细血管通透性和脆性，血小板数量和质量以及毛细血管与血小板相互作用的试验。 采用出血时间测定器法：血压40mmHg，刀片长6mm，刺入皮肤深度1mm，肘前窝下5cm尺侧皮肤。 其它方法：Ivy法及Duke法 参考值：2.59.5min 临床意义1.BT缩短：见于血栓前状态或血栓栓塞性疾病，如心肌梗死、心绞痛、脑血管疾病、糖尿病伴血管病变、妊娠高血压综合征、成人型呼吸窘迫征以及弥散性血管内凝血(DIC)的高凝血期等。2.BT延长：见于遗传性出血性毛细血管扩张症、维生素C缺乏症、血小板减少症、血管性血友病(vWD)、血小板无力症以及某些血小板贮存池病等。注意事项 1.对采血部位要保暖，血液应自动流出。 2.穿刺伤口应符合要求，穿刺深度为23mm，否则会影响结果。 3.穿刺要避开血管、疤痕、水肿、溃疡等部位。 4.滤纸吸干流出血液时，应避免与伤口接触，更不能挤压。三、血管性血友病因子(vWF)抗原测定方法及参考值 1.Laurell免疫火箭电泳法：61.6%126.6%。 2.单抗ELISA法：77.9%137.1%。 3.ELISA法：0.461.58U/ml。临床意义 1.vWF：Ag浓度减低，见于vWD，是诊断vWD的重要指标。 2.vWF：Ag浓度增高，见于剧烈运动后、肾上腺素受体被兴奋、心肌梗塞、心绞痛、脑血管病变、肾小球疾病等。第二节 血小板的检验血小板具有粘附、聚集、吸附、释放等多种功能，与许多生理现象病理过程密切相关。粘附是血小板与血管壁胶原之间的粘附；聚集是血小板之间发生反应合并血小板团的过程。许多病理过程可加强血小板粘附和聚集功能。因此，血小板功能的检测对于诊断血栓病以及抗血小板药物的筛选有重要临床意义。一、形态观察：二、血块收缩试验（CRT） ： 血液凝固后，血凝块发生收缩现象，这主要与血小板的数量和功能有关。方法及参考值 1.全血法：1/21h开始收缩，24h完全收缩。 2.定量法： 血清量(ml)100%血块收缩率(%) = 。 全血量(ml) 参考值：48%64%。临床意义1.全血血块收缩不佳或完全不收缩：见于血小板无力症（但有10%20%的患者正常）、血小板减少性紫癜（尤其血小板数50109/L）、血小板增多症、红细胞增多症、严重凝血因子缺乏和凝血障碍、纤维蛋白缺乏症或增多症、异常球蛋白血症等。2.血块收缩过度：见于先天性凝血因子缺乏症、严重贫血、有的原因不明。注意事项 采取标本应迅速，标本应及时送检。三、血小板粘附试验(PAdT)方法及参考值1.玻球法：男性29%40.8%；女性34.2%44.6%。2.玻珠柱法：53.9%71.1%。3.玻璃滤器法：21.0%42.8%。临床意义 1.粘附率增高：血栓前状态及血栓性疾病如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、肾小球肾炎、妊娠高血压综合征。 2.粘附率减低：血管性血友病、巨大血小板综合征、血小板无力症、尿毒症、肝硬变等，以及服用阿司匹林、双嘧达莫、保泰松等药物之后。注意事项 空腹血用109mmol/L枸橼酸钠抗凝，血液与抗凝剂之比为91。四、血小板聚集试验(PAgT)方法及参考值 1.比浊法血小板聚集试验 (1)浓度为610-6mol/L的肾上腺素(ADP)引起的最大聚集率为21.7%48.7%，坡度为41.786.1度。 (2)浓度为4.510-6mol/L的ADP可引起双相聚集曲线，第一相的最大聚集率15.5%25.1%，坡度2994.8度。 2.自发性血小板聚集试验：2.4%32.4%。临床意义1.血小板聚集率减低：见于血小板无力症、巨大血小板综合征、贮存池病、May-Hegglin异常以及低(无)纤维蛋白原血症、尿毒症、肝硬化、Wilson病、维生素B12缺乏症、感染性心内膜炎、服用血小板抑制药(阿司匹林等)。 2.血小板聚集率增高：见于高凝状态和血栓性疾病，如急性心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、深静脉血栓形成(DVT)、先天性紫绀型心脏病、高脂蛋白血症、抗原-抗体复合物反应、人工瓣膜、口服避孕药、高脂肪饮食、吸烟等。五、其他测定1.血浆-TG和PF4测定：ELISA法, 反应释放功能。含量减低见于颗粒缺陷症。2.血小板相关抗体检测：（PAIgG，ELISA法） 主要反映免疫性因素，如ITP。作为诊断特发性血小板减少性紫癜(ITP)的指标之一，90%以上PAIgG增高，如同时测定PAIgM、PAIgA及PAC3