钙磷镁测定.ppt

第十二章钙磷镁和微量元素检验 目标 钙 磷 镁代谢情况及功能微量元素的功能它们的测定方法 钙磷占第五 六位镁占第十一位 微量元素有重要的生物作用和临床意义 第一节概述 一 钙 磷代谢和调节 二 镁代谢和生理功能 三 微量元素与疾病 一 钙 磷代谢和调节 一 钙代谢 1 钙的含量 分布和血钙 骨 99 体液 组织 1 可扩散钙 影响代谢 功能 非扩散钙 与血浆蛋白结合 血钙受H 影响 pH升高 结合钙增加 Ca2 减少 H Ca2 K HCO3 2 钙的吸收和排泄 影响吸收的因素 VD3年龄溶解状态 乳糖 乳酸 氨基酸提高草酸 植酸抑制Ca P 2 1时 吸收最好 排泄 肠道 食物中未吸收及肠道分泌钙肾脏 点总排钙量的20 三 磷代谢 分布 骨 86 各组织体液 14 吸收 易吸收 较少缺磷排泄 肾脏 排泄量可血中磷酸盐成正比 三 钙 磷代谢的调节 甲状旁腺素 促进肾脏对Ca P重吸收 促进破骨细胞生成 促进骨盐溶解 促进钙 磷重吸收 Ca2 上升 降钙素 抑制肾脏对钙 磷的重吸收 促进骨盐沉积 抑制Ca P吸收 降低Ca2 VD3 促进肾脏对钙 磷的重吸收 促进溶骨作用 促进肠道Ca P吸收 升高Ca2 四 钙 磷的生理功能 1 钙的作用 1 凝血因子之一 2 增强心肌收缩 降低神经肌肉兴奋性 3 降低毛细血管通透性 减少渗出 4 做为酶的激活剂 抑制剂 5 激素的 第二信使 参与代谢调节 2 磷的作用 参与核酸 核苷酸 磷脂 磷蛋白的分子组成参与高能磷酸化合物生成共价修饰调节HPO42 H2PO4是缓冲体系 二 镁代谢和生理功能 一 镁的代谢 骨 60 骨骼肌 20 30 其它组织 10 血浆中 重碳酸 柠檬酸 磷酸盐 Mg2 Mg 血浆蛋白复合物 二 镁的生理功能 1 酶的辅助因子 约300种酶需Mg2 2 对神经肌肉兴奋性有降低作用 三 微量元素与疾病 一 微量元素对各种生命活动的影响 促进机体生长发育对神经系统结构和功能的影响内分泌的影响 免疫系统的影响对心血管疾病的影响对肿瘤发生 发展和治疗对胚胎及胎儿发育的影响 测复合物的活性 免疫化学法 三 微量元素的生物学作用及代谢 1 铁 吸收 贮量少时 吸收多酸性 吸收多Fe2 比Fe3 吸收多 代谢 Fe2 Fe3 运铁蛋白 合成血红素 功能 合成血红素 血红蛋白 肌红蛋白 细胞色素 过氧化物酶 过氧化氢酶 2 锌 分布 肌肉 62 2 骨 28 5 功能 1 与酶的合成与活性有关2 与免疫功能有关 3 铜 吸收 肠粘膜 合成铜蓝蛋白 排出 胆道 肠道 功能 1 参与许多酶的组成2 促进Fe3 Fe2 促进铁吸收 4 硒 肠道吸收 尿汗排出 多种酶的组成成分 如谷胱苷肽过氧化物酶 抗氧化作用 5 铬 葡萄糖耐量因子 使胰岛素与受体形成 S S 键 6 锰参与多种酶的组成 精氨酸酶 丙酮酸羟化酶 过氧化物岐化酶等 8 钼 骨牙中 对骨牙形成有重要作用 黄嘌呤氧化酶 醛氧化酶 亚硫酸氧化酶 9 氟 10 碘甲状腺素T3 T4合成 一 钙测定 第二节钙 磷 镁和微量元素测定 一 血清钙 磷 镁的测定 1 离子钙的测定 离子选择电极法 二 总钙测定 1 邻甲酚酞络合酮比色法 2 甲基麝香草酚蓝法碱性溶液中与钙螯合 淡绿变蓝 3 原子吸收分光光度法高温 Ca2 气态钙离子 吸收422 7nm光谱 4 EDTA络合滴定法 碱性下 Ca2 与钙红结合 淡红色EDTA滴入 夺取Ca2 钙红重新游离 变蓝色 二 血清磷的测定 磷钼酸还原法磷酸盐与钼酸 无色磷钼酸 加还原剂 蓝色复合杂聚物钼蓝 2 磷钼酸非还原法酸性溶液中磷酸 钼酸铵 磷钼酸铵杂聚化合物 3 酶法 三 血清镁的测定 原子吸收分光光度法 镁灯 激发 285 2nm光谱 标本中基态镁原子蒸汽吸收 吸收量与镁浓度成正比 2 甲基麝香草酚蓝法碱性溶液中与镁螯合 蓝紫色化合物 3 Calmagite比色法碱性下 镁与Calmagite染料生成紫红色化合物 4 达旦黄比色法 碱性下 Mg2 Mg OH 2胶体 与达旦黄生成橘红色复合物 二 尿液中钙镁磷的测定 先将尿液酸化 溶解尿中盐 三 铁 铜 锌测定 一 铁测定 1 血清铁 酸性 Fe3 与运铁蛋白分离 还原剂 Fe2 络合显色剂 比色测定 2 总铁结合力 加过量Fe 使运铁蛋白饱和 除去多余Fe2 上清 测Fe 甘氨酰甘氨酸 肽键 二 铜测定 1 原子吸收分光光度法 2 血清铜比色法 稀酸 Cu2 与蛋白分离 除蛋白 上清与二乙基二醇代氨基甲酸钠 金黄色化合物 三 锌测定 酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的磷钨酸 磷钼酸 蓝色化合物 加上Cu2 结合双缩脲法 提高灵敏度 适于测单一蛋白 且适用于蛋白含量较少的样品 4比浊法 酸性试剂 蛋白质 沉淀 5染料结合法 酸性条件下 蛋白质 NH3 酪 与染料中阴离子产生颜色反应 氨基黑 考马斯亮兰 6紫外分光光度法 色氨酸 酪氨酸在280nm有吸收峰 保持蛋白活性 7折光测定法 溶于溶液中的固体可增加它的光折射率 固定波长 固定温度下 光折射率与蛋白浓度成正比 血清总蛋白 临床意义 升高 多发性骨髓瘤 巨球蛋白血症等 降低 白蛋白合成减少 或蛋白丢失 二 血清白蛋白测定 1 染料结合法 白蛋白与染料结合 球蛋白很少与染料结合 溴甲酚绿 溴甲酚紫 白蛋白 pH4 2 BCG 蓝绿色化合物 OD与白蛋白浓度成正比 2 盐析法 球蛋白先沉淀 3 电泳法 4 2免疫化学法 抗原抗体反应 抗体过量 临床意义 合成减少 吸收减少 丢失过多 七 脑脊液蛋白质测定 脉络膜的毛细血管壁超滤形成 及少量中枢神经系统合成 浊度法 染料结合法 考马斯亮兰 邻苯三酚红钼络合显色法 临床意义 神经系统疾病 血脑屏障通透性增加 血管性脑水肿 细胞含量过多 神经细胞坏死等 三 血清球蛋白测定 球蛋白中色氨酸占2 而白蛋中