荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留_蔡其洪.pdf.doc

第卷 第期沈 阳 大 学 学 报（自 然 科学 版），年 月（） 文章编号：（ ）荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留蔡其洪，许桂芬，阮丽琴，李春来（莆田学院 医学院，福建 莆田 ； 食品安全分析与检测教育部重点实验室（福州大学），福建 福州 ）摘要：采用 增敏诺氟沙星的荧光强度，建立荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留 优化了 分析实验体系的最佳值、 质量浓度和反应时间，利用荧光法测定，诺氟沙星的线性方程为 ，线性范围在 之间，方法检出限为，回收率在、，之间该方法简单 快速 灵敏 准确 可用于肉类食品中诺氟沙星含量的测定关 键 词：诺氟沙星；荧光分析法；肉类；含量测定中图分类号： 文献标识码：诺氟沙星（，）又名氟哌酸， 为第三代喹诺酮类抗菌药物，具有抗菌谱广、抗菌 活性强，毒副作用低和临床疗效高的特点，是临床 应用最广泛的喹诺酮类药物之一诺氟沙星系化 学合成药物，合成容易，价格低廉，故也是动物和 水产养殖中最重要的抗感染药物之一，然而由于 滥用现象严重，导致药物残留，给食品安全带来严 重的威胁该类药物的残留除其本身的毒副作用 对人体造成直接危害外，更为严重的是人类长期 食用含较低浓度药物的动物源性食品，容易诱导 人类致病菌产生耐药性，从而影响该类药物的临 床疗效目前诺氟沙星的测定方法主要有紫外分光光 度，高效液相色谱法，荧光分析法由于 荧光法具有灵敏度高、选择性好的特点，是应用最广泛的方法其中应用 荧光增敏测定诺氟沙星，并用于滴眼液、胶囊和牛奶中诺氟沙 星的测定而荧光分析法用于肉类食品中诺氟沙 星药物残留的检测还未见文献报道，且本文所建 立的 荧 光 法 具 有 更 低 的 检 出 限 （ ），特别适用于痕量药物残留的检测，且样品 前处理方法简单，用于实际肉类样品中诺氟沙星 含量的测定，所得结果令人满意 实验部分 仪器与试剂荧光分光光度计（日本日立公司）；超 声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；万分之 一电子天平（上海恒平科学仪器有限公司）；离心机（上海手术器械厂），酸度计（上海精密 科学仪器公司）诺氟 沙 星 （中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所，），标准溶液质量浓度为， 标准溶液是用（ ）（国药集团化学试 ，），剂有限公司 分析纯 配成浓度为 实验所需的各种肉类食品为市场上随意购买，其他所用试剂均为分析纯，水为纯净水 样品前处理方法取经绞碎的各种肉类食品，每次加入 的盐酸溶液超声提取三次，每次 ，各离心 （ ），合并三次上清液，加入的 标准溶液，定容至，待测 测定方法于的具塞刻度试管中配制 的最佳体系溶液，使体系溶液中 收稿日期：基金项目：福建省教育厅科技计划项目（）；食品安全分析与检测教育部重点实验室 （福州大学）开放基金（）；福建省科技计划重点项目（）作者简介：蔡其洪（），男，福建莆田人，莆田学院医学院副教授，硕士沈阳大学学报（自然科学版） 第卷、，静置，取试液置于 石英液池中，设置激发和发射单色仪狭缝宽 度均为，扫描速度为 ，利用 荧光分析法测定 结果与讨论 金属离子的选择许多金属离子可与诺氟沙星发生络合反应，使荧光强度发生变化实验考察了 、 、 、 、 、 和 等七种不同金属离子与诺氟沙星配位反应后荧光强度的变化，结果发现 、 、 和 与诺氟沙星配位后荧光强度增强，增强的顺序为 ；而、 和 使诺氟沙星 的荧光强度受到猝灭 因此，我们选择增强 诺氟沙星的荧光强度作为分析测定的条件，其荧 光光谱变化如图图 和 的荧光激发和发射光谱 稳定性实验实验考察了 反应体系在内 荧光强度的变化情况结果可得从之 内，体系的荧光强度呈递增状态，从到 之间，荧光强度的变化在以内，因此实验选择 体系反应后进行分析测定 值的影响诺氟沙星结构中的氧原子和氮原子在不同酸 碱溶液中的质子化程度不同，从而影响发光体系的电子性质以及电子云分布，最后使 体系的荧光性质和强度发生变化实验选择用 盐 酸 和 氢 氧 化 钠 溶 液 调 节 使 体系中的 ，考察在不同 值溶液中荧光强度的变化，结果如图 所示，当溶液的 时， 体系的荧光强度 最大图 不同值溶液中体系荧光强度的变化 浓度的影响实验选择诺氟沙星与不同 浓度进行反应，测量其荧光强度的变化，结果可得当 浓度达到时，体系的荧光强度最大且处于稳定，见图故实验选择 浓度为作为反应的浓度图 不同 浓度对体系荧光强度的影响 样品背景干扰情况肉类样品的基体复杂，实验考察了各种肉类 样品基体的干扰情况，从实验结果可得空白肉类图 （） 和肉类 食品 的荧光激发和发射光谱（） （ ） （ ） 第期 蔡其洪等：荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留基体主要是内源性蛋白质的干扰，即内源性蛋白 质有着较强的荧光强度，但在本实验选取的最佳 条件下荧光峰位置 处测定时，内源 性蛋白质的荧光强度可以忽略不计，见图 标准工作曲线和检出限梯度配制不同浓度的诺氟沙星标准溶液，在最佳实验条件下，荧光法分别测定每一种溶液的 荧光强度，以 处的荧光强度对诺氟 沙星的浓度作工作曲线，见图得诺氟沙星的线 性方程为，线性范围为 ，相关系数 ，方法的检 出限为 精密度实验配制份相同质量浓度为的诺 氟沙星溶液，在一定的实验条件下进行荧光法测 定，得诺氟沙星的相对标准偏差（）为 从实验所得结果来看，该方法具有很好的精密度图 诺氟沙星的标准工作曲线 加标回收率实验分别在不含有诺氟沙星的各种肉类食品中加 入不同量的诺氟沙星，设定最佳实验条件进行测 定，每一份样品平行测定三次，结果取平均值，实验所得数据见表所示表 各种样品中诺氟沙星的回收率 样品序号 已知量（ ）添加量（ ）测得量（ ）回收率相对标准偏差 火腿肠 猪肉 鱼肉 鸭肉 结论实验采用 与诺氟沙星配位增强荧光强度，建立了肉类中诺氟沙星药物残留的直接荧光 分析法样品只需通过简单的处理，不需要分离， 即可用于复杂肉类基体中诺氟沙星药物残留的痕 量测定，且实验结果具有很好的准确度、灵敏度和 选择性参考文献： ， ， ，（）： ， ， ，： ， ， ， ， ， （） ： ，（）： ， ， ， ，（）：沈阳大学学报（自然科学版） 第卷 ， ， ， ，（）： ， ， ， ，（）： ， ， ，（）： ， （） ，： 郭常川，王磊，