离子色谱分离电导-紫外检测香精中的水杨酸.doc

离子色谱分离电导-紫外检测香精中的水杨酸陈易晖1，潘广文2 (1.象山出入境检验检疫局，315700，lyly_2001_2.戴安中国有限公司应用研究中心上海实验室，上海，201203，)摘要：本文建立了离子色谱分离电导紫外串联方法检测香精中的水杨酸。样品经提取、净化、过滤后进行色谱分析，以RFIC EGC 产生的梯度KOH为流动相，流速1.0 mL/min，采用IonpacAS16（250 mm 4 mm）离子色谱柱分离，电导紫外（UV294 nm）检测，外标法定量。结果表明，水杨酸的线性范围为0.1 10 mg/L，相关系数为0.9992，回收率为90% 105%，相对标准偏差均小于4%，检出限为0.04 mg/L（以信噪比为3计）。该方法排除了香精复杂基体的干扰，灵敏度高，前处理简便，用于香精中水杨酸的检测，结果令人满意。/product.asp?action=search关键词：高效离子色谱法；水杨酸；香精 水杨酸学名为邻羟基苯甲酸，纯品为白色结晶粉末，是重要的精细化工原料，常用作消毒剂和防腐剂。人体摄入一定量后会引起呕吐、腹泻、腹痛、呼吸频促、酸中毒等症状1。许多国家都将水杨酸列为限用添加剂，特别是在食品和日用消费品中。香精中的水杨酸主要由生产过程引入。水杨酸苄酯是香精中常用的添加剂，而水杨酸苄酯是由水杨酸与苯甲醇在硫酸催化下经反应制得的，在水杨酸苄酯中可能存在水杨酸的残留，因此建立香精中水杨酸含量的测定方法具有重要意义。目前关于水杨酸的分析常用的是反相液相液相色谱法2-5，而水杨酸的pKa为2.4，是一种水溶性较强的酸，适合于离子色谱分离6。离子色谱分离电导紫外检测水杨酸未见文献报道。/Shop/Product/Product_677374.shtml 1. 实验部分 1.1 仪器、试剂与材料 Dionex ICS-2100离子色谱仪（美国戴安公司），Ultimate 3000 VWD，Chromeleon色谱工作站，Barnstead-Nanopure纯水机，Anke TDL 80-2B离心机， KQ3200DE超声机， IonPac AS16(250 mm 4mm)色谱柱，Onguard RP（2.5cc），0.22 m尼龙滤膜过滤头。 水杨酸（99%，进口分装），RFIC EGC KOH淋洗液，NaOH（50%，Fluka），实验用水均为大于18.2 M.cm的二次去离子水。 /Product.asp?action=search&dq=1860&proClass=0&textitle=离心机1.2 实验步骤 1.2.1 标准溶液的配制 称取水杨酸标样，用水配制500 mg/L的水杨酸准溶液，保存于冰箱冷藏室中。临用时稀释成10 mg/L，分别准确移取10 mg/L的水杨酸标准溶液各0.0mL、0.1mL、0.5 mL、1.0mL、2.0 mL、5.0 mL、10.0 mL于10 mL容量瓶中，用水准确定容至刻度，配制成0、0.1、0.5、1、2、5、10 mg/L不同质量浓度的标准工作溶液。 /product.asp?action=search1.2.1 样品制备 移取香精样品1.0 mL，加100mM NaOH定容至10 mL，超声提取20min，取混匀的溶液置于离心机中3000 r/min离心10 min，上取清液溶解，先经On guard RP柱子过滤，再经0.22 m尼龙滤膜过滤，弃去初滤液，续滤液供色谱测定。 1.2.1 色谱条件 淋洗液：KOH梯度淋洗；流速为1.0 mL/min；进样体积25 L；电导紫外（294 nm）检测，外标法定量。 2 结果与讨论 2.1 实验条件考察 2.1.1 提取条件的考察 根据文献15报道，甲醇对水杨酸的提取效率较好。本实验选用水、碱液、甲醇对样品中的水杨酸进行提取，结果提示用100mM NaOH提取效果最佳，提取后的溶液然经On guard RP柱除去有机杂质，纯化后测定，结果令人满意。 2.1.2 色谱条件的考察 RFIC EGC KOH可产生灵活的浓度梯度，在所选的色谱条件下，其他离子无干扰。见图1。 图1 水杨酸标准溶液色谱图Fig 2 Chromatogram of the salicylic acid standard solution (1.0 mg/L) 2.2 方法学考察 2.2.1 线性关系与方法检出限 取水杨酸标准工作溶液，按“1.2.3”节色谱条件进行测定。以峰面积Y对质量浓度X（mg/L）进行线性回归，其线性方程为Y=0.7041X0.0253，相关系数为0.9992，水杨酸在其质量浓度为0.1 10.0 mg/L时线性关系良好。在测定条件下，水杨酸的方法检出限为0.03 mg/L。 2.2.2 方法的重复性 取同一样品，按“1.2.2”节样品制备方法平行处理8份样品，按“1.2.3”节色谱条件测定各样品，考察方法的重复性，水杨酸的保留时间、峰面积、峰高和含量的相对标准偏差分别为0.41%、0.73%、1.06%、1.67%，均小于2%。 2.2.3 回收率 准确称取空白香精样品10.000 g，分别加入高、中、低三种不同浓度的水杨酸标准溶液，按“1.2.2”节样品制备方法制备样品，按“1.2.3”节色谱条件测定样品，计算回收率，结果见表1，各样品的回收率范围为90% 105%，相对标准偏差均小于4%。 2.3 样品测定 按“1.2.2”样品制备的方法，对9021香精样品进行处理，按“1.2.3”节色谱条件测定其水杨酸的含量。测得该香精品中水杨酸的浓度为0.210 mg /L，经计算，该香精样品中水杨酸的含量为2.10 mg /L，见图2。 3 结论 以KOH梯度溶液为流动相，利用水杨酸的离解性，采用离子色谱分离，电导紫外法检测，可对香精中的水杨酸含量进行测定。本方法快速、准确、灵敏，重现性好，选择性好，样品处理步骤简单，分析周期短，不受杂质干扰，适用于大量样品的测定，具有推广到其他如烟草、食品和化妆品等样品的可能。 参考文献 1 董风强，周国俊，蒋健等，广州化工，2009（37）4：139-140 2 李锐，赵琪钟，解放军要学学报，2009（25）4：351-353 3 谭新良，赵瑜，杨华武，湖南科技大