离子色谱法测定食用油中生物胺.doc

离子色谱法测定食用油中生物胺摘要：本文研究了废弃食用油中生物胺的离子色谱测定方法。建立了使用离子色谱测定废弃食用油中中生物胺的检测方法。样品经过前处理后，通过离子交换色谱进行分离，抑制电导法测定并进行定量计算。以IonPac CS17分析柱进行离子分离。在0.1-2mg/L浓度范围内，五种常见生物胺的工作曲线的线性相关系数r均优于0.9995，对废弃食用油中样品进行加标，五种生物胺的平均回收率为96102%。该方法简单快捷，方便准确，可应用于废弃食用油中的生物胺检测。 关键词 离子色谱，电导，生物胺，废弃食用油中 1 前言 生物胺( biogenic amine, BA) 是脂肪族、酯环族或杂环族的低分子量有机碱, 常存在于动植物体内及食品中。食品中生物胺主要是由食品中相关微生物产生的酶, 或食品原料中固有的酶, 催化脱去食品中游离氨基酸的羧基而产生的1。微量生物胺是生物体( 包括人体) 内的正常活性成分, 在生物活细胞中具有重要的生理功能。但当人体摄入过量的生物胺( 尤其是多种生物胺同时摄入) 时, 会引起诸如头痛、恶心、心悸、血压变化、呼吸紊乱等过敏反应, 严重的还会危及生命。中国色谱网废弃食用油是质量极差、极不卫生，过氧化值、酸价、水分严重超标的非食用油。它含有毒素，一旦食用，则会破坏白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌。已有报道废弃食用油中可能含有生物胺类物质，利用离子色谱- 抑制电导2-5法测定食品中的生物胺，可以有效降低复杂背景对生物胺测定的影响，在实际样品分析中得到较好的应用。 2 实验条件及仪器 21 仪器和试剂 离子色谱系统：ICS-3000型离子色谱仪(美国戴安公司)， 带CR-ATC和淋洗液发生器（EG），Chromeleon 6.8色谱工作站。CSRS300型抑制器。用水均为电阻率l8.2 M cm的去离子水。 试剂：前处理所需要的甲烷磺酸为ACros提供（99%），所用溶液及样品稀释均用电阻率为18.2Mcm超纯水配制,水由MilliPore型超纯水系统(美国MilliPore)提供 22 实验条件 离子色谱系统：IonPac CS17分离柱和IonPac CG17保护柱，淋洗液为甲烷磺酸梯度淋洗 ，0-25min，7-30mM；25-37min，30mM，37-40min，7mM，流速：1.0mL/min，分析时间为40分钟。离子色谱进样体积为100L。 3 结果和讨论 31样品的前处理条件 精密称取油样10g，加去离子水30mL使充分溶解混匀，再加入300L1mol/L的MSA溶液，涡旋混匀，常温震荡1h，静置10分钟分层。取下清液经过0.22尼龙滤膜和OnGuard II RP柱， 然后进样。/Product.asp?action=search&dq=1860&proClass=0&textitle=超纯水系统3.2标准曲线 标准溶液的配置：取五种生物胺（尸胺，腐胺，组胺，精胺，亚精胺）的标准储备液（各1000ppm），用去离子水稀释至10ppm、100ppb的混标溶液，再依次稀释分别配制得到标准工作溶液0.1、0.2、0.5、1、2ppm混标，每个溶液中加入少量的MSA浓溶液，使标液中MSA浓度在10mMol/L。 3.3样品测定和回收率实验 由客户采集几种废弃食用油样品，上述离子色谱条件分析。样品加标色谱图如图2所示。 图1样品测定及加标谱图表1为3种样品的测定结果。由这些数据可以看出，在所检测的3种样品中均不含有生物胺。 表1样品测定结果参考文献 1 Brink BDC, Joosten HMLJ, Huis IVJHJ. Int J Food Microbiol, 1990, 11 ( 1) :73284 2Cinquina AL, Cali A, Santis LD, et al. J Chromatogr A, 2004, 1032(1) : 73277 3 Draisci R,Giannetti L, Lucentini L, et al. J Chromatogr A, 1998, 798(1) : 1092116 4 Salma.KS, John AK. J Chromatog