尿液生成的影响因素.doc

J I A N G S U U N I V E R S I T Y药理学实验报告学院 班级 姓名 学号 时间 2012.05.20 江 苏 大 学实 验 报 告学院 药学院 班级 姓名 学号 天气 晴 时间 3h 实验时间 2012.05.09 13：0017：00 小组成员 实验五 尿生成的影响因素实验 一、 实验目的 学习输尿管擦管或膀胱擦管技术和尿的收集方法。观察刺激迷走神经和静脉注射 生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素等药物对尿量和尿中某些成分的影响，分析这些因素的作用机制。二、实验原理 尿的形成过程包括肾小球的滤过作用及肾小管与集合管的重吸收和分泌作用。肾小球滤过作用的动力是有效滤过压，而有效滤过压的高低主要取决于三个因素：肾小球毛细血管血压、血浆胶体渗透压和囊内压。在正常情况下，囊内压不会有明显变化。肾小球毛细血管血压主要受全身动脉血压的影响，当动脉血压为10.724.0kpa，肾小球毛细血管血压维持相对稳定：高于24.0kpa或低于10.7kpa，其会随血压变化而变化。另外，血浆胶体渗透压降低，会使有效滤过压增高，肾小球滤过率增加。影响肾小球、集合管泌尿机能的因素，包括肾小管溶液中的溶质浓度和抗利尿激素等。肾小管溶质浓度高，可妨碍肾小管对水的重吸收，因而使尿量增加；抗利尿激素可促进肾小管与集合管的重吸收，导致尿量减少。三、实验材料1、实验动物：健康兔子一只2、实验试剂：6 g/L酚红、100g/LNaOH、肝素钠、20% glc、0.1g/mL的去甲肾上腺素、 10g/L的呋塞米（速尿）、垂体后叶素 3、实验设备：兔箱，兔台，绳子，毛线，解剖刀，止血钳，镊子，静脉夹，膀胱插管， 压力换能器，微机生物信号采集处理系统 四、实验方法和步骤 1静脉麻醉： （1）用右手把两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，提起家兔，然后用左手托住臀部，使呈 坐位姿势。 （2）动物（家兔）称重后，固定于兔箱内，经耳缘静脉注射2%戊巴比妥，注意观察角 膜反射，呼吸，肌肉松弛情况。动物被麻醉后，身体松软，疼痛感觉消失。 2颈部手术 剪去颈前兔毛，正中切开皮肤56cm,纵向分离软组织和颈部肌肉，暴露器官和 与血管平行的右血管神经鞘，细心分离出右侧鞘膜内的迷走神经，在神经下穿线备 用。分离左侧颈动脉，行颈动脉插管。给予肝素生理盐水防止凝血，生理盐水纱布 覆盖手术伤口，记录正常血压。 3腹部手术1） 用手术刀从耻骨联合向上沿中线作一切口，沿腹白线切开腹腔（注意勿伤其他内脏 器官），暴露膀胱（尽量减少刺激膀胱，防止其缩小，难以插管）2） 膀胱底两侧辨认输尿管的位置，在前壁血管少处切口，插入膀胱插管（插管内预先 充满温热的生理盐水），用线结扎膀胱颈部，膀胱插管与膀胱用线扎牢固定，手术后 生理盐水纱布覆盖3）记录正常血压，收集正常尿量（mL/5min）4）耳缘静脉缓慢注入生理盐水15mL，观察血压尿量的变化，连续收集尿量，记录尿量 随时间的变化（每隔5min记录一次，共记3次）5） 静脉注射20% glc 5 ml，记录血压、尿量变化（mL/5min）（每隔5min记录一次， 共记3次）6）i.v. 去甲肾上腺素 0.1g/L 0.3 ml7）i.v. 呋噻咪 5mg/kg8) i.v 6g/L 酚红 0.5ml ,用盛有100g/L NaOH 溶液的培养皿收集尿液，至刚出现酚 红所需时间9）i.v. 脑垂体后叶素0.75单位/kg。5、 实验数据记录实验数据记录：项目血压mmHg（每5min）尿量(ml/5min)（每5min）正常87.320i.v.生理盐水89.9688.3087.971191i.v 20%glc 89.1888.5688.44585323i.v. NE 124.32107.9598.448118i.v. 呋噻咪 90.7590.0489.831278360i.v. 酚红88.63排出酚红所需时间:无i.v.脑垂体后叶素 75.1610六、实验数据分析： 1、耳缘静脉注射生理盐水对尿量和血压的影响及作用机制：静脉快速注射生理盐水可使 家兔尿量显著增加，血压升高。 其机制为：静脉快速注射生理盐水引起血容量增加，进而使血压升高，当动脉血压在 80180mmHg（10.724.0kPa）范围内变动时，肾小球毛细血管血压可保持相对稳定。 当血压升高超过肾血流的自身调节能力时，可使肾小球毛细血管血压升高，且血浆稀 释引起血浆胶体渗透压下降，二者均可使肾小球滤过率升高，尿生成增多，继而尿流 量增大。 2、耳缘静脉注射20%葡萄糖对尿量和血压影响及其作用机制：静脉注射 20%葡萄糖可使家 兔血压上升，尿量增加。其机制为：耳缘静脉注射20%葡萄糖5mL可使血浆渗透压升高，促进组织也流入毛细血管， 循环血量增加引起血压升高。注射20%葡萄糖使家兔的血糖浓度明显超过肾糖阈，导致小管液中葡萄糖含量增多，小管液渗透压增高，妨碍了水和NaCl 的重吸收，造成尿量增多并出现糖尿。另外血压升高可使肾小球滤过率增高且反射性抑制ADH 的合成和分泌，也可使尿量增多。3、 耳缘静脉注射去甲肾上腺素对尿量和血压的影响及作用机制：静脉注射去甲肾上腺素可 使血压升高，尿量减少。其机制为：去甲肾上腺素可兴奋血管平滑肌上的-肾上腺素能受体，引起血管收缩，外周阻力增加，同时对心脏起到正性变时、变力和变传导作用，从而导致血压上升。去甲肾上腺素可使入球小动脉和出球小动脉收缩，但前者收缩比后者更明显，使肾小球毛 细血管血浆流量减少，肾小球毛细血管血压下降，肾小球的有效滤过压下降，尿生成 减少。4、 耳缘静脉注射呋噻米对尿量和血压的影响及作用机制静脉注射速尿可使家兔尿量大幅 增加，血压变化不明显。其机制为：呋噻米可与髓袢升支粗段的Na+-K+-2Cl-共同转运系统可逆性结合，抑制其转运能力，使NaCl 重吸收减少，降低了肾的稀释功能，同时使髓质间隙渗透压降低，也降低了肾脏的浓缩功能，从而产生迅速而强大的利尿作用，排出大量等渗尿。 5、耳缘静脉注射酚红，进入血液后，酚红大部分与血浆蛋白结合而运输，很少被肾小球滤过，主要由近曲小管排入小管液，随后经尿排出体外。实验中从静脉注射酚红后半小时内没有出现酚红，有可能是由于家兔局部耳缘静脉堵塞，没有进入血液循环。 6、耳缘静脉注射垂体后叶素对尿量和血压的影响及作用机制：注射垂体后叶素可使家兔尿 量减少，血压降低。 其机制为：垂体后叶素包括催产素和ADH，ADH 可作用于血管平滑肌的相应受体，使血管 收缩，但由于降压反射的作用，血压最终仍表现为下降。ADH 可与远曲小管和集合管上 皮细胞管周膜上的V2 受体结合，通过兴奋性G 蛋白激活腺苷酸环化酶，使胞内cAMP 生 成增多，最终增加管腔膜上的水通道，从而提高远曲小管和集合管上皮对水的通透性， 增加水的重吸收而使尿量减少。6、 实验结论 1、耳缘静脉注射大量生理盐水和高渗葡萄糖可使尿量增多，血压升高。 2、耳缘静脉注射去甲肾上腺素可使尿量减少，血压升高。 3、耳缘静脉注射速尿可使尿量大量增多。 4、耳缘静脉注射垂体后叶素，尿量减少，血压下降。七、思考题 1、兔静脉注射20葡萄糖5毫升为什么会引起利尿？ 答：耳缘静脉注射20%葡萄糖5ml 可使血浆渗透压升高，促进组织也流入毛细血管， 循环血量增加引起血压升高。注射20%葡萄糖使家兔的血糖浓度明显超过肾糖阈，导 致小管液中葡萄糖含量增多，小管液渗透压增高，妨碍了水和NaCl 的重吸收，造成 尿量增多并出现糖尿。另外血压升高可使肾小球滤过率增高且反射性抑制ADH 的合成 和分泌，也可使尿量增多。 2、试解释垂体后叶素对尿量的影响。 答：垂体后叶素包括催产素和ADH，ADH 可作用于血管平滑肌的相应受体，使血管收 缩，但由于降压反射的作用，血压最终仍表现为下降。ADH 可与远曲小管和集合管上 皮细胞管周膜上的V2 受体结合，通过兴奋性G 蛋白激活腺苷酸环化酶，使胞内cAMP 生成增多，最终增加管腔膜上的水通道，从而提高远曲小管和集合管上皮对水的通透 性，增加水的重吸收而使尿量减少 3、耳缘静脉注入的酚红经什么方式进入尿液？ 答：耳缘静脉注射酚红，进入血液后，酚红大部分与血浆蛋白结合而运输，很少被肾 小球滤过，主要由近曲小管排入小管液，随后经尿排出体外。八、注意事项 1、实验需做多次静脉注射，应特别注意家兔耳缘静脉的保护，静脉穿刺从近耳处开始， 当堵塞时逐次移向耳根。 2、做膀胱插管时，操作需轻，以免膀胱受到刺激而缩小，增加插管难度。 3、各项试验的顺序安排是：在尿量增多的基础上进行减少尿生成的实验，在尿量少的基 础上进行促进尿生成的实验。、九、参考文献 1朱依谆，殷明，等.药理学.第7版.北京：人民卫生出版社，2011.8 2陆源，夏强，等.生理科学实验教程.浙江:浙江大学出版社，2004.8十、感想 由于上次实验很失败，所以做实验的时候感觉有点怕怕的，但这样只会使我们更 加认真的实验，哈哈哈哈，结果还不错。 对于上次实验的失败我们得出的结论是：我们的兔子太瘦小了，体质太弱了（什 么时候死不好非要等到实验一半就死了）。因此这次我们抓了一只目视起来最大的兔。 实验开始了，由于上次已经做过类似的实验，这次的实验手术操作部分还是很快的，很快我们就做到膀胱插管了，在研究生学姐和老师的指导下成功的把管子插到了家兔膀 胱中（可惜漏掉了不少的尿液）。