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分子生物学与基因工程试题库(6) 一、选择题 (多选或单选啊)(每题2分,共计20分) 1.真核基因经常被断开:( ) (a)反映了真核生物的mRNA是多顺反子 (b)因为编码序列“外显子”被非编码序列“内含子”所分隔 (c)因为真核生物的DNA为线性而且被分开在各个染色体上,所以同一个基因的不同部 分可能分布于不同的染色体上 (d)表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 (e)表明真核基因可能有多种表达产物,因为它有可能在mRNA加工的过程中采用不 同的外显子重组方式 2. 沉默基因座:( ) (a)因为沉默子区域的存在与MAT基因座不同 (b)在SIR基因产物的作用下,保持转录失活 (c)存在几个DNaseI超敏位点 (d)与DNA复制起点结合在一起 (e)在交配型转换过程中作为受体(f)因为染色质结构保持转录失活 3. 甾醇类受体转录因子( ) (a)结合的激素都是相同的 (b)与DNA的结合不具序列特异性 (c)与锌结合的保守序列不同于锌指蛋白 (d)通过第二“指”C端的氨基酸形成二聚体 (e)参与转录激活,与DNA和激素结合分别由不同的结构域完成 4. 正常情况下,同乙酰化蛋白质氨基末端的甘氨酸相连的脂肪酸是( ) (a)软脂酸(b)油酸 (c)十四酸盐(肉豆蔻酸盐) (d)乙酰基(e)以上都对 5. 下列关于原核生物转录的叙述中哪一项(哪些)是正确的?( ) (a)核糖体的小亚基能直接同mRNA作用 (b)IF-2与含GDP的复合物中的起始tRNA结合 (c)细菌蛋白质的合成不需要ATP (d)细菌所有蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸(e)多肽链的第一个肽键的合成不需要EF-G 6. 第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是( )(a)EcoRI (b)EcoB (c)EcoC (d)EcoR 7. 型限制性内切核酸酶: ( ) (a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列 (b)仅有内切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供 (c)限制性识别非甲基化的核苷酸序列 (d)有外切核酸酶和甲基化酶活性(e)仅有外切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供 8. 在长模板链的指导下引物延伸合成长的DNA互补链时应选用( ) (a)T4DNA聚合酶 (b)Klenow酶 (c)大肠杆菌DNA聚合酶I(d)T7DNA聚合酶 9. 基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的,真正的天然质粒载体很少,在下列载体中只有( )被视为用作基因工程载体的天然质粒载体 (a)pBR322 (b)pSCl01(c)pUBll0 (d)pUCl8 10. 下面关于细菌人工染色体(BAC)的特征描述,除了( )外都是正确的。 (a)通过电激法将大质粒转化大肠杆菌比酵母的转化率提高了10100倍 (b)BAC载体在细菌中以环型超螺旋状态存在,使分离操作起来相对容易 (c)BAC载体在大肠杆菌宿主保持高拷贝 (d)克隆到BAC载体上的外源片段可以直接进行测序以获得末端序列 二、判断题(每题1分,共计10分)1 在RNA的合成过程中,RNA链沿35方向延长。 ( ) 2 高等真核生物的大部分DNA是不编码蛋白质的。 ( )3 转录酶可以识别整合区周围足够多的序列,这样,转座子不整合到基因的中间,因为破坏基因对细胞是致死的。 ( )4下面哪些说法是正确的? ( ) (a) LacA的突变体是半乳糖苷透性酶的缺陷 (b) 在非诱导的情况下,每个细胞大约有4分子的半乳糖苷酶 (c) 乳糖是一种安慰诱导物 (d) RNA聚合酶同操纵基因结合 (e) 多顺反子mRNA是协同调节的原因 (f) Lac阻遏物是一种由4个相同的亚基组成的四聚体 (g) 腺苷酸环化酶将cAMP降解成AMP (h) CAP和CRP蛋白是相同的 (i) -35和-10序列对于RNA聚合酶识别启动子都是很重要的 (j) 色氨酸的合成受基因表达、阻遏、弱化作用和反馈抑制的控制 (k) Trp的引导mRNA能够同时形成三个“茎环”结构 (1) 在转录终止子柄部的A-T碱基对可以增强结构的稳定性 (m)真核生物和原核生物的转录和翻译都是偶联的 (n)在色氨酸浓度的控制下,核糖体停泊在Trp引导区一串色氨酸密码子上,但并不与之脱离 (o) AraC蛋白既可作为激活蛋白,又可作为阻遏蛋白起作用(p) AraC的表达不受调控 5小的DNA病毒,如SV40和Xl74完全依赖寄主复制机制来复制它们的DNA。( )6. 由于基因家族中成员之间是密切相关的,因此可以用其中一个成员作为探针进行高度严紧的杂交来检测其他成员。 ( )7. 根据遗传连锁作图把基因定位在基因组中是定位克隆的第一步,它为分离特定的人的基因提供了一个直接而快速的方法。 ( )8. 简并引物是根据已知DNA序列设计的引物群. ( )9.一般情况下,质粒既可以整合到染色体上,也可以独立存在。 ( )10. 多核苷酸激酶之所以能够用于DNA片段的标记,是因为它能够将单个的32p标记的单核苷酸加到每一DNA链的5端。 ( ) 三、填空(每空1分,共计20分)1 -年Luria和Human在T偶数噬菌体对大肠杆菌感染实验中首次发现了细菌的-一现象。 2 原核生物主要有两种类型的DNA连接酶:E.Coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。基因工程中使用的主要是T4 DNA连接酶,它是从T4噬菌体感染的E.coli中分离的一种单链多肽酶,分子量为-kDa,由T4噬菌体基因-编码。E.coli DNA连接酶是由大肠杆菌基因-编码,也是一条多肽链的单体,分子量为 kDa。这两种DNA连接酶有两个重要的差异:第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同,T4 DNA连接酶用-, 而E.coli DNA连接酶则用-作为能源。第二是它们催化平末端连接的能力不同,在正常情况下只有T4DNA连接酶能够连接平末端,E.Coli DNA连接酶则不能。即使是调整反应条件,E.coli DNA连接酶催化平末端的连接效率也只有T4 DNA连接酶的-。 3.由于不同构型的DNA插入EB的量不同,它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同,SC DNA的泳动速度-,OC DNA泳动速度-,L DNA居中,通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。 4第一个报道的全测序的单链DNA噬菌体是X174,DNA长5386个碱基对,共一个基因,为一环状DNA分子,基因组的最大特点是-。 5SDS是分离DNA时常用的一种阴离子除垢剂,它有四个作用: (1)-一; (2)-一; (3)-;(4)-一; 6. 在分离DNA时,常用-法、-法、法及-法等方法去除蛋白质。 四、简答题(每题3分,共计30分)1. Sanger的双脱氧法测序的原理。 2. 某学生在用EcoRI切割外源片段时,出现了星号活性,请分析可能的原因? 3.根据遗传密码字典,将mRNA序列5-AUGUUCCAGAGCACGGGCCCUAAA-3翻译成多肽,假定翻译从5端的AUG开始。如果: (1)C改成G; (2)C改成A; (3)C被缺失;上述变化对多肽有何影响? 4. 既然真核mRNA的poly(A)尾不是由DNA编码的,为什么能将它准确地加到3末端上呢?5.列出调控转录因子被激活的7种途径,并各举一例。 6.请描述C值矛盾,并举个例说明。 7. 解释因子是怎样选择专一性启动子共有序列而启动不同基因表达的(考虑对环境压力的应答)。 8. 一个基因间阻遏物突变怎样阻遏了一个错义突变? 9. 9.描述Meselson-Stahl试验,说明这一实验加深我们对遗传理解的重要性。10. 起始tRNA具有哪两种与其他tRNA不同的特性? 五、设计分析题(每题5分,共计10分)1. 实验结果表明所研究细菌的一个操纵子具有三个相似拷贝,它编码一个关键酶的亚基。由于没有检测到第三个碱基简并性(摇摆性)现象,由此说明接近的相同性(99)是由于DNA修饰作用的结果。请问

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