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文档简介
广州农冠(台资)生物科技有限公司GUANGZHOU NONGGUAN BIO-TECHNOLOGY CO.,LTD 广州市科学城揽月路8 0 号广州科技创新基地 D 区3 0 3用于发酵过程作为活细胞催化剂的微生物,包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类。来源于自然界大量的微生物,从中经分离并筛选出有用菌种,再加以改良,贮存待用与生产.菌种改良即采用遗传育种的方法,使野生型菌株(从自然界分离筛选而得的出发菌株)的遗传因子 DNA发生突变、重组,从而从中选出产量高、成品质量好或具有新的培养特性如耐产物抑制、能利用廉价原料以及具有生产新品种能力的优良菌种。采用的方法有诱变育种、杂交育种、细胞融合技术和重组DNA技术。诱变育种是利用诱变因子如紫外线、钴60、乙烯亚胺类等物理或化学诱变剂处理生产菌株的单孢子悬浮液,以获得诱发突变株。随后进行突变株的筛选,从中筛选高产菌株。由于随机的突变群体中,有益突变所占比例很低,要获得高产突变株必须进行大量筛选。近年来,随着发酵代谢控制研究的发展,可根据生物合成途径中的反应点,并通过它们的改变以提高产率或其他特性,如选育抗产物反馈抑制的突变株、增加细胞透性的突变株及营养缺陷型的突变株等。这种“理性筛选法”广泛应用于氨基酸产生菌的选育。菌种保存总述使优良菌种的性状保持稳定,人为地创造条件,使菌种的新陈代谢活动处于不活泼状态,即选取优良菌种的休眠体(孢子或芽孢)或富有生命力的悬浮液在低温或脱水状态下保存。 低温保存法简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4冰箱保存,保存时间不超过12个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达34个月;液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35时,即可置于-150-196的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。 脱水保存法沙土保存法,能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合,经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌23次,烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子,用无菌蒸馏水22.5ml制成孢子悬液,吸取少许加入沙土管中,经真空抽干,外观呈松散状态,于4冰箱保存,保存期可达57年。 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂(一般用脱脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管内于-20-30的乙醇浴中速冻。然后,在低温下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻,熔封安瓿管,于低温下保存。保存期可达510年之久。 石蜡油封存法,在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油,高出斜面1cm,于4冰箱或低温干燥处保存,此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。常见的几种菌种1、犁头霉犁头霉属(Absidia), 犁头霉的菌丝体与根霉相似,有匍匐枝和假根,但孢囊梗在匍匐枝中间,不与假根对生。孢囊梗大多25个成簇,常呈轮状或不规则分支枝。孢子囊基部有明显的囊托,囊轴锥形或半球形。接合孢子着生在匍匐枝上,此属菌广泛分布于土壤、酒曲和各种粪便中,是制酒生产的污染菌,有些能在37摄氏度生长的种类是人、畜的病原菌,有些菌株为转化甾族化合物的重要菌株。2、曲霉曲霉(Aspergillus)是发酵工业和食品加工业的重要菌种,已被利用的近60种。2,000多年前,我国就用于制酱,也是酿酒、制醋曲的主要菌种。现代工业利用曲霉生产各种酶制剂(淀粉酶、蛋白酶、果胶酶等)、有机酸(柠檬酸、葡萄糖酸、五倍子酸等),农业上用作糖化饲料菌种。例如黑曲霉、米曲霉等。 曲霉广泛分布在谷物、空气、土壤和各种有机物品上。生长在花生和大米上的曲霉,有的能产生对人体有害的真菌毒素,如黄曲霉毒素B1能导致癌症,有的则引起水果、蔬菜、粮食霉腐。 曲霉菌丝有隔膜,为多细胞霉菌。在幼小而活力旺盛时,菌丝体产生大量的分生孢子梗。分生孢子梗顶端膨大成为顶囊,一般呈球形。项囊表面长满一层或两层辐射状小梗(初生小梗与次生小梗)。最上层小梗瓶状,顶端着生成串的球形分生孢子。以上几部分结构合称为孢子穗。孢子呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色。这些都是菌种鉴定的依据。分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连。曲霉孢子穗的形态,包括分生孢子梗的长度、顶囊的形状、小梗着生是单轮还是双轮,分生孢子的形状、大小、表面结构及颜色等,都是菌种鉴定的依据。 曲霉属中的大多数仅发现了无性阶段,极少数可形成子囊孢子,故在真菌学中仍归于半知菌类。3、毛霉 毛霉(Mucor)又叫黑霉、长毛霉。接合菌亚门接合菌纲毛霉目毛霉科真菌中的一个大属。以孢囊孢子和接合孢子繁殖。菌丝无隔、多核、分枝状,在基物内外能广泛蔓延,无假根或匍匐菌丝。不产生定形菌落。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。各分枝顶端着生球形孢子囊,内有形状各异的囊轴,但无囊托。囊内产大量球形、椭圆形、壁薄、光滑的孢囊孢子。孢子成熟后孢子囊即破裂并释放孢子。有性生殖借异宗配合或同宗配合,形成一个接合孢子。某些种产生厚垣孢子。毛霉菌丝初期白色,后灰白色至黑色,这说明孢子囊大量成熟。毛霉在土壤、粪便、禾草及空气等环境中存在。在高温、高湿度以及通风不良的条件下生长良好。毛霉的用途很广,常出现在酒药中,能糖化淀粉并能生成少量乙醇,产生蛋白酶,有分解大豆蛋白的能力,我国多用来做豆腐乳、豆豉。许多毛霉能产生草酸、乳酸、琥珀酸及甘油等,有的毛霉能产生脂肪酶、果胶酶、凝乳酶等。常用的毛霉主要有鲁氏毛霉和总状毛霉。腐生,广泛分布于酒曲、植物残体、腐败有机物、动物粪便和土壤中。有重要工业应用,如利用其淀粉酶制曲、酿酒;利用其蛋白酶以酿制腐乳、豆豉等。代表种如总状毛霉(M. racemosus )、高大毛霉(M. mucedo)、鲁氏毛霉(M. rouxianus)等。4、根霉 根霉的菌丝无隔膜、有分枝和假根,营养菌丝体上产生匍匐枝,匍匐枝的节间形成特有的假根,从假根处向上丛生直立、不分枝的孢囊梗,顶端膨大形成圆形的孢子囊,囊内产生孢囊孢子。孢子囊内囊轴明显,球形或近球形,囊轴基部与梗相连处有囊托。根霉的孢子可以在固体培养基内保存,能长期保持生活力。根霉在自然界分布很广,用途广泛,其淀粉酶活性很强,是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉(即阿明诺法)生产酒精。根霉能生产延胡索酸、乳酸等有机酸,还能产生芳香性的酯类物质。根霉亦是转化甾族化合物的重要菌类。与生物技术关系密切的根霉主要有黑根霉、华根霉和米根霉。黑根霉也称匐枝根霉,分布广泛,常出现于生霉的食品上,瓜果蔬菜等在运输和贮藏中的腐烂及甘薯的软腐都与其有关。黑根霉(ATCC6227b)是目前发酵工业上常使用的微生物菌种。黑根霉的最适生长温度约为28,超过32不再生长。米根霉在分类上属于接合菌亚门(Zygomycota),接合菌纲(Zygomycetes),毛霉目(Mucorales),毛霉科(Mucoraceae),根霉属(Rhizopus)。菌落疏松或稠密,最初呈白色,后变为灰褐色或黑褐色。菌丝匍匐爬行,无色。假根发达,分枝呈指状或根状,呈褐色。抱囊梗直立或稍弯曲,24株成束,与假根对生,有时膨大或分枝,呈褐色,长2102500m,直径518m,囊轴呈球形或近球形或卵圆形,呈淡褐色,直径30200m囊托呈楔型。抱子囊呈球形或近球形,老后呈黑色,直径60250m抱囊抱子呈椭圆形、球形或其他形,呈黄灰色,直径58m有厚垣饱子,其形状、大小不一致,未见接合抱子。该菌于3740能生长5、青霉菌 青霉 blue mold 一般指青霉属(Penicillium)。为分布很广的半知菌纲中的一属,和曲霉属有亲缘关系,有二百几十种,代表种是灰绿青霉(Penicillium glaucum),从土壤或空气中很易分离,分枝成帚状的分生孢子从菌丝体伸向空中,各顶端的小梗产生链状的青绿褐色的分生孢子。根据分生孢子顶端的膨大与否,与曲霉属(AsPergillus)相区别。其语源来自其形状(帚状,Penicillus)。子囊壳为封闭型。该属菌产生一种特殊物质。自从弗莱明(AFleming,1929)发现特异青霉(Penicillium notatum)产生抑制细菌生长物质青霉素以来,已对该属菌的很多种进行了研究。特异青霉已被用于制造青霉素,但不具这种生产机能的种还很多,同时,其生产也并不限于青霉属。已知在生理学方面类似曲霉属,同时有很多能产生毒枝菌素(mycotoxin)。青霉菌属多细胞,营养菌丝体无色、淡色或具鲜明颜色。菌丝有横隔,分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙。基部无足细胞,顶端不形成膨大的顶囊,其分生孢子梗经过多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗,形如扫帚,称为帚状体。分生孢子球形、椭圆形或短柱形,光滑或粗糙,大部分生长时呈蓝绿色。有少数种产生闭囊壳,内形成子囊和子囊孢子,亦有少数菌种产生菌核。青霉的孢子耐热性较强,菌体繁殖温度较低,酒石酸、苹果酸、柠檬酸等饮料中常用的酸味剂又是它喜爱的碳源,因而常常引起这些制品的霉变。生活习性:青霉通常在柑桔及其他水果上,冷藏的干酪及被它们的孢子污染的其他食物上均可找到,其分生孢子在土壤内,空气中及腐烂的物质上到处存在.青霉营腐生生活,其营养来源极为广泛,是一类杂食性真菌,可生长在任何含有机物的基质上.形态:青霉的营养体为无色或淡色的菌丝体,菌丝各细胞之间有横隔膜,细胞内通常为多核.整个菌丝体分为伸入营养基质中吸取营养的基质菌丝和伸向空气中的气生菌丝.在气生菌丝上产生简单的长而直立的分生孢子梗,顶端以特殊的对称或不对称的扫帚状的方式分支,称为帚状枝.分支为多极的分生孢子梗最后产生许多瓶梗,在瓶梗上着生分生孢子链.分生孢子为球形至卵形,呈绿色,蓝色或黄色,即通常看到的各种青霉菌落特有的颜色.生活史:自然界中已发现的青霉绝大多数以无性繁殖的方式繁衍后代,即分生孢子萌发为菌丝体,在气生菌丝上产生分生孢子梗,在分生孢子梗上串生许多分生孢子,分生孢于在适宜环境中又萌发为菌丝体,以此循环反复. 青霉中有极少数种类行有性生殖.其过程为:从营养菌丝上产生雄器和产囊体雄器顶端与产囊体接触处细胞壁溶解质配核配减数分裂后(一般推测)形成子囊.在此过程中,由产囊体周围营养菌丝逐步包围形成子囊果.当子囊孢子成熟后被释放,在适宜环境中萌发形成新的菌丝体.但不同种青霉其性行为变异很大.有些种雄器似乎没有功能,在原生质体互相接触后,没有发生核的迁移,产囊体内成对的核起源于原来产囊体的核.分类:青霉属于曲霉科(Eurotiaceae).青霉和曲霉都为常见属,二者的主要鉴别特征是孢子梗的排列不同.曲霉的孢子梗是辐射状排列,呈头状. 青霉与人类生活息息相关.少数种类能引起人和动物的疾病;许多种青霉能造成柑桔,苹果,梨等水果的腐烂;对工业产品,食品,衣物也造成危害;在生物实验室中,它也是一种常见的污染菌.加强通风,降低温度,减少空气相对湿度,可以大大减轻青霉的危害. 但在另一方面,青霉对人类非常重要,在工业上,它可用于生产柠檬酸,延胡索酸,葡萄糖酸等有机酸和酶制剂;非常名贵的娄克馥干酪,丹麦青干酪都是用青霉酿制而成的;最著名的抗生素青霉素就是从青霉的某些品系中提取而来,它是最早发现,最先提纯,临床上应用最早的抗生素;近期发现的另一重要抗生素灰黄霉素,是由灰黄青霉产生的,是抑制诸如脚癣之类的真菌性皮肤病的最好抗生素.农冠5号淡紫拟青霉本品系引进经台湾高科技生物技术研制开发而成的菌种。淡紫拟青霉属于内寄生性真菌,是一些植物寄生线虫的重要天敌,能够寄生于卵,也能侵染幼虫和雌虫,可明显减轻多种作物根结线虫、胞囊线虫、茎线虫等植物线虫病的危害。 淡紫拟青霉菌剂是新型纯微生物活孢子制剂,具有高效、广谱、长效、安全、无污染、无残留等特点,可明显刺激作物生长。试验证明,在植物根系周围施用淡紫拟青霉菌剂不仅能明显抑制线虫侵染,而且能促进植物根系及植株营养器官的生长,如播前拌种,定植时穴施,对种子的萌发与幼苗生长具有促进作用,可实现苗全、苗绿、苗壮,一般可使作物增产15以上。【适用范围】大豆、番茄、烟草、黄瓜、西瓜、茄子、姜等作物根结线虫、胞囊线虫。【成 分】淡紫拟青霉活体孢子【性 状】粉剂【含 量】活菌总数1.0*1010cfu/g【用法用量】作物防治对象使用时期使用量使用方法烟草根结线虫袋苗期(分苗期)50g/亩与营养土混匀装袋移栽期50-100g/亩移栽时与农家肥混匀施入穴中蔬菜及其他作物根结线虫、孢囊线虫育苗期50g/亩与营养土混匀处理苗床或者拌种移栽期50-100g/亩与农家肥混匀施入穴中定植期或追肥期100-200g/亩与少量腐熟农家肥混匀施于作物根部,也可拌土单独施于作物根部【产品功效】1、促进植物生长:在拟青霉的培养过程中,特别是在特殊培养基与深层发酵培养过程中,该菌能产生丰富的衍生物,其一是类似吲哚乙酸产物,它最显著的生理功效是低浓度时促进植物根系与植株的生长,因此在植物根系施菌不仅能明显抑制线虫侵染,而且能促进植株营养器官的生长,同时对种子的萌发与生长也有促进作用。2、产生多种功能酶:此菌能产生丰富的几丁质酶,几丁质酶对几丁质有降解作用,它能促进线虫卵的孵化,提高拟青霉菌对线虫的寄生率,此外还能产生细胞裂解酶、葡聚糖酶与丝蛋白酶。研究表明:在高效菌株中蛋白酶和葡聚糖酶、淀粉酶活性高出1.24.2倍和20120倍,这些酶促进细胞分裂。3、降解效应:淡紫拟青霉能促进难溶磷酸盐的溶解,实验室研究证实:拟青霉菌的增溶效果达到30%,其它线虫拮抗菌达到20%40%。同类研究还表明,拟青霉还能促进许多化学聚合物(如农药,制革废水等)的分解,这证明淡紫拟青霉具有一定的环保效应。4、对植物病原线虫: 是一种有潜力的生防真菌,在寄生线虫卵的过程中起重要作用,同时与杀线虫物质几丁质和几丁质酶相联系。对昆虫: 可寄生半翅目的荔枝蝽蟓、稻黑蝽;同翅目的叶蝉、褐飞虱;等翅目的白蚁;鞘翅目的甘薯象鼻虫以及鳞翅目的茶蚕、灯蛾等。对植物病原菌:对玉米小斑病、小麦赤霉病、黄瓜炭疽病菌、棉花枯萎病和水稻恶苗病等具有拮抗效能。6、木霉菌属木霉属(Trichoderma)分类地位:是真菌门、半知菌亚门、丝孢纲、丛梗孢目的一属。形态特征:其有性阶段称为肉座菌属(Hypocrea)。菌丝透明有隔,分枝丰茂,分生孢子梗有对生或互生分枝,分枝上可再分枝,分枝顶端为小梗,瓶状,束生、对生、互生或单生,由小梗生出分生孢子,多个分生孢子粘聚成球形的孢子头。气生菌丝的短侧枝成为分生孢子梗,其上长出对生或互生分枝,并可再长出二级、三级分枝,分枝上又束生、对生、互生或单生瓶状小梗,其末端产生近球形、椭圆形、圆筒形成倒卵形的分生孢子。分生孢子以黏液聚成球形或近球形的孢子头。菌落伸展迅速,呈棉絮状或致密丛束状,一般绿色,菌落表面常呈同心轮纹状。一般腐生。分布种类:广泛分布于自然界,在腐木、种籽、植物残体、有机肥、土壤和空气中尤多。也可寄生并危害多孔菌和伞菌等大型真菌。主要种类有绿色木霉(T. viride)和康氏木霉(T.koningi)等。经济价值:是纤维素酶的重要生产菌,也是木材和有关工业产品的破坏者。木霉能生产纤维素酶,合成核黄素,生产抗生素,转化甾族化合物。木霉也常寄生于某些真菌的子实体上,因此是栽培蘑菇的劲敌。绿色木霉菌剂(生物农药类)本品系引进经台湾高科技生物技术研制开发而成的菌种。木霉菌剂通过产生抗生素、营养竞争、微寄生、细胞壁分解酵
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