肾脏病患者外周血淋巴细胞上甲状旁腺素受体的表达_陈靖.pdf

Chi n J N eP ll r ol 块 e时b er 1998 V61 14No 6 肾脏病患者外周血淋巴细胞上甲状旁腺素受体的表达 陈靖张健 朱蔚枉林善谈 目的 探讨人外周血淋巴细胞上有无甲状旁腺素 P TH 受体表达及其在 肾脏疾病不 同阶段的改变 方法 应用R T PCR方法观察各组患者淋巴细胞和肾脏 组织 中PTH受体 n 1R N A 表达 结果人淋巴细胞上可检出 P T H受体基因表达 在慢性肾炎肾功能代偿期和尿 毒症患者 中均有不 同程度下调 与 肾功能损害密切相关 且与同 组患 者肾脏组织中 P T H受体的改变相一致 结论肾功能减退 时 患 者淋巴细胞上 P T H受体显著下调 关键词肾脏病甲状旁腺素受体淋巴细胞 C沁讹 exPp 巴粥io n o f Fl H月刀降卜 P po t ri n ly m h P伙尹e s o f a P tie ns t i wh t e ra nli d h Ce ni j g 乃a 烤Ji a h Z u Wi勿 e t al 及 了 加r t t o fV e 1 P丙阳Z哪烈 月白 在h s an o H Pia tl h S a 动ai 左阪才友二I U i y t h S a h g I ai 20 0040 0权ie ctiv e O T in v e s ti郎te h w eth e r the pa a r thyr oid h o m o r e n P l H e c r 印to r 15e xp r哪氏l in l pi h犯y te s a n dits eha nge s in p atie n ts 俪 th v抓o us deg ree s o f e r n a lim琳im re n t M七th叹比七 R e lativ ely q u a n titative R T P C R m e ti h刀5 w a s u掀1o t dete c t P T H e c r 印o t r n识N A lev elsinl卿phxyte s a n d re na l sp e cim e s n Re s ults Th elv ee l s o f P T H e c e r pto r n识N A dete c te d inl界 11pho c y t e s r e d u e司51 助ific a n tlyin a l lpatie n ts 侧 th e l川笼li Cg lo n l e u rl o n eph r itis a n d u e m r ia whieh w a s 印汀 elat司 诚 ththe exte n t o f e n a r lin s uf fieie n ey T he s a m e te n de ney w a s a l劝比sey r司in r曰l a l tis s u e s C onc lu sio n Th e P气 H c r e 印t o r o flyn lpllc o yte s 15do期1 re g 卫latd e inp atie nts 诚th r e n a ldisa e s e 旋yw od r s R exl 赶d d i Pa r athy roid h i lo n e c r e e Pt o r L y m pl议y te s 甲状旁腺素 P T H 是机体调 节钙磷代谢的 主要激素 新近研究表明 P T H同 时还作为一 种 重要 的致病因素 参与了肾脏疾病的慢性进 展 P T H 特 异性受 体 P l H吓叮Hr Pr e c e P to r P T H R 除了在肾脏 骨 骼这些经 典的靶器官 高表达外 还广泛分布于机体的其它部位 肾脏损害时 血中过高的 P TH可通 过增加细胞 内钙离子浓度 导致多脏器功能异常 引起尿毒 症各种临床表 现z 其中免疫系统功能障碍 在慢性肾功能衰竭患者中非常常见 很多实验 提示淋巴细胞上 可能存在 P TH 一 R闭 为此 我 们采用逆转录 一聚 合酶链反应 RT 一P CR 检测淋 巴细胞上是否存在P T H R基因表达及其在肾 功能不全各个阶段的改变 材料和方法 卫生部基金 96 一2一 1 27 和美国纽约中华医学基金赞助课题 作者单位 20 刃40 上海医科大学华山医院肾病科 一 患者分组 3 0例非糖尿病住院患者 男 19例 女11例 年龄 22一 6 5岁 平均 40岁 分成 1 对照组 NC 1 0例 均为肾功能正 常 泌尿 道手术患者 取其正常肾组 织作为对 照 2 慢性 肾炎组 GN 1 2例 均处于慢性 肾 功能不全代偿期 GF R 50mlm in 3 尿毒 症组 C R F 8例 为每周二次常规碳酸盐 透析 患者 临床资料详见附表 研究前两个月所有 患者停用钙剂 磷结 合剂和 活性维生素 D 制 剂 二 血尿生化检查 血钙 磷 肌醉 碱性磷 酸酶 A K P 及尿肌配的测定按常规生化方法在 日立 7 17 0A分析仪上完成 采用美国 D P C 公司生产的全段 P T H inta c t P T H 放免试剂盒 测定血浆 P TH水平 三 外周血淋巴细胞及 肾脏标本制备受 间有 明显负相关性 r 分 别为 一 0 157 和 一 0 53 3 尸 均 0 0 1 但与内生肌醉清除率 的 正 相关性更显 著 r 分别 为 0 84 4 和 0 861 P 均 0 001 讨论 近年来 人们应用 N o r t h em 杂交等分子生 物学手段先后在 SD 大 鼠肾脏 骨 骼 和肝 心 肺 脾 胃 脑 回肠 乳腺 肾上 腺 攀丸 卵巢 胎盘 子宫 膀胧 皮肤 骨骼肌 平滑 肌等许多 部位证实有 PqH 受体 表达 但 未提 及外周 血细胞 然而很多研究发现PTH可影响外周 淋巴细胞的增 殖和 生理功 能 细 胞学和免疫学 等方法也曾提示在淋巴细胞上 可 能存在 P TH 特异性受体阎 我们应 用 R T p c R 方法 首 次 证实在外周血淋巴细胞上确实存在 Pq H受体 其基因组成可能与肾脏中 P rH 受体相一致 尿毒症时 1月 H受体显著下 调已在肾脏 骨 骼 心脏 肝脏等多个脏器中得到证实0 7 本 实验室新近研究还 发现早 在肾脏病变初期 患 者肾脏 P TH 受体已经 下调 且随 肾功 能损害进 展而加重 这在本实验中再次 得 到验证 且 外周 血 淋巴细胞上 PTH 受体的改 变也存在 同 样的趋势 提示肾功能减退时 PTH受体下调是 一普遍现象 外周血淋巴细胞上 P l H 受体基 因表达可反映肾脏等经典靶器官的改变 这就 为临床观察提供了一 个非常有用 的靶 点 因为 外周血的采集毕竟较其它实质性组织容易 肾功能不全时 P T H受体下 调 一方面 可保 护靶细胞免受 PTH 持续升高所造成的细胞内 钙中毒 另 一方面又 可导致靶器官对P T H反应 低下 加重钙鳞代谢紊乱和 继发性 甲状旁腺机 能亢进川 我们的研究发现 尽管低钙高磷血 症仅出现于尿毒症患者 但血浆 AK P和全段 P T H水平在肾功能不全代偿期的肾炎患者 中 已经显著升高 到达尿毒症期时 血浆Pr H进 一步上升至 正常值上 限 的 3 5倍 强烈提示 甲 旁亢 由于糖尿病肾脏患者多表现为低转化骨 病 故 我们 均选 择 非糖尿病患 者作 为观察 对 象 且肾脏和淋巴细胞上 P任 H Rm R NA水平 和血浆全段PTH之间存在 明显 的负相关性 因此 l y l H受体下调 可能参与了慢性肾功能衰 竭继发性甲旁亢 的早期形成 引起 Pq H 受体下 调 的确切 机制目前尚不 清楚 尽管 PTH过度升 高可通 过 同源降敏 作 用使其受体下调 但研究发现 甲状旁腺切除并 不能纠正CR F大 鼠肾脏P l H受体合成的低 下 8 我们的结果也证实 盯 H R基因表达与 内生肌配 清除率 即肾功能损害程度正 相关 晚 近研究表明 局部组 织 中细胞内钙浓 度升高 是造成 P T H受体下 调的重 要因素 应用 钙通道 阻滞剂可 显著改善上述异 常陈 7 而 细胞内钙 升高往往是众多肾脏疾病的早期改变 且随肾 功能 减退而 加 重 尿毒症 时 许多 组 织 均 表 现 为细胞内钙离子 浓 度异常升高 外周血淋巴细 胞 T细胞和 B细胞 也不例外 且伴有 细 胞 功 能障碍 如细胞因子 产生 减少 免疫球蛋白分泌 低下 和增 殖缓 慢 硝苯地平治疗可使其显著逆 转0 因 此 淋巴细胞上 P T H 受体下 调 也 可 能与细胞内钙升高有关 参考 文献 U rea n P Kc g n X F S a nr a ABA e ta l Pa r ah t ymi d h o n e PT H 刀尸r H relate d peptide sr e e ept or m es sel唱e r h场n u eleie a eid s a r e wid elydist ribute d inr a ttis sue s E rlc o c 石n ol gy 1993 133 617 一 622 M as s汀 SG Sn l呢 二ewski M M eella n is r n s th 飞 gh whieh Pa r atllyo ridh o n e m edi a tes itsdelete rio u seff eets o n o馆a n f u netion in u r ell lia S知in inN ePll z飞 1 1994 14 219一 230 Y a ma x o n o tl R丈t s JT e S gre SV Cir e ulating 肠 vine l I lph o c y t e sc o ntain e r e eptos r o f rp a a r thyroid h o e JClin 1l l v e st 1983 71 404一409 h Ce n J Zh阴gJ i L n S Y 肠 一r e g u a l to l n o f P T HF 叮H rP c r e ePo tr in th e kidn即 ofpatien ts with rea n lim洋ir me n t Chin M司 J 1998 1 1 1 24一27 Y u Z Y Z出 I毛了 Clle x1 S S et 习 Tlle es t a blisl lnlentof qt a ntita tiv e R T Rm etll团 o f r m a e s u irg n ey tokin es gen e ex Pr e s s o l n inPBMC of herl l 心ial邓15Patie nt s JN ep 试 1Dia l T r田资Pla nt 1996 5 90 一 93 Sn 即 r z e w si k M Tia nJ Ma s s诊5 地们 一r g e l latio nof P T H PTH r P c r e epo tr o fh e a r t inC R F o rle of 以 1 Ki山哪 In t 1995 47 1 182一 1187 i T a n J Sn l叱扣二 i k M Kd e d eL e ta l P T H P T H rP 中华肾脏病杂志 199 8 年21月第 14 卷第 6 期 363 re e e Pot zrl 识 NAi s d 铂l re 即 I a t de i ne l ri olllre ane aflil ure 八胡 J N e p h拍1 1994 14 4 1 一46 Ur e a n P Ma n n s ta dt M 1七 uby M et a l Pa r ath尹oidecto lny do e s o n t r Pv ee n tth e re n a l P T H寿y TH rPrc e e Po t r dow n gula tio nin u r emiera t s Kid n ey In t 1995 47 1797一1803 Ale xiew iezJM Sn x 即几e w s kiM Akn l a1M et a l Nid f eipin e rv e e r s e stheabo n r m a litie sin a 2 C 1a d n polif ea r ti on f B eells 王 o rmdia ly sis pa tie nts Kid n即Int 1996 50 1249一 1254 收稿 1998 一04一20 修回 1998 一 10 一 10 本文编辑 李耀荣 以 F ancon i 综合征为主要表现的特发性间质性 肾炎一例报道 李航黄利伟李学旺 患者女 2 3 岁 汉族 北京籍 因纳差 恶心 乏力 明显 至我院门诊查 尿蛋白 尿 糖 尿氨 基酸 十 尿 pH7 一 9 尿沉 渣镜检 R BCO 一 2 H P Wl艾二0 一 lI 习 尿S L SP A E 中小 分子蛋白 血 气分析 代谢性 酸 中 毒 失代偿 pH 7 33 0 P处 4 s ka P H 工毛 一 18 5 lL S BE 一 6 3 n m o r lL 血 生化 K 3 s m n o r lL N a 135 s n n l o r l几 CI 108 7n m o rlL C r 140 8拼11 101L BIJN72 8 rl拍飞 0 1L AUT 10U几 空腹血糖4 3 3 1几 拟诊1 1 1 i综 合征 为进一步诊治 收人院 既 往无尿频 尿急 无浮 肿 肉眼血尿 否认有反复 口腔 溃疡 关节痛 光过 敏 史 无 口干 眼 干 否认家族 遗 传病 史 父母尿检均正 常 否认近期用药史 人院查体 B P 16 10 6ka P 体 形消瘦 左眼球结膜轻度充血 余无阳性体征发 现 人 院后化验 尿民 微球蛋白7 l l n g r 几 2 4 小时尿蛋 白定 量0 89 24小时尿钙2 48 l 磷 1 7 2m nl ol 滤过碳 酸氢根排泄分数FE HCq 一 2 7 1 碳酸氢盐 负荷试验 U召P以见4 3k P a 8小时禁 水 后血 渗透 浓 度27 8 l L 尿 渗透浓度 3 0 0 l L 自 由 水清 除率 一42 42mlh 血 蛋 白 电 泳 l Ab 5 5 29 al 2 89 a 29 7 5 队1 7 8 推0 29 免 疫指标 ANA 一 ds DN A 一 EN A 一 R F 一 A N CA 一 清洁 中段尿 培养无 菌生长 双肾B超 左 肾1 1 7 cm X 4 s cm X 4 7 cm 右肾1 0 c om x 3 s c n r x 3 4m r 肾 血流图 双 肾血流灌注正常 双 肾小球滤过功能略有降低 双 肾集 合系统引流欠通 畅 G f R6 6 7司m i n 排空 的膀胧 尿 路造影未见尿液反流 眼科检查 左眼虹膜睫 状体炎 点状角膜炎 右眼正常 双眼底检查正常 视力双眼均 为1 5 肾活检病理 间质可见大片以单核细胞 为主的 炎性细胞侵润 个别小血管壁 增厚 炎性细胞侵润 肾 小管浊肿 可见小灶 性T BM 增厚 及萎 缩 未见间质纤 维化 肾小球轻度系膜增生 眼部予0 5 可地松眼药 水 治疗 约 一周后 眼部症 状消 失 肾穿后给 予 作者单位 1007 30 中国 医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院 N a H C0 31 克 每日三次 强 的松3 0mg 日治疗 出院于 我院门诊随诊 一月后复 诊纳差 恶心症状 消 失 复 查血气示正常 尿 蛋白 一 尿糖 一 C r 及BUN均正 常 门诊随诊一年上述指标仍维持正常 讨论 特发性急性间质性 肾炎是一种急性 间质性 肾炎同时并发眼色素膜炎为特征 而无 特异性的 病因 可寻 的 间质 性肾炎 青 年女性多见 发 病前常无感 染 无 系统性疾病 及药物过敏反应史 约l乃 患者有 眼色素膜炎 多于肾受