脑忆清胶囊对老年小鼠和拟痴呆大鼠记忆功能的影响.doc

脑忆清胶囊对老年小鼠和拟痴呆大鼠记忆功能的影响脑忆清胶囊对老年小鼠和拟痴呆大鼠记忆功能的影响更新日期：2009-11-23 点击： 黄世福梁启勇陈勤夏宗勤 摘要：选用老年小鼠和 A1C13溶液制备的拟痴呆大鼠动物模型(DMR )，研究脑忆清胶囊(NYQ)对实验动物记忆功能的影响及其作用机理。结果表明，DMR 大脑 皮层组织(Cer)中胆碱酯酶(AchE)活性比正常大鼠提高(P0.01)，而老年小鼠 Cer 中 M-受体Rt值比正常青年小鼠降低(P HT5”K0.01)，NYQ 可显著降低实验动物 Cer 中 AchE 活性(P 0.050.01)，增加M-受体Rt值(P0.050.01)。提示 NYQ 可通过降低实验动物Cer中AchE活性，增加M-受体Rt值而明显提高记忆能力，对老年痴呆有一定的治疗作用。 关键词：脑忆清胶囊/药理学；记忆/药物作用；胆碱酯酶类/分析；受体，胆碱能/分析； 痴呆，老年性/中药疗法 中图分类号：R285.5；R338.64文献标识码：A文章编号：1003-9783(1999)03-0153-03 脑忆清胶囊系根据明代古方改剂型而研制的中药新制剂。具有补肾益精、养心安神、健脑益智的功效。临床多用于主治中老年人记忆力减退、失眠、多梦以及神经衰弱、小儿智力发育不全等症。我们利用老年小鼠和模拟老年痴呆的病理模型大鼠来研究NYQ对实验动物胆碱能神经系统的影响，以探讨其延缓脑功能衰老和促进记忆的机理。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1药物与试剂脑忆清胶囊为本所自制，由制首乌、熟地、枸杞子、酸枣仁、柏子仁、石菖蒲、茯神、山药等药味组成，批号：961015。脑复康片由合肥制药厂生产，批号：960422。柳酸毒扁豆碱、乙酰硫代胆碱(AThch)、5，5-联硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(DTNB)，均由上海化学试剂采购供应站提供，进口分装。谷胱甘肽，由上海化学试剂分装厂提供，批号：950810。3H-QNB，英国Amersharm产品，比活度1.5TBq(42Ci).mmo1-1。其他均为分析纯试剂。 1.1.2动物及分组Wistar大鼠(180220g)，老年小鼠(24月龄)，青年小鼠(4月龄)，均由安徽医科大学动物实验中心提供。大鼠60只，雌雄各半，随机分为6组：即正常组、痴呆模型组、模型加脑复康组、模型加NYQ小、中、大剂量组，除正常组外，其余每鼠投以AlCl320mg.d-1，共饲养90d，给药及剂量见表1。老年小鼠50只，随机分5组，即老年组、脑复康组、NYQ小、中、大剂量组，另设青年对照组10只，给药90d，给药及剂量见表2。 表1NYQ对痴呆大鼠记忆能力的影响(s) 组别 剂量 /(g.kg-1) 潜伏期/s 5min错误 百分率/% 正常组 N.S 221.50114.57 30 模型组 N.S 100.6396.72 80 脑复康组 0.15 210.69122.79* 40 NYQ小剂量组 0.88 236.40108.50* 30 NYQ中剂量组 1.75 256.8080.87* 40 NYQ大剂量组 3.50 227.69118.88* 30 注：与正常组比较，P0.01；与模型组比较，*P0.01；N=10。 表2NYQ对拟痴呆大鼠脑AchE的影响(s) 组别 剂量/(g.kg-1) 每克脑组织AchE 含量/g 正常组 N.S 107.6313.82 模型组 N.S 127.6310.14 脑复康组 0.15 115.209.92* NYQ小剂量组 0.88 117.4915.03* NYQ中剂量组 1.75 113.1811.52* NYQ大剂量组 3.50 114.1710.22* 注：与正常组比较，P0.001；与模型组比较，*P0.05，*P0.01；N=10。 1.2方法 1.2.1大鼠记忆能力检测采用跳台法1略加改进。实验装置为303030cm的反射箱，箱底铺以铜栅，通50V电流，箱内放一高达10cm的绝缘跳台。非条件刺激为足底受电法。训练时，电击10s，间歇20s，直至大鼠跳上跳台为止。记录5min内的触电次数及从电击区跳到跳台安全区后第一次重新触电的潜伏期(大于5min按5min计)和5min错误百分率。第1天训练，让每只大鼠均遭电击然后跳上跳台一次，第2天测验。 1.2.2大鼠脑胆碱酯酶的测定2将大鼠断头，冰台上分离出脑组织，精密称取约100mgCer,加0.1mol.L-1pH7.4PBS10mL匀浆。再取脑匀浆0.2mL(对照管加0.1%柳酸毒?扁?豆?碱1滴)，再加0.1mol.L-1pH7.4PBS1.3mL,37水浴5min，加入2.5mmol.L-1ATHch0.5mL，继续水浴15min，反应结束后测定管加0.1%柳酸毒扁豆碱1滴。取出加1.5mol.L-1DTNB0.5mL，混匀，4000r.min-1离心15min，取上清液，在412nm波长处测光密度。标准曲线用不同浓度的谷胱甘肽液加入DTNB制成。 1.2.3小鼠记忆能力检测采用跳台法和避暗法，分别记录每组动物5min内的错误次数及潜伏期，详见文献3。 1.2.4M受体测定4先将小鼠断头，迅速取出大脑，冰浴上制备脑膜受体蛋白标本。再根据3H-QNB与脑膜蛋白结合的特性，使用单点法，完成放射配基结合反应系统。采用微量Lowry法，测量蛋白质浓度。然后根据配基的比活度和复合物的放射性求得受体结合点数，单点法Rt值计算如下： 2结果 2.1对拟痴呆大鼠记忆能力的影响从一次被动回避试验结果看，模型组动物潜伏期比正常组缩短(P0.01)，而且错误百分率也比正常组高出50%，说明大鼠投以AlCl390d后已造成实验性痴呆模型。脑复康及NYQ各剂量组大鼠的潜伏期比模型组明显延长(P0.01)，而且5min内的错误百分率亦比模型组低得多，提示脑复康和NYQ各剂量组对实验性痴呆模型有一定的治疗作用，均可改善大鼠的学习记忆功能，基本上达到正常组水平。见表1。 2.2对实验性痴呆大鼠AchE活性的影响测定各组动物Cer中AchE含量，结果表明：模型组与正常组比较有极显著性差异(P0.001)，说明投以AlCl3已造成大鼠脑AchE的含量升高，进而造成实验性痴呆模型，与其学习记忆功能低下相一致。脑复康及NYQ各剂量组与模型组相比较，有非常显著性差异(P0.050.01)，提示脑复康与NYQ各剂量均能够对抗大鼠因长期服用AlCl3所引起的脑AchE的升高，二者具有同等的药理作用，说明NYQ对实验性痴呆模型大鼠具有一定的治疗作用。见