苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定.doc

华南师范大学实验报告专 业： 材料化学 年 级：2008级课程名字：近代材料分析测试技术 实验项目：紫外光谱分析实验类型： 验证 实验时间：2011年4月22日实验四：苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定一、目的要求1、了解紫外可见分光光度计的基本原理；2、掌握紫外可见分光光度计的基本操作；3、紫外可见吸收光谱的绘制和定量测定方法。二、基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。根据Lambert-Beer定律：A=bc，（A为吸光度，为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度）可以对溶液进行定量分析。在紫外可见吸收分光光度分析中，必须注意溶液的pH值的影响。因为溶液的pH值不但有可能影响被测物吸光强度，甚至还可能影响被测物的峰位形状和位置。酚类化合物就有这一现象，例如苯酚在溶液中存在如下电离平衡：苯酚在紫外区有三个吸收峰，在酸性或中性溶液中，max为196.3nm，210.4nm和269.8nm;在碱性溶液中max位移至207.1nm，234.8nm和286.9nm。下图为0.021g/L的苯酚分别在0.010mol/L 盐酸溶液与氢氧化钠溶液中的紫外吸收光谱。由图知在盐酸溶液与氢氧化钠溶液中，苯酚的紫外吸收光谱有很大差别，所以在用紫外可见吸收分光光度分析苯酚时应加缓冲溶液，本实验是通过加氢氧化钠强碱溶液来控制溶液pH值的。三、仪器和试剂1、仪器：（1）紫外可见分光光度计（2）1.00cm石英比色池；2、试剂：（1）苯酚标准溶液: 10%；（2）0.25mol/L NaOH。四、实验内容1、配置系列标准溶液：准确移取0.1mg/mL的苯酚标准溶液0.00（1号）、2.00（2号）、4.00（3号）、6.00（4号）、8.00（5号）、10.00mL（6号）分别置于50 ml容量瓶中，各加10滴10%的NaOH溶液，并用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。2、绘制吸收曲线及标准工作曲线：用1cm石英比色皿，以NaOH空白溶液为参比，在200300nm范围内，测量系列标准溶液中的3号（或4号）的吸光度A，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长max。以1cm石英比色皿，以NaOH空白溶液为参比，在选定的最大吸收波长下分别测定标准系列样品的吸光度，绘制标准工作曲线.3、测定未知溶液：取未知夜10.00mL置于50.00mL容量瓶中，加10滴10%的NaOH溶液，用蒸馏水稀释至刻度；以NaOH空白溶液为参比，用1cm的比色皿在最大吸收波长处测定吸光度A。4、计算未知溶液的含量（mg.mL-1）。五、实验报告及要求1、绘制苯酚碱性溶液的标准工作曲线；由实验侧得紫外吸收光谱中波长最大（287.0nm）的吸收峰情况如下：序号苯酚体积mL吸光强度稀释后浓度mg.mL-110.0000.00022.000.10680.00434.000.21530.00846.000.33420.01258.000.44560.016610.000.55380.020710.00（未知浓度）0.0259绘制得标准工作曲线如下图2、计算未知样中苯酚的浓度；由苯酚碱性溶液的标准工作曲线计算得到的吸光度-浓度函数关系函数为:A = 28.108c - 0.0061 (A为吸光度， c为溶液浓度)则可求出未知样品中苯酚稀释后浓度c1=(A+0.0061)/ 28.108=0.0011 mg.mL-1则未知样品中苯酚稀释前浓度c2=c1* V1/V2 = 0.0011*50/10=0.0055 mg.mL-13、求出苯酚在碱性溶液中波长最大吸收峰的摩尔吸光系数；根据Lambert-Beer定律：A=bc，则=A /(bc) 已知液池厚度b=1cm序号苯酚浓度c/mg.mL-1吸光强度摩尔吸光系数/cm2mg-120.0040.106826.7030.0080.215326.9140.0120.334227.8550.0160.445627.8560.0200.553827.69平均摩尔吸光系数/cm2 mg-127.40六、思考题1、实验中为什么加NaOH?答：因为在紫外可见吸收分光光度分析中，溶液的pH值有可能因与被测物发生反应，产生电离平衡，从而影响被测物吸光强度，甚至还可能影响被测物的峰位形状和位置。实验中为什么加NaOH，是为了控制溶液pH值的。使苯酚在紫外区有三个吸收峰max位移至207.1nm，234.8nm和286.9nm。2、本实验是采用紫外吸收光谱中波长最大的吸收峰下进行测定的，是否可以在另外两个吸收峰下进行定量测定，为什么？答：因为本实验光谱中波长最大的吸收峰是苯酚中苯环发生*跃迁的B吸收带，在实验中，被测物的苯环只与