基因工程填空背诵.doc

基因工程填空背诵1 基因工程的概念：基因工程是在DNA分子水平上进行操作,因此又叫做重组DNA技术。2 基因工程的基本工具：限制酶、DNA连接酶、运载体3 限制酶来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。4 限制酶的功能：识别特定的核苷酸序列，并在特定位点切割磷酸二酯键。5 限制酶切割的结果：黏性末端和平末端。 6 DNA连接酶功能：恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。7 DNA聚合酶的作用部位是磷酸二酯键。8 运载体具备的条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入；具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 9 基因工程常用的载体有： 质粒 、 噬菌体 和 动、植物病毒 等。10 最早应用的载体是质粒，它是细菌细胞中的一种很小的双链环状DNA分子。11基因的基本操作程序：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。12 基因工程的核心是：基因表达载体的构建。13 获取目的基因的方法是从自然界中已有的物种中分离出来，如可从基因文库中获取。人工合成法：逆转录法和化学合成法。PCR扩增14 取原核细胞的目的基因方法一般是：直接分离法。15 获取真核细胞的目的基因一般是人工合成法。16 PCR是聚合酶链式反应的缩写，是一种在生物体外复制特定DNA片断的核酸合成技术。17 PCR原理是：DNA双连复制的原理。前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列。18 PCR条件：模板、ATP、酶、原料（四种游离的脱氧核苷酸）19 PCR酶：热稳定DNA聚合酶 （耐高温DNA聚合酶）20 即基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因21标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。22 基因表达载体构建方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接形成重组质粒。23 将目的基因导入植物细胞：最常用方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法。24 农杆菌转化法原理： 农杆菌能感染双子叶植物和裸子植物. 农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上。25 将目的基因导入动物细胞：显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。26 选受精卵做受体的原因：具有发育的全能性27 将目的基因导入微生物细胞：Ca处理法 。28 选用微生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少29 将目的基因导入水稻（单子叶植物）方法是：基因枪法或花粉管通道法30 目的基因检测与鉴定首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。31 其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交技术。32 最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原抗体杂交技术。33 4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如抗虫或抗病的接种实验等。34 目的基因成功表达的标志：受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质（具体题目写出具体的蛋白质）。35 从结构上分析，为什么不同生物的DNA能够连接在一起？具有共同的DNA双螺旋结构同种限制酶切割后形成的粘性末端相同（或粘性末端可以碱基互补配对）36 目的基因能在受体细胞中表达的原因？不同的生物共用一套遗传密码37 从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构（核心步骤）推测应有的氨基酸序列找出相对应的脱氧核苷酸序列（基因） 合成基因利用基因工程表达蛋白质38 植物细胞工程包括什么技术：植物组织培养 、 植物体细胞杂交 。39 动物细胞工程包括哪些技术： 动物细胞培养、 动物细胞核移植 、 动物细胞融合 、 单克隆抗体制备 。42 植物细胞工程的理论基础（原理）：细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵生殖细胞干细胞体细胞；植物细胞动物细胞43 植物组织培养技术过程：离体的植物器官、组织或细胞 （脱分化）愈伤组织 (再分化)胚状体或丛芽 试管苗 植物体44 植物体细胞杂交技术过程：45植物体细胞杂交中用到的酶是：纤维素酶和果胶酶。46 植物体细胞杂交诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。47 物体细胞杂交的意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。48 植物组织培养技术：该技术的核心： 脱分化和再分化 （08山东理综）49 动物细胞培养流程：取动物组织块剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。50 细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。51 无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。温度和pH ：适宜温度36.50.5；pH：7.27.4。 气体环境：95%空气5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。52 克隆动物（如右图）应用了哪些现代生物技术：动物细胞核移植、动物细胞培养、早期胚胎培养、核移植技术。53 为什么选择去核的卵母细胞：体积大，易操作营养物质丰富卵母细胞含有表达全能性的物质条件54 动物细胞融合诱导方法：聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激55 意义：克服了远缘杂交的不亲和性，56 单克隆抗体制备筛选杂交瘤细胞筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞体外培养注射到小鼠的腹腔B-BB-瘤瘤-瘤B瘤细胞融合抗原注入小鼠体内B淋巴细胞骨髓瘤细胞灭活病毒57 两次筛选的目的是：第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出所需抗体的杂交瘤细胞58 杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。59 单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。60 单克隆抗体的作用：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”。61技术原理植物组织培养植物细胞的全能性植物体细胞杂交细胞膜的流动性；植物细胞的全能性动物细胞培养细胞增殖动物细胞融合细胞膜的流动性核移植技术动物细胞核的全能性62 愈伤组织的特点：其细胞排列 疏松而无规则 ，是一种高度 液泡化 的呈无定形状态的 薄壁细胞63 受精标志：第二极体的形成；64 受精完成标志是雌雄原核融合成合子65 受精作用准备阶段1：精子获能2：卵子的准备：卵子必须达到减数第二次分裂中期才具备与精子受精的能力。66 受精阶段：精子发生顶体反应穿越放射冠和透明带，进入卵黄膜，雌雄原核形成和配子结合。67 防止多精入卵的两道屏障：在精子触及卵黄膜瞬间，发生透明带反应，这是防止多精入卵的第一道屏障；精子入卵后，发生卵黄膜封闭作用，这是防治多精入卵的第二道屏障68 受精卵 卵裂期 桑椹胚 囊胚 原肠胚 组织器官形成 幼体69 卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加70 桑葚胚：细胞数目32个左右，形似桑葚，此时细胞都具有全能性71 囊胚期：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织72 胚胎工程有哪些技术：体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植技术、胚胎分割技术。73 胚胎移植优势：可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，缩短供体本身的繁殖周期。74 胚胎移植的生理学基础：同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的；早期胚胎形成后处于游离状态，为胚胎的收集提供可能；受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应；移入受体的供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响 。75 胚胎移植的程序：对供、受体母牛进行选择，用激素进行同期发情处理；对供体母牛用激素做超数排卵处理；选择同种优秀公牛配种或人工受精；胚胎收集（冲卵-冲取的是胚胎不是卵子）；对胚胎进行质量检查此时胚胎应发育到桑椹胚或囊胚； 胚胎移植或冷冻保存； 检查受体母牛是否受孕；产下胚胎移植的犊牛。76 超数排卵处理所用激素是：促性腺激素 。77 同期发情处理所用激素是： 促性腺激素 。78 胚胎移植时，胚胎一般发育到 桑葚胚或是囊胚 。79 胚胎分割选择 桑葚胚或是囊胚 时期的胚胎。80 胚胎分割如果选择囊胚期要注意对 内细胞团 进行均等分割。否则会影响 胚胎的恢复和进一步发育 。81 胚胎分割可看作是动物无性繁殖或克隆。82 胚胎干细胞简称：ES或EK细胞83 胚胎干细胞来源：由早期胚胎或原始性腺中分离出来。84 胚胎干细胞形态特点：体积小，细胞核大、核仁明显；85 胚胎干细胞功能特点：具有发育的全能性，可以分化为成年动物体内任何一种组织器官86 胚胎干细胞应用价值：ES细胞可以用于治疗人类的某些顽症（老年痴呆、帕金森）、体外定向诱导分化培育出人造组织器官，解决临床供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。1（6分）将人的抗病毒干扰基因“嫁接”到烟草的DNA分子中， 可使烟草获得抗病毒的能力，形成转基因产品。试分析回答：（1）烟草转基因产品的获得属于 （ ）A基因工程 B细胞工程 C微生物工程 D酶工程（2）人的基因之所以能嫁接到植物体中，原因是 。 （3）烟草具有抗病毒能力，说明烟草体内产生了 。（4）烟草DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某个基因，实际并不影响遗传信息的表达功能。这说明 。2（8分）人的血清蛋白在临床上需求量很大，它通常是从人的血液中提取出来获得的。由于艾滋病病毒等人类感染性病原体造成的威胁与日剧增，使人们对血制品顾虑重重。而转基因技术的应用，使人类可以从动物体内获得大量的安全优质的血清蛋白。其操作过程主要是将人类血清蛋白基因与病毒DNA构成重组DNA，然后将重组DNA转移到奶牛的受精卵中，最后可从该受精卵发育成的雌牛的乳汁中分离人们所需要的血清蛋白。试分析回答下列问题：（1）临床上病人血清蛋白 ，往往造成组织水肿，其主要原因是 。（2）转基因技术中所需要的人类血清蛋白基因首先需要通过分子生物学技术提取和分离出来，然后进行 。这是转基因技术的 过程。（3）人类