安徽农业大学08基因工程试卷(A).doc

学院： 专业班级： 姓名： 学号： 装 订 线 安徽农业大学20082009学年第一学期基因工程原理试卷（A卷）考试形式: 闭卷，2小时，总分100分适用专业：06生物技术 考试时间： 2008.11. 题 号一二三四五总 分得 分得分评阅人一大题：填空题（共8小题，每空1分，共20分）1. 年,Smith和Wilcox从流感嗜血杆菌中分离到第一个类限制性内切核酸酶，这个酶后来被命名为 ；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是 。2. 类限制性内切核酸酶仅有内切核酸酶活性，而没有 活性，作用时需要 作为辅助因子。3. 原核生物主要有两种类型的DNA连接酶： 连接酶和 连接酶。正常情况下只有 连接酶能够连接平末端的双链DNA。4. 受体细胞的感受态是 ，诱导处理E.coli通常采用的化学试剂是 。5. 两个天然质粒pSC101和ColE1分别是 和 复制的质粒。其中第一个作为重组DNA载体的质粒是 。 6. pBR322质粒具有 和 两种抗性基因，而pUC系列的载体仅有 抗性基因。7. 在分离提取DNA的过程中，通常使用金属离子螯合剂EDTA，其目的是 ，而使用异戊醇的作用是 。8. 在Southern印迹中，DNA转移的速度主要取决于 和 。得分评阅人二大题：选择题（每小题1分，共15分）1. 因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是（ ）。（a）PBerg （b）WGilbert （c）AKormberg （d）BMcClintock2. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（ ）不太恰当。（a）由作用于同一DNA序列的两种酶构成（b）这一系统中的核酸酶都是型限制性内切核酸酶（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰（d）不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3. 限制性内切核酸酶可以特异性地识别和切割（ ）。（a）双链DNA的特异碱基对 （b）双链DNA的特异碱基序列（c）特定的三联密码 （d）以上都正确4. 限制性内切核酸酶的星号活性是指（ ）。（a）在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性（b）活性大大提高（c）切割速度大大加快 （d）识别序列与原来的完全不同5. 下列限制性内切核酸酶中，选用（ ）时要考虑连接后外源DNA的插入方向。（a）EcoR （b）EcoR （c）BamH （d）Pst6. 下列工具酶中，那一种可以被EGTA抑制活性（ ）？（a）S1核酸酶 （b）Bal 31核酸酶（c）末端转移酶 （d）碱性磷酸酶7. 用碱法分离质粒DNA时，因为（ ）所以可以被除去。（a）染色体DNA断成了碎片 （b）染色体DNA分子量大，而不能释放（c）染色体DNA变性后来不及复性（d）染色体末同蛋白质分开而沉淀8. DNA连接酶的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，（ ）。（a） 将双链DNA中的5-P同3-OH末端重新形成磷酸二脂键（b） 作用时不消耗能量 （c） 需要Mn2+等二价辅助离子（d） 也可以连接RNA分子9. 关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确？（ ）（a） 在不同的宿主中具有不同的复制机制（b） 在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点（c） 在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶（d） 在不同的宿主细胞中具有不同的复制速度10.关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确？（ ） （a） 噬菌斑颜色的变化 （b）cI基因失活造成噬菌斑的变化（c） 对IPTG的分解能力 （d）对Xgal的分解与否11.在利用lacZ失活的显色反应筛选中，IPTG的作用是（ ）。 （a）诱导宿主的肽的合成 （b）诱导宿主的肽的合成 （c）作为酶的作用底物 （d）作为显色反应的指示剂12.在切口移位标记DNA探针时只能使用（ ）。（a）Klenow酶 （b）DNA聚合酶（c）T4 DNA聚合酶 （d）T7 DNA聚合酶13.用下列方法进行重组体的筛选，只有（ ）说明外源基因进行了表达。（a） Southern印迹杂交 （b）Northern印迹杂交（c） Western印迹杂交 （d）原位菌落杂交14.用免疫化学法筛选重组体的原理是（ ）。（a）根据mRNA同DNA的杂交 （b）根据DNA同DNA的杂交（c）根据载体基因的表达 （d）根据外源基因的表达15. 限制性内切核酸酶EcoR、BamH和Hind在野生型的噬菌体DNA中有多个酶切位点，删除这些酶切位点的数量，主要通过（ ）。（a）体内突变 （b）完全酶切后连接（c）部分酶切 （d）先用甲基化酶修饰后再酶切得分评阅人三大题：判断题（每小题1分，共20分）1. DNA多态性就是限制性片段长度多态性。（ ）2. 在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他的限制酶就不能切割了。（ ）3. E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。（ ）4. 用产生不同黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA片段，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。（ ）5. 通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否表达。（ ）6. 限制性内切核酸酶的切割频率理论值应该是1/4n。（ ）7. 甘油是导致限制酶星活性的主要原因之一，防止的办法是在酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在5%以下。（ ）8. 在反转录过程中，使用AMV比使用M-MLV可得到较多的产物。（ ）9. ColE1天然质粒载体具有四环素抗性标记，因而很容易选择。（ ）10. 只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制子不能进行独立复制。（ ）11. 松弛型质粒pUC载体系列的拷贝数很高，达到500700，因此不必进行氯霉素扩增。（ ）12. 基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。（ ）13. 不匹配的黏性末端可以通过部分填补后进行连接。（ ）14. 一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。（ ）15. 外源基因（或DNA片段）插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。（ ）16. 所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。（ ）17. 突出或凹缺的3，末端都可以用Klenow酶进行末端标记。（ ）18. 以mRNA为模板合成的DNA是互补DNA（cDNA）。（ ）19. 多克隆位点（MCS）仅位于质粒载体中。（ ）20. 如果两个不同的质粒可以稳定地共存于同一个细胞中，这两种质粒则属于同一个不亲和群。（ ）得分评阅人四大题：简答题（共5小题，每小题4分，共20分）1. 何谓限制性内切核酸酶的切割频率？2. 什么是Klenow酶?具有哪些活性？3. 在DNA分离过程中造成DNA分子断裂的主要原因？4. 碱裂解法提取质粒DNA时，其中溶液、溶液、溶液各自的作用什么？5. 下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是类酶的识别序列，为什么？AAGCTT，GAATT