L-苯丙氨酸.doc

它是氨基酸，是两性物质，在水中的解离很弱，无法用酸或碱准确滴定。将它溶于冰醋酸，其碱性解离显著增加，可用溶于冰醋酸的高氯酸准确滴定外观、熔点、旋光性、uv（紫外）、FTIR（红外）、NMR（核磁共振）、水分、残渣、非水滴定、重金属（ICPMS，ICPAOE，比色法）、液相色谱（含量、纯度） 曲曲流觴水 18:21:07 是L-苯丙氨酸 结构式L-苯丙氨酸(63-91-2)的性状： 1.本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味苦。284熔化并分解。在水中略溶(2.97%，25)，在乙醇申几乎不溶。在受热、光照、空气中稳定，碱性下不稳定。等电点pH=5.48，pK-COOH=1.83，pK-NH3=9.13。 2.苯丙氨酸是芳香族氨基酸，属必需氨基酸，对幼儿尤其重要。在生物体内经曲莽草酸、分支酸和苯丙酮酸合成，分解代谢则通过苯丙氨酸加氧酶的作用转化为酪氨酸，进而分解为乙酰乙酸进人TCA循环。其生理作用与酪氨酸有关。可影响甲状腺激素和毛发、皮肤的黑色素。正常人每天需要2.2g。D-型与L-型的生理效果相同。最低需要量(mg/kgd)：成人男子31；幼儿169。用途L-苯丙氨酸(63-91-2)的用途： 本品是氨基酸类药。用于氨基酸输液、综合氨基酸制剂及营养强化剂，大量用于合成新型甜味剂天冬甜素(aspartame，L-天冬氨酸、本品结合的二肽甲酯)。是必需氨基酸之一。在大多数食品的蛋白质中几乎非限制氨基酸。可添加于焙烤食品，除强化苯丙氨酸外，与糖类起氨基一羰基反应，可改善食品香味。按我国GB276086规定可用作香料。该品是多种抗癌药物及二肽甜味的原料。描述1.L-苯丙氨酸(63-91-2)的生产方法： 本品制备方法很多，有蛋白质水解提取法，直接发酵法，化学合成等。化学合成法有苯甲醛法和苯乙醛法。 (1)苯甲醛法： 以苯甲醛和乙酰甘氨酸作用生成乙酰氨基桂皮酸，然后催化加氢还原，得乙酰-DL-苯丙氨酸，最后经氨基酰化酶水解，可拆分生成本品。 利用氨基酰化酶的专一性，只水解Ac-L-phe的酰氨键，生成本品，而不能水解Ac-D-phe的酰胺。然后根据本品和Ac-D-phe在水中的溶解度不同进行分离。而分离出的Ac-D-phe又可经消旋化生成Ac-DL-phe。再一次重复水解、分离。依次类推，可将Ac-DL-phe全部转化为本品。 固定化氨基酰化酶的制备：将DEAE-sephadexa-50放入去离子水中充分浸泡后，再依次用10倍量的0.5mol/LHCl和0.5mol/LNaOH溶液充分搅拌处理30min。然后用去离子水洗至中性，最后分别用0.1mol/L及0.01mol/L的pH=7.0的磷酸缓冲液处理1-2h，滤干，备用。取经培养40-50h的米麯扩大麯，用其6倍量的支离子水分2次提取，提取液用2mol/L的NaOH溶液调pH至6.7-7.0。然后按100L酶液和1kg湿DEAE-sephadex A-50的比例混合，于0-4搅拌吸附4-5h后，过滤取DEAE-sephadexA-50，并分别用去离子水0.1mol/LNaAc溶液、0.01mol/L的pH=7.0的磷酸缓冲液洗涤3-4次。过滤得固定化氨基酰化酶，加1%甲苯放入冷库中贮存备用。 酶水解：在1000L水解罐中，加入700L0.1mol/L的Ac-DL-phe钠盐溶液，再逐步加入6mol/L的HCl调溶液pH至6.7-7.0，再加入15-20kg固定化氨基酰化酶，维持50约4h进行酶选择性水解反应后，过滤取滤液，得酶水解液(含本品和Ac-D-phe混合液)。 分离：将酶水解液用6mol/L的HCl调pH至4.8-5.1，减压浓缩至35L左右，并将其放置于0结晶过夜，过滤取结晶，用10L冷乙醇洗涤，于80烘干3-4h，得本品的粗品，滤液和洗涤液合并，减压浓缩至20L左右，得Ac-D-phe溶液，待外消旋化后再重复进行酶水解、分离。 Ac-D-phe的外消旋化：将Ac-D-phe溶液60L，加入100L反应罐中，加入醋酐18.5L，在25-45，搅拌30min，冷却放置6h。再用浓HCl调pH值至1.5-2.0，5结晶过夜，过滤取结晶，水洗，滤干40真空干燥，得Ac-DL-phe。 精制：在100L反应罐中，加入5kg本品的粗品，加50L去离子水，加热至100，搅拌使其全溶，再加入药用活性炭0.25kg，搅拌脱色半小时后，趁热过滤，滤液移入200L结晶罐中，冷却至40，加入50L，40的95%乙醇，用6mol/L的HCl调pH至5.48，于0结晶过夜，过滤取结晶，用95%乙醇洗涤，抽干，80干燥3-4h，得本品的成品。母液再回收。 (2)苯乙醛法： 适用Bucherer反应，生成苯甲基乙内酰脲，然后碱性解得DL-苯丙氨酸(DL-phe)。 将DL-phe与醋酐作用生成Ac-DL-phe后，按上述方法进行拆分，可得本品。2.L-苯丙氨酸(63-91-2)的质量标准： 中国药典2000年版 指标名称 指标 C9H11O2含量/% 98.5 比旋度(20mg/mLH2O) 33.035.0 溶液颜色、澄清度 无色澄清 溶液的透光率(0.50g/25mLH2O,430nm)/% 98 PH值 5.46.0 氯化物/% 0.02 硫酸盐/% 0.02 铵盐/% 0.02 其他氨基酸/% 0.02 干燥失重/% 0.2 炽灼残渣/% 0.1 重金属 0.0002 铁盐/% 0.001 砷盐/% 0.0002 热原 符合规定3.贮藏： 密闭保存。4.注意事项： 可影响甲状腺激素和毛发、皮肤的黑色素。最低需求量(mg/kgd)：成年男子31，幼儿169。5.L-苯丙氨酸(63-91-2)的推荐用量：(1)占食品中总蛋白量的5.8%。(2)FEMA(mg/kg)：焙烤食品110；冷冻乳品60.0；肉制品10.0；软糖268；明胶、布丁60.0；乳制品66.0；调味品10.0；糖果和糖霜268；甜沙司220。6.鉴定试验：(1)取本品的水溶液(11000)5mL，加重铬酸钾溶液(11000)1mL煮沸，产生特有的臭气。 (2)取本品水溶液(11000)5mL，加茚三酮试液1mL，加热3min，呈现红紫蓝紫色。(3)取本品10mg，加硝酸钾0.5g及硫酸2mL，水浴加热20min后，加盐酸羟胺溶液(110)5mL，在冰水中放置10min冷却后，立即加40%氢氧化钠溶液8mL，放置，呈现红紫色。熔点 270-275 C7.L-苯丙氨酸(63-91-2)的纯度试验： (1)溶解性：将本品0.2g溶于20mL水中，无色，其浊度应在透明以下。 (2)酸碱性：本品水溶液(1100)的pH值用玻璃电极法测定必须是5.46.0。 酸度 取本品0.20g，加水20ml溶解后，依法测定（附录 H），pH值应为5.4-6.0。 (3)比旋光度：本品在105干燥3h后，精确称量约1g，溶在水中至50mL，测定此液旋光度必须是-33-35。 (4)氯化物：取本品0.5g，进行氯化物的常规试验，其量在0.01mol/L盐酸0.3mL对应量以下。 (5)铵盐：按L-天门冬氨酸钠的纯度试验(5)进行，但氨标准溶液用2mL。 (6)砷：取本品0.5g，加2mol/L盐酸10mL，作为检液进行砷的常规试验，应符合要求。 (7)重金属：取本品1g，加稀醋酸2mL及水40mL溶解，作为检液进行重金属的常规试验，其量必须在0.002%以下。 (8)其它氨基酸：按L-天门冬氨酸钠的纯度试验(8)进行。 (9)干燥失重：本品在105干燥3h，失重应在0.3%以下。 (10)强热残留物：本品的强热残留物应在0.1%以下。 非水滴定 (11)定量法：本品在105干燥3h后，精确称量约0.3g，以下按DL-丙氨酸的定量法进行。0.1mol/L高氯酸溶液1mL=16.52mg的C9H11NO2 温度 0 20 40 60 80 100 溶解度 1.98 2.74 3.77 5.20 7.18 9.90 含量测定: 取本品约0.13g，精密称定，加无水甲酸3ml溶解后，加冰醋酸50ml，照电位滴定法（附录 A），用高氨酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于16.52mg的C9H11NO2。 注 解 本品对水的溶解度(g/dL)如上： 苯丙氨酸用重酪酸钾氧化，引起脱氨、脱碳酸生成苯乙醛。此物有风信子样的香气，故可用于鉴别苯丙氨酸。 将苯丙氨酸硝基化在碱性条件下与羟胺作用使其发色。可用作定量法(定量)。 本品的解离常数pKCOOH=1.83 pKNH3+=9.13，pI=5.48。 Cl的限量是0.021%。 NH4的限量是0.02%。 As2O3的限量是2ppm。 Pb的限量是20ppm。 在本条件下苯丙氨酸的Rf值约0.61。其它的氨基酸的检测界限，在酸性、中性氨基酸中大约是0.050.1g。8.其他： 疏水参数计算参考值(XlogP)：-1.