低pH孵室温度验证方法.docx

低pH孵室温度的再验证康强军 夏翼骢 齐海 曹莉 王德胜 成都蓉生药业有限责任公司 610041【摘要】目的：检查并确认低pH孵室的运行和性能是否符合使用和生产工艺要求。方法：通过风险评估确认验证的范围及程度；运行确认（OQ）包括确认低pH孵室及空调系统是否能正常运行；性能确认（PQ）包括确认在负载最差条件下低pH孵室温度分布情况是否满足病毒灭活工艺要求。结果：低pH孵室做为IVIG病毒灭活的重要厂房设施，通过验证合格，满足IVIG病毒灭活工艺要求。【关键词】再验证；病毒灭活；低pH孵室验证的概念最初起源于美国，是由FDA对污染输液所致触目惊心的药难事件调查后采取的重要举措。我国98版GMP引入验证的概念，并明确规定“验证是证明任何程序、生产过程、设备、物料、活动或系统确实能导致预期结果的有文件证明的一系列活动”。2010版GMP在此基础上又明确提出“验证或确认的范围和程度要经过风险评估来确定”，进而使验证的目标更加明确。我公司采用Cohn低温乙醇法制备的静脉注射人血免疫球蛋白( IVIG)为无菌制剂，对制品进行病毒灭活是保证产品安全性的关键步骤之一。20世纪80年代以来，病毒灭活方法已有巴氏灭活法、S/D法、低pH 孵放法等。而低pH孵育病毒灭活法应用在血液制品中进行病毒灭活被证明是安全而有效的，并获得国内外医药行政当局的认可。其病毒的杀灭效果主要受温度、pH值、时间、离子强度及稳定剂浓度的影响。低pH孵室的主要设计功能是通过其温控系统为人免疫球蛋白原液或静丙原液在病毒灭活阶段提供均匀稳定的2325恒温条件。因此为保证低pH孵室的性能符合病毒灭活生产工艺和使用要求，每年需都要求对孵室的运行和性能和运行情况进行再验证，结合上一生产年度的数据和年度风险回顾，对低pH孵室的温度进行再验证。基本情况与风险回顾：本验证方案适用于该24低pH孵室的验证，主要用于人免疫球蛋白原液或静丙原液在病毒灭活阶段的低pH孵放。低pH孵室温控系统控制原理是：空气经孵室两侧下部回风夹道通过回风管回至空调机房，经组合式空调器和风管式辅助电加热器进行除湿和控温处理后送至孵室上方静压混合箱，再通过室内顶部满布送风孔板均匀送风至孵室内，形成一个空气循环系统，达到在2米以下形成一个均匀的温度场的目的。运行确认是按照相关文件规定对进行孵室的各单元设备、公用设施以及整体系统的运行进行确认试验，以证明系统能按照预定的功能参数运行。系统在进行性能确认之前，应先完成运行确认。性能确认包括孵室负载升温时间测试，负载热分布试验和温度范围测试负载热穿透试验库温不均匀度试验，确认孵室温度的性能能否满足相关标准生产要求。低pH孵室年度风险回顾：年度回顾补充回顾时间段结论时间段结论上一生产年度期间设备使用正常，能满足生产使用要求。不需要增加验证内容。不改变验证周期。不增加维保内容，不改变维保周期。设备使用正常，能满足生产使用要求。上一生产年度期间孵室使用正常，无变更。材料与方法1材料移动罐：上海森松有限公司Kaye-Validator 2000温度验证仪注射用水：自制。2方法2.1 风险分析从人员、设备、材料、方法、环境、检测、环境、材料等方面辨识出影响验证对象的主要因素并绘制鱼骨图，再根据鱼骨图的因素逐项进行风险分析。根据风险分析结果采取相应的验证措施。1风险分析环境设备设施方法人员低PH孵室再验证材料人员培训孵室负载热分布注射用水符合验证要求移动罐符合验证要求公用工程电力供应符合验证要求空调系统及电源低pH孵室运行和性能计量器具在校验期内模拟制品温度测试序号风险点识别潜在风险可能原因风险评估验证措施1人员人员不能正确履行自己的职责，最终导致生产活动失控。人员未经岗位技术培训，不能正确按SOP进行操作。中等风险确认工作人员经过培训，及验证方案培训记录（OQ）。2检验设备检验设备损坏或未在校验有效期内，最终导致检测结果失真。检验设备未定期校验。中等风险确认检验设备在校验有效期内，填写验证前提条件确认记录及验证用测试仪器仪表校验确认记录（OQ）。3空调系统与电源空调系统、电源等不能正常工作，导致生产活动不能正常进行或制品污染。未对电源、空调系统进行定期维护保养。中等风险确认空调系统、电源正常工作，填写验证前提条件确认记录（OQ）。4低pH孵室运行盒性能低pH孵室运转异常或孵室温场不满足工艺要求，导致制品病毒灭活失败、制品不合格。未对低pH孵室进行定期维护保养或未监测孵室温场分布。高风险检查孵室运行情况，填写低pH孵室（BG108）运转确认记录（OQ）；进行孵室负载热分布试验，填写低pH孵室（BG108）负载热分布试验记录（PQ）；孵室日常工作及检查，填写模拟低pH孵室（BG108）日常工作及检查记录（PQ）。5孵室负载热分布实验孵室在负载条件下的冷点、热点及温场分布情况未知，造成负载实验中移动罐的摆放位置无数据支撑支持。未得到孵室热分布的数据或未对数据进行分析即进行验证低风险低pH孵室主要功能是用于人免疫球蛋白原液或静丙原液在病毒灭活阶段2325条件下的低pH孵放，通过年度回顾发现低pH孵室运转正常，无变更，因此孵室只需在最差条件下通过负载热分布实验就能满足工艺和使用要求，由此带来的残余风险认为可以接受无6制品温度制品未在有效时间内升至工艺规定温度或连续21天内出现制品温度不满足病毒灭活工艺要求导致制品病毒灭活失败、制品不合格。未对制品升温时间验证或未进行连续21天负载热穿透试验。高风险进行低pH孵室内移动罐内模拟制品升温时间测试，填写低pH孵室（BG108）升温时间测试记录（最大量和最小量）（PQ）；进行连续21天负载热穿透试验，填写连续21天负载热穿透试验记录（最大量和最小量）（PQ）。7移动罐移动罐不符合验证要求移动罐部件损坏或缺失低风险验证前检查移动罐情况，填写验证前提条件确认记录8注射用水注射用水不符合验证要求注射用水水温异常或供水不足低风险验证前与制水组确认注射用水系统情况，确认正常并填写验证前提条件确认记录9环境公用工程电力供应异常，造成空调风机运行异常电力供应系统老化或线路故障低风险验证前与工程部确认电力供应系统正常分析分析评估结论：通过以上风险评估分析，在低pH孵室使用过程中发现高风险2项，中等风险3项，低风险4项。并针对高风险和中等风险制定了相应的验证措施（具体内容见上表），采取验证措施后的残余风险可以接受；孵室空载热分布实验评估为低风险其原因如下：低pH孵室主要功能是用于人免疫球蛋白原液或静丙原液在病毒灭活阶段2325条件下的低pH孵放，通过年度回顾发现低pH孵室运转正常，无变更，因此孵室只需在最差条件下通过负载热分布实验就能满足工艺和使用要求，由此带来的残余风险认为可以接受。由于低pH孵室验证即将到期、实际生产进度安排等原因，使目前进行孵室空载热分布实验无可操作性，故不采用额外的验证措施。但为了将风险降至最低，建议在停产结束至生产恢复前补充进行孵室空载热分布实验，以期掌握空载条件下孵室的冷点、热点及温场分布情况，更好的指导低pH孵室日常使用。2.2运行确认（OQ）2.2.1计量器具仪器校验确认核对计量器具仪器的计量管理台账和校验合格证，确认是否经过相关计量检定部门校验合格，并在有效期内；检查培训记录，验证操作人员是否经过操作规程及验证方案等培训。2.2.2低pH孵室运行确认（OQ）依次检查房间温度显示器、灯具开关、空调系统风机、空调控制系统等运行情况是否正常。2.3性能确认（PQ）2.3.1 孵室负载热分布试验为结合生产进度，同时为了验证最坏条件，低pH孵室内摆放24个移动罐进行试验（移动罐的布点位置见下图图3）。按低pH孵室测温探头示意图（图1）在孵室中放置12个Kaye validator 2000探头（探头布置见低pH孵室测温探头示意图 图1），探头共布置上下两层，上层为、，下层为、。上层测温探头位于移动罐顶部附近且距移动罐顶部510cm，下层测温探头位于移动罐罐底附近距罐壁510cm。试验过程中关闭孵室库门及库内照明灯，开门次数及持续时间模拟尽量与正常工作时的最多开门次数和最长持续时间一致。 门 门测温探头上层布置示意图测温探头下层布置示意图图1 低pH孵室测温探头示意图 2.3.3移动罐内模拟制品（注射用水）升温时间测试（最大量和最小量）将移动罐转移入一次除菌间，通过传输管道传输将注射用水（温度22.522.9）传入移动罐中，用电子称进行准确的计量。连续接收12罐注射用水，、罐注射用水量在100L110L（最小量）范围内，、注射用水量在350L360L（最大量）范围内。每个移动罐内放置1个相应序号的Kaye温度探头。探头位置位于所盛装注射用水溶液的上层中部（最小量）或下层中部（最大量），探头浸入注射用水中且四周不与罐体接触。然后将装有模拟制品量的移动罐转移入低pH孵室中（摆放位置见图2）。启动keye并连续记录测量移动罐内注射用水的温度试验过程中关闭库门及库内照明灯，开门次数尽量与正常工作时相同。监测过程中确认移动罐内各测温探头到达23温度时所需的升温时间是否符合病毒灭活工艺要求。温度达到23要求后，继续进行热穿透测试。门图2移动罐在孵室内布点位置2.3.2 孵室负载热穿透试验用注射用水模拟产品装入移动罐中，结合生产进度，同时为了验证最坏条件，低pH孵室内摆放24个移动罐进行试验（移动罐的布点位置见图3）。试验过程中关闭孵室库门及库内照明灯，开门次数及持续时间模拟尽量与正常工作时的最多开门次数和最长持续时间一致。12个Kaye validator 2000探头摆放位置见图4、图5。探头共布置上下两层，温度探头号上层分别为1#、2#、3#、4#、5#、6#，下层分别为7#、8#、9#、10#、11#、12#。上层测温探头位于移动罐内顶部附近且距移动罐顶部510cm，下层测温探头位于移动罐罐底附近距罐壁510cm。并将探头浸入注射用水中（3）（9）13141516（8）（2）17(5)(11)(6)(12)19门1820（4）（10）21222324（7）（1）图3移动罐的布点位置图注：、号移动罐内为验证用模拟制品（注射用水）；13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24号移动罐内为正常制品。7#8#9#10#1#2#3#4#5#6#门11#12#门门图4上层测温探头布点位置 图5下层测温探头布点位置2.3.4连续21天负载热穿透试验（最大量和最小量）因移动罐和Kaye探头的摆放位置与升温测试试验相同，故在制品升温测试结束后继续记录温度检测21天。测量过程中低pH孵室的开门次数尽量采用与正常生产时的最差条件工作时相同。结果与讨论13运行确认（OQ）13.1计量仪器确认3.1.1 确认方法确认验证用Kaye-Validator 2000温度验证仪经相关检验部门校验合格且在有效期内；验证操作人员经过设备操作规程培训，具备该设备的操作技能。3.1.2 确认结果项目内容确认结果人员人员确认已接受了岗位技术培训；能按SOP进行岗位操作；能规范操作，减少人员对环境造成污染。验证用生产设备移动罐12个验证用检验仪器设备Kaye-Validator 2000温度验证仪经过校验并在校验期限内验证用材料注射用水2820L验证需公用工程条件电源220V 50Hz空调系统能正常运行3.2低pH孵室运行确认（OQ）3.2.1确认内容房间温度显示器功能正常，显示温度在预定的2325范围内；灯具开关能正常开启和关闭；空调系统风机的风阀处于开启状态且风机运转正常；空调控制系统的冷水阀和电加热能正常开闭。3.2.2确认结果见下表：确认项目检查方法确认结果检查房间温度显示器手动调节显示器上的“+”和“-”按键来控制温度在2325温度范围内，按“+”则温度显示器的温度增加1，按“-”则温度显示器的温度减少1。检查灯具开关打开灯具开关,查看灯具是否正常工作;关闭灯具开关,查看灯具是否关闭。能正常开关检查空调系统风机运行情况查看风阀是否在正常位置；查看风机是否正常运转。风阀处于开启状态且风机正常运转检查空调控制系统运行情况查看冷水阀和电加热是否正常工作。冷水阀和电加热能正常开闭起停34性能确认（PQ）34.1 孵室负载热分布试验探头序号CH1CH2CH3CH4CH5CH6CH7CH8CH9CH10CH11CH12开始时间2011.7.1 10：58到温时间2011.7.1 14：00结束时间2011.7.2 14：00恒温过程中最低温度（）23.29恒温过程中最低温度位置（探头序号）CH12恒温过程中最高温度（）24.62恒温过程中最高温度位置（探头序号）CH8孵室负载热分布试验结论：在孵室负载热分布试验中，恒温过程各温度点范围在在2325之间，各测试点温度与平均温度之差1，符合规定要求。43.2低pH孵室内移动罐内模拟制品升温时间测试（最大量和最小量）移动罐罐号VE-5060-3356472849528172936245探头序号CH1CH2CH3CH4CH5CH6CH7CH8CH9CH10CH11CH12装量大小（L）101.0102.5104.0105.5103.0108.0352.0354.5357.0350.5356.0354.5试验起止时间2011.6.2 /13：562011.6.5/12:00起始温度22.6522.7222.5122.8122.6022.4522.5122.4822.4922.5522.6322.53升温最长时间（h）70