生物技术实践(选修1)高考复习资料.doc

生物技术实践（选修1）高考复习资料第四部分、浅尝现代生物技术一、教学要求本部分“实验12：乳酸脱氢酶同工酶的分离”与“实验13：DNA片段的PCR扩增”不作要求；只要求学生做1个实验，即“实验11：植物的组织培养”。实验11植物的组织培养基本要求1进行菊花的组织培养2尝试植物激素的应用发展要求 二、基本内容菊花的组织培养基本原理细胞的全能性基本过程脱分化愈伤组织再分化影响因素材料性质、营养物质、调节物质、环境条件操作流程配制MS固体培养基外植体的消毒接种培养移栽栽培1、原理：植物细胞的全能性2、基本过程：愈伤组织（脱分化）离体细胞、组织、器官（又叫外植体）（再分化）（生长发育）根、芽或胚状体新个体或形成人工种子3、影响植物组织培养的条件：（1）材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。菊花组织培养一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。（2）激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高 生长素 细胞分裂素比值与结果比值高时促根分化，抑芽形成比值低时促芽分化，抑根形成比值适中促进愈伤组织生长 （3）营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。（4）环境条件：PH、温度、光等环境条件。 4、操作流程（1）配制MS固体培养基：配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的浓缩倍数，计算用量，并加蒸馏水稀释。配制培养基：应加入的物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用蒸馏水定容到1000毫升。在菊花组织培养中，可以不添加植物激素，原因是菊花茎段组织培养比较容易。灭菌：采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。MS培养基中各种营养物质的作用是什么？与肉汤培养基相比，MS培养基有哪些特点？大量元素和微量元素提供植物细胞所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大量无机营养。（2）外植体的消毒（3）接种：接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种78个外植体。外植体接种与细菌接种相似，操作步骤相同，而且都要求无菌操作。（4）培养：应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照（5）移栽：栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间，进行壮苗。最后进行露天栽培。（6）栽培外植体在培养过程中可能会被污染，原因有外植体消毒不彻底；培养基灭菌不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等。三、习题训练1辣椒是某市北运蔬菜的重要品种之一，但近年有退化、减产的趋势，如想通过花药离体培养的方法，培育优质、高产、无病毒的辣椒苗，请你完成下面的辣椒苗培育方案。（1）材料的选取。用 法镜检花药，一般当花粉粒处于 期时，可用作培育的材料，此期的花粉粒的特点是 ，核位于细胞的中央。（2）培养原理。右图是温度与花药的胚诱导率关系图，在 时，胚的诱导率最高。（3）材料的准备。取辣椒花蕾用体积分数为。70的酒精浸泡约30s，立即取出，在 中清洗。取出后吸干水分，放入质量分数为0.1的 溶液中24min，取出再冲洗35次。（4）接种和培养。接种用的花药要彻底除去花丝，因为与花丝相连的花药不利于的形成，基本培养基用 培养基，在培养基中要加入蔗糖做碳源，加入适量的生长素和细胞分裂素等物质，进行严格的消毒，就可用于花药的培养了。（5）鉴定和筛选。经过一段时间的培育，花药开裂后，会释放出胚状体，一个花药内能产生多个幼小植株。幼小植株需要移到新的培养基上继续培养。培养出来的植株要作鉴定和筛选的原因是 。2下图是利用胡萝卜生产泡菜的过程图解，请分析下图并回答有关生物技术实践方面的问题：原料选择修剪、洗涤、晾晒、切分成条状或片状加盐盐水冷却泡菜盐水加入调味料、装坛发酵成品测定亚硝酸盐含量（1）在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中不需要氧气的是 。在制作泡菜的过程中检验亚硝酸盐时所出现的颜色是 。（2）如果该流程的某些步骤是用来酿酒，就要做到无菌，无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和 灭菌。（3）制作泡菜对原料要求虽说不高，蔬菜的茎、叶都可以，但如果能生产出品质高、产量高的蔬菜，将可以生产出更好的泡菜。为了达到这个目的，可以利用脱毒幼苗来进行生产。下列是培养脱毒幼苗的过程，操作的正确顺序是 。外植体消毒 制备MS培养基 接种 培养 栽培 移栽A BC D（4）科学家研究发现，在制作泡菜的好原料胡萝卜中有一种增加其甜度的基因，科学家想通过基因工程的方法，将这个基因导入普通胡萝卜中。在拷贝大量的基因的过程中，他分析发现DNA复制方向总是从子链的 端延伸。（5）现有某工厂想合理利用制作泡菜过程中的余料来生产胡萝卜汁，但原料有限，为了提高果胶酶的利用效率，工作人员用物理或化学方法，将酶固定在一定的空间内的技术称 。根据果胶酶在果汁生产中的作用，在该工厂中能正确表示相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响的曲线是 。（6）该工厂想通过电泳法分离提纯果胶酶，则影响蛋白质迁移速率的因素是其分子的 、分子大小和分子形状。利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来? 。（7）在种植胡萝卜的土壤中，存在有硝化细菌，想利用稀释涂布平板法分离并纯化这种细菌用于沼气池除臭。正确的操作步骤是（ ）土壤取样 称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备水壤提取液吸取0.1mL进行平板涂布 依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A BC D3人类利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。请回答以下于发酵有关的问题：（1）喝剩的葡萄酒放置时间长后酒味变酸的原因是 。（2）工业生产果酒时，为有利于葡萄的压榨、果酒清澈透明无沉淀，可加入 酶。（3）某研究性学习小组同学用固定化的酵母细胞发酵无菌麦芽汁制作酒，发酵条件符合操作要求，10天后检查发酵瓶发现麦芽汁几乎无酒味，请分析发酵失败可能的原因： 。 。（4）该小组同学用琼脂作载体，用包埋法固定-淀粉酶来探究固定化酶催化效果。实验结果如下：（注：假设加入试管中的固定化淀粉酶量与普通-淀粉酶量相同）1号试管2号试管固定化淀粉酶普通-淀粉酶淀粉溶液60保温5分钟，取出冷却至室温，滴加碘液现象变蓝不变蓝该实验设计体现了 原则。分析1号试管变蓝的原因： 。4为了进一步增强洗衣粉对血渍、奶渍、油污、土豆泥等衣物上常见污垢的去除能力，洗衣粉中常常会添加各种酶类。请回答有关问题：（1） 根据衣物上常见的污垢，加酶洗衣粉中添加的酶类有碱性蛋白酶、 。（2）碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的 。注 意 事 项请将本品置于阴凉、干燥处，避热、避湿、避光。不慎溅入眼中，即用水冲洗。水温以3050为宜，切忌用70以上的热水。（3）右图为加酶洗衣粉的包装袋上的产品说明，根据你所学习的有关知识，解释注意事项： （4）下面是有关加酶洗衣粉洗涤效果的探究实验，请据表回答：脸盆编号洗涤物 (等量)洗涤温度洗衣粉(等量)水量洗净所需时间L油污布45加酶2 L4 min2油污布45普通2 L7 min3油污布5加酶2 L9 min4油污布5普通2 L8 min该实验设计体现了 原则。若1号实验组洗净所需时间接近7分钟，请分析最可能的原因 。参考答案1（1）醋酸洋红(或焙花青一铬矾) 单核 细胞原生质浓厚（2）2528(或2528C之间的任意温度)（3）无菌水(或蒸馏水) 氯化汞（4）愈伤组织(或胚状体) MS（5）花药培养中，通过愈伤组织形成的植株，常常会出现染色体倍性的变化（2分）2（1）泡菜 玫瑰红 （2）高压蒸汽 （3）固定化酶 （4）C （5）细胞分裂素、生长素（答全1分） （6）5端向3端 （7）丙 (8) 带电性质以及带电荷量 相对分子质量大的 （9）C3（1）醋酸菌发酵产生醋酸 （2）果胶酶、蛋白酶（3）海藻酸钠浓度