基因工程二轮导学案.doc

第三讲 基因工程及安全性一复习目标1.理解限制酶的作用特点2.理解PCR技术的原理、过程3.简述基因工程的操作工具和操作步骤等知识点4.关注热点科研成果，正确评价转基因生物的安全一基因工程的工具1.与DNA有关的酶比较项目限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物作用部位形成产物知识铺垫：请画出上图中的DNA经酶切割形成的DNA片断。思考：一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接。典型例题：1若用限制酶Sma完全切割图1中DNA片段，产生的末端是 末端，其产物长度为 。（限制酶Sma切割的碱基序列和酶切位点CCCGGG）2.若图1中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma 完全切割，产物中共有 种不同DNA片段讨论：一个环状DNA分子若分别被一个酶切割、两个酶切割、三个酶切割后形成的DNA片断种类数？变式训练：用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1000个碱基对)，请画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。2.基因进入受体细胞的载体构建基因表达载体的目的 二基因工程的基本操作程序及应用1.基因工程的基本操作主要包括四个步骤 2.利用PCR技术扩增目的基因的条件： 典型例题1.设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。第1组： ； 第2组： 。2.下列关于用PCR技术扩增DNA分子中的目的基因的叙述，正确的是（ ）A. PCR扩增时只需要一种引物B在PCR扩增时需要解旋酶和DNA聚合酶C要获得目的基因至少经过了1个PCR循环D获得2个目的基因共需要14个引物3.（多选）小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述正确的是 （ ）A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞4.（多选）下列关于基因工程技术的叙述，错误的是A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达5.融合蛋白是通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接，由同一调控序列控制合成的蛋白质。人的表皮生长因子受体（EGFR）是影响癌症发生发展的重要因素，它在肺癌、结肠癌、脑肿瘤等实体瘤中均有大量表达。天花粉蛋白（TCS）是中药天花粉的有效成分，具有抗肿瘤作用。下图是通过基因工程方法将人表皮生长因子基因（EGF）和TCS基因连接起来，利用大肠杆菌生产人表皮生长因子天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图。请回答：（1）为了建立含有EGF的cDNA文库，应从健康人体的 细胞中提取总mRNA，通过 法合成cDNA。从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF 。（2）在过程中，应使用的限制酶是 ，在融合蛋白基因的首端还应插入 。（3）单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微，而人表皮生长因子天花粉蛋白融合蛋白疗效显著，原因是 。（4）某同学为了筛选插入目的基因的表达载体，将处理过的载体分别置于含有氨苄青霉素和四环素的培养基上培养，观察其增殖和表达情况。此设计方案是否合理，请说明理由。 。三生物技术的安全和伦理问题转基因生物引发了人们在 、 、 三个方面激烈的争论。如何理性看待转基因技术 我国政府对待生殖性克隆和治疗性克隆的态度是 我国政府如何对待生物武器 典型例题1.下列关于转基因生物安全性的叙述中，错误的是A.我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度B.国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能的危害C.开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提D.目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上2下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是A种植转基因作物应与传统农业种植区隔离B转基