粉刺灵颗粒的定性定量分析.doc

粉刺灵颗粒的定性定量分析 作者：朱育凤刘云张倩李政常星洁【摘要】本文通过对粉刺灵颗粒剂进行定性定量分析。得出结论：定性定量方法结果准确，重现性好，可用于粉刺灵颗粒剂的质量控制。【关键词】粉刺灵颗粒丹参酮A薄层色谱法高效液相色谱法粉刺灵颗粒剂主要由丹参、补骨脂、大黄、蒲公英、白花蛇舌草等组成，具有清热解毒，活血化瘀之功效，用于治疗痤疮。为了对其制剂进行更好地质量控制，我们采用薄层色谱法对粉刺灵颗粒中的丹参、补骨脂、大黄进行了定性控制，以丹参酮A为指标成分，应用高效液相色谱法对其进行定量分析，为提高粉刺灵颗粒质量控制标准提供了实验依据，现报道如下。1仪器与试药1.1仪器Agilent1100高效液相色谱仪；HypersilC18柱；BP211D十万分之一电子分析天平）；939型全自动薄层制板器；WD-9413A凝胶成像分析仪；101-1A电热鼓风干燥箱；KQ-1000E医用超声波清洗器。1.2试药粉刺灵颗粒剂由江苏省中医院制剂部提供；丹参酮A，丹参、补骨脂、大黄，对照品及对照药材均购于中国药品生物制品检定所。硅胶G。硅胶H。甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯。2定性定量分析2.1薄层色谱鉴别2.1.1丹参的薄层色谱鉴别取本品粉末5g，加乙醚25ml，超声20min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1g，同法制成丹参对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂丹参阴性颗粒5g，同法制成粉刺灵颗粒丹参阴性对照溶液。再取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（xx版中国药典附录VIB）1试验，吸取上述四种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（6090）-乙酸乙酯（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。阴性无干扰。2.1.2补骨脂的薄层色谱鉴别2取本品粉末5g，加乙酸乙酯20ml，超声15min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取补骨脂对照药材1g，同法制成补骨脂对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂补骨脂阴性颗粒5g，同法制成粉刺灵颗粒剂补骨脂阴性对照溶液。照薄层色谱法（xx版中国药典附录VIB）1试验，吸取上述三种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钠甲醇溶液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的两个蓝白色荧光斑点。阴性无干扰。2.1.3大黄的薄层色谱鉴别取本品粉末5g，加甲醇20ml，超声30min，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30min，立即冷却，用乙醚萃取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。取大黄对照药材1g，同法制成大黄对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂大黄阴性颗粒5g，同法制成粉刺灵颗粒剂大黄阴性对照溶液。照薄层色谱法（xx版中国药典附录VIB）1试验，吸取上述三种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（3060）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变成红色。阴性无干扰。2.2含量测定2.2.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(73:27)为流动相；柱温为30；流速为1ml/min；检测波长为270nm。理论塔板数按丹参酮A峰计算应不低于2000。2.2.2对照品溶液的制备及线性关系考察精密称取丹参酮A9.71mg，加甲醇溶解，定容至25ml,再吸取1ml,加甲醇定容至25ml，作为对照品贮备液。吸取5ml贮备液，加甲醇定容至10ml,分别吸取上述溶液3l、6l、10l、15l、20l、25l进样，测定峰面积，以丹参酮A含量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：y=5488.99533x-4.47379，r0.99997，丹参酮A在0.02330.1942g范围内呈现良好的线性关系。2.2.3粉刺灵颗粒丹参酮A的含量测定取本品约5g，精密称定，置棕色容量瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得，进样10l。2.2.4选择性试验分别取对照品溶液、样品溶液、对照药材溶液、阴性溶液10l注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果显示，在与对照品色谱峰相应的位置上，供试品溶液出现相同保留时间的色谱峰，丹参酮A和样品中其他组分色谱峰可达到基线分离，丹参酮A与其相邻色谱峰的分离度均大于1.5，阴性对照溶液在此保留位置上无色谱峰，表明阴性对照无干扰。2.2.5重复性试验取同一批样品，按“2.2.3”制备6份供试品溶液，测定丹参酮A的含量，结果RSD0.04%(n=6)。 作者：朱育凤刘云张倩李政常星洁【摘要】本文通过对粉刺灵颗粒剂进行定性定量分析。得出结论：定性定量方法结果准确，重现性好，可用于粉刺灵颗粒剂的质量控制。【关键词】粉刺灵颗粒丹参酮A薄层色谱法高效液相色谱法粉刺灵颗粒剂主要由丹参、补骨脂、大黄、蒲公英、白花蛇舌草等组成，具有清热解毒，活血化瘀之功效，用于治疗痤疮。为了对其制剂进行更好地质量控制，我们采用薄层色谱法对粉刺灵颗粒中的丹参、补骨脂、大黄进行了定性控制，以丹参酮A为指标成分，应用高效液相色谱法对其进行定量分析，为提高粉刺灵颗粒质量控制标准提供了实验依据，现报道如下。1仪器与试药1.1仪器Agilent1100高效液相色谱仪；HypersilC18柱；BP211D十万分之一电子分析天平）；939型全自动薄层制板器；WD-9413A凝胶成像分析仪；101-1A电热鼓风干燥箱；KQ-1000E医用超声波清洗器。1.2试药粉刺灵颗粒剂由江苏省中医院制剂部提供；丹参酮A，丹参、补骨脂、大黄，对照品及对照药材均购于中国药品生物制品检定所。硅胶G。硅胶H。甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯。2定性定量分析2.1薄层色谱鉴别2.1.1丹参的薄层色谱鉴别取本品粉末5g，加乙醚25ml，超声20min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1g，同法制成丹参对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂丹参阴性颗粒5g，同法制成粉刺灵颗粒丹参阴性对照溶液。再取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（xx版中国药典附录VIB）1试验，吸取上述四种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（6090）-乙酸乙酯（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。阴性无干扰。2.1.2补骨脂的薄层色谱鉴别2取本品粉末5g，加乙酸乙酯20ml，超声15min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取补骨脂对照药材1g，同法制成补骨脂对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂补骨脂阴性颗粒5g，同法制成粉刺灵颗粒剂补骨脂阴性对照溶液。照薄层色谱法（xx版中国药典附录VIB）1试验，吸取上述三种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钠甲醇溶液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的两个蓝白色荧光斑点。阴性无干扰。2.1.3大黄的薄层色谱鉴别取本品粉末5g，加甲醇20ml，超声30min，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30min，立即冷却，用乙醚萃取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。取大黄对照药材1g，同法制成大黄对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂大黄阴性颗粒5g，同法制成粉刺灵颗粒剂大黄阴性对照溶液。照薄层色谱法（xx版中国药典附录VIB）1试验，吸取上述三种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（3060）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变成红色。阴性无干扰。2.2含量测定2.2.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(73:27)为流动相；柱温为30；流速为1ml/min；检测波长为270nm。理论塔板数按丹参酮A峰计算应不低于2000。2.2.2对照品溶液的制备及线性关系考察精密称取丹参酮A9.71mg，加甲醇溶解，定容至25ml,再吸取1ml,加甲醇定容至25ml，作为对照品贮备液。吸取5ml贮备液，加甲醇定容至10ml,分别吸取上述溶液3l、6l、10l、15l、20l、25l进样，测定峰面积，以丹参酮A含量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：y=5488.99533x-4.47379，r0.99997，丹参酮A在0.02330.1942g范围内呈现良好的线性关系。2.2.3粉刺灵颗粒丹参酮A的含量测定取本品约5g，精密称定，置棕色容量瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得，进样10l。2.2.4选择性试验分别取对照品