HLA-Ⅱ类基因与狼疮性器官 系统损害的相关性研究.doc

HLA-类基因与狼疮性器官 系统损害的相关性研究HLA-类基因与狼疮性器官 系统损害的相关性研究2011-07-19 谢尚葵冯树芳沈福民 【摘要】目的分析HLA-类基因与狼疮性器官、系统损害的相关性，探讨系统性红斑狼疮(SLE)从基因到临床表达的发病机制。方法应用PCR-SSOPH技术检测113例确诊SLE病人的DR、DQA1、DQB1等位基因。结果浆膜炎与DQB1*0601正相关；神经精神症状与DRB1*1501正相关；血肌酐增高与DQB1*0302、DQB1*0401正相关；血尿素氮增高与DQB1*0201负相关；蛋白尿与DQB1*0301、DRB3*0202、DRB3*0301、DRB1*1101负相关；血尿与DQB1*0301、DRB3*0301负相关；管型尿与DRB1*0302正相关；贫血和白细胞减少分别与DQB10201正相关；血小板减少与DRB1*1502和DRB1*1202正相关；淋巴细胞减少与DRB1*0302正相关；C3降低与DQB1*0303正相关，与DQB1*0301负相关；狼疮细胞阳性与DRB1*1501负相关。结论多个HLA-类等位基因和SLE的临床表达有相关性，国人的SLE遗传背景与其他人种有所不同。 【关键词】红斑狼疮，系统性；HLA抗原；多态现象(遗传学)；易感性与特异性；等位基因 Relationship between HLA class genes and organ,system involvement in patients with systemic lupus erythematosus. XIE Shangkui,FENG Shufang,SHEN Fumin. Department of Dermatology Huashan Hospital,Shanghai Medical University,Shanghai 200040,China 【Abstract】ObjectiveTo explore the relationship between HLA- genes and systemic involvement in patients with systemic lupus erythematosus (SLE).MethodHLA-DR and DQ alleles were typed in 113 diagnosed patients with SLE.ResultsThe serositis was positively associated with DQB10601;neuropsychiatric manifestation positively with DRB11501;the increased serum creatinine positively with DQB10302 and DQB10401,respectively;increased BUN negatively with DQB10201;proteinuria negatively with DQB10301,DRB30202,DRB30301 and DRB10101,respectively;hematuria negatively with DQB10301 and DRB30301,respectively;anemia and leukocytopenia respectively positively with DQB10201;lymphocytopenia positively with DRB10302;decreased C3 positively with DQR10303,and negatively with DQR10301;detected lupus cell negatively with DRB11501.ConclusionMany HLA- genes play an important role in the clinical expression of SLE,and the genetic background of SLE in Chinese may be different from other race. 【Key words】Lupus erythematosus,systemic;HLA antigens;Polymorphism (genetics);Sensitivity and specificity;Alleles 系统性红斑狼疮(SLE)发病与多种HLA等位基因相关。为深入探讨这些基因或其关联的亚型与SLE临床表达关系，我们引入PCR-SSOPH检测技术，对113例确诊的SLE病人进行HLA-DR、DQ位点等位基因分型，分析基因与狼疮性器官、系统损害的相关性，找出重型SLE相关基因。 1资料与方法 1.1病例选择：入选的113例患者均符合1982年美国风湿病协会(ARA)SLE诊断标准4条或4条以上1。记录患者的性别、发病年龄，以及有无以下SLE临床表现：蝶型红斑、盘状损害、光敏、口腔溃疡、关节炎、雷诺现象、狼疮发、神经精神症状、浆膜炎、血细胞减少、狼疮肾炎和C3降低(0.8 g/L)等。 标本：外周静脉血5 ml(抗凝)。 1.2实验方法：基因组DNA的提取：盐析法。DNA体外扩增聚合酶链反应(PCR)。共有6对引物，其中AMP-B为DR位点扩增的公用引物。地高辛(DIG)ddUTP3末端标记寡核苷酸探针杂交。 1.3分型标准：以显著影响生存率的恶性指标作为重型SLE分型标准2。 1.4统计学处理：2相关分析、多因素回归分析和多项比较校正，以P0.05为具统计学显著性。 2结果 2.1HLA-类基因分型 2.1.1等位基因分型结果：用12个DQA1探针检出7个亚型，未检出DQA1*0401；用15个DQB1探针检出12个等位基因，未检出DQB1*0504、*0603和*0604；用4个DR2探针检出4个亚型：用4个DR52组探针检出3个亚型，未检出DRB3*0201；用8个DR52相关组探针分出8个亚型。 2.1.2H-W吻合度检测结果：在HLA-DQA1和DQB1座位上，基因型的期望值与观察值很好吻合，分别P0.1和P0.5，说明基因已达到遗传平衡，本组病人可作为可靠的供研究的群体资料。 2.2HLA-类等位基因与SLE器官、系统损害的相关性(见表1) 2.2.1HLA-DQA1位点等位基因：DQA1*0101与淋巴细胞减少正相关；DQA1*0102与狼疮细胞阳性负相关；DQA1*0501与蛋白尿负相关，Pc(多项比较校正P值)0.05。 2.2.2HLA-DQB1位点等位基因：HLA-DQB1*0201与贫血和白细胞减少正相关，与血尿素氮增高负相关；DQB1*0302与血肌酐增高正相关；DQB1*0303与C3降低正相关；DQB1*0401与血肌酐增高正相关；DQB1*0602与发病年龄正相关，均分别P0.05，Pc0.05。 DQB1*0301分别与蛋白尿和血尿负相关，分别P0.001和0.01，分别Pc0.05和Pc0.05；与C3降低负相关，分别P0.05和Pc0.05。DQB1*0601与浆膜炎正相关，分别P0.01，Pc0.05。 2.2.3HLA-DR2组等位基因：DRB1*1501与神经精神症状正相关，与狼疮细胞阳性负相关；DRB1*1502与血小板减少正相关，均分别P0.05，Pc0.05。 2.2.4HLA-DR52组等位基因：DRB3*0202与蛋白尿负相关；DRB30301与蛋白尿和血尿均呈负相关，均分别P0.05，Pc0.05。 2.2.5HLA-DR52相关组等位基因：DRB10302与淋巴细胞减少和管型尿正相关；DRB1*1101与蛋白尿负相关；DRB1*1202与血小板减少正相关，均P0.05，Pc0.05。 表1HLA-DR和DQ等位基因与SLE临床指标的相关性 等位基因 临床指标 N1/N2 N3/N4 2值 P值 Pc值 DQA1*0101 淋巴细胞减少 10/6