



全文预览已结束
下载本文档
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
生物学实验常用技术一、分子方面1、基因工程1)PCR(Polymerase Chain Reaction)(二楼PCR仪器全部会用)2)RT-PCR;Q-PCR3)琼脂糖凝胶电泳;胶回收4)酶切/链接5)转化6)固体/液体 LB培养基配制(高压蒸汽灭菌锅使用方法)7)质粒大/小抽原理及步骤(手提、溶液I、II、III作用)8)基因组DNA抽提9)RNA提取;2、蛋白质工程1)蛋白收集(蛋白裂解液+PMSF;1Loading 裂解(推荐)2)SDS-PAGE(电泳胶的配制)2)考马斯亮蓝染色,银染3)Western blot4)蛋白定量常用的方法及原理,以及熟练操作Bradford法蛋白定量(TRIZOL法原理、注意事项及步骤)二、细胞方面1)细胞培养、传代2)细胞冻存与复苏 冻存液配制: (1)DMSO:血清=1:9(推荐)(2)DMSO:培养基:血清=1:3:6 均可DMSO为细胞专用型;现用现配,效果最好;冻存时细胞在-80中不要超过一周,最好在24-48h内放入液氮罐中保存。3)细胞培养基配制(过滤除菌)、胰酶配制(过滤除菌),PBS配制(灭菌);(不同培养基的区别;谷氨酰胺(提供氮源),2周补充一次)4)转染5)MTT原理及操作(检测细胞存活率或死亡率)6)碱性磷酸酶实验(ALP,检测细胞分化)(5、6 需学会SPSS软件及graphpad prism5软件使用)7)Hoechst染色8)结晶紫染色(不推荐)9)苏木精/伊红染色(9可以替代8,以后实验推荐使用9,图片漂亮)10)荧光显微镜的使用11)激光共聚焦显微镜样品制备(细胞固定,染色,洗脱)(7、8、9、10、11需学会Photoshop常用工具处理数据)12)流式细胞仪样品制备(包括:转染效率和细胞凋亡染色标记)以及仪器操作(需学会FlowJo软件分析流式结果)三、动物实验1)小鼠的定制:常见的小鼠:ICR小鼠(正常),9元/只BalB/C小鼠(正常),30元/只SD大鼠(正常),30元/只裸鼠(免疫缺陷小鼠),80元/只NOD SCID小鼠(免疫三缺陷),250元/只其中前四种是常用的,最后一种以后可能会用到。浙江中医药大学:小鼠品系齐全,可提供以上小鼠静脉注射,提供体内原位成瘤手术;杭州师范大学:NOD SCID品系小鼠没有,不提供裸鼠静脉注射,不提供体内原位成瘤手术。2)小鼠成瘤(熟练皮下成瘤操作);3)肿瘤测量(游标卡尺测量;IVIS测量(推荐,前体要构建Luc细胞系)4)慢病毒转染构建稳转Luc癌细胞系5)小鼠的腹腔注射、瘤内注射以及ICR小鼠的尾静脉注射6)小鼠尾部和眼球取血7)小动物活体成像仪的原理及使用方法8)小鼠解剖及组织固定电镜样品:2.5%戊二醛固定;免疫组化:10%的福尔马林或4%的多聚甲醛固定9)组织电镜样品的制备及TEM的使用(每个样品400,额外每张TEM照片5元)10)免疫组织切片样品的制备(蜡块制备25元;HE染色15元
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 2026届福建省厦门市集美高中高三化学第一学期期中质量跟踪监视试题含解析
- 必修2化学能与热能课件
- 桃树高效栽培技术
- 器械规范清洗与医院感染控制
- 直播行业面试题库:银发直播岗位常见问题解答
- 细胞免疫监测技术
- 碳酸锂期货讲解
- 细胞中的糖类教学
- 微量泵的使用技术
- 2026届云南省临沧市临翔区元江民族中学化学高二上期末检测试题含答案
- 2025历年退役军人考试题库及答案
- 第一二单元月考综合试卷(试题)四年级上册数学沪教版
- 2025-2030中国土地估价行业标准体系完善与国际化发展研究
- 2025级新生军训开训仪式动员大会
- 2025年医院处方审核规范考核试题(附答案)
- 2025年天津市辅警招聘考试考试试题库附答案详解(黄金题型)
- 2025版旧房翻新基础装修合同范本
- 铅衣消毒管理办法
- 2025新村级后备干部考试题库(附含答案)
- 寄宿学校班主任培训课件
- 秋季肌肤护理课件
评论
0/150
提交评论