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文档简介

植物转基因及其安全性试题库一、名词解释1、PCR2、分子克隆工具酶3、基因沉默4、限制性核酸内切酶5、受体细胞6、穿梭质粒载体7、脉冲电场电泳法8、报告基因9、探针10、转基因生物11、选择标记基因12、核酸分子杂交13、同裂酶14、同尾酶15、星号反应16、质粒17、克隆载体18、表达载体19、cosmid克隆载体20、荧光定量 PCR22、转基因技术23、转基因食品24、DNA变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响。25、DNA复性:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构。26、退火:指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交链。27、质粒不亲和性:在没有选择压力的情况下,两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。28、转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。填空题1、核酸酶按其水解断裂核酸分子的不同方式,可分为两种类型:一类 ;另一类是 。2、寄主控制的限制与修饰现象由两种酶活性配合完成的,一种叫 ,另一种叫 3、大肠杆菌中纯化出了三种不同类型的DNA聚合酶,即DNA聚合酶I、DNA聚合酶和DNA聚合酶,它们分别简称为Pol、Pol和Pol4、Pol酶有三种不同的酶催活性,即5 3的聚合酶活性、53的核酸外切酶活性和35的核酸外切酶活性。5、在大肠杆菌的各种菌体中找到了许多种不同类型的质粒,其中已经作了比较详尽研究的主要有F质粒、R质粒和COL质粒。6、环形双链的质粒DNA分子具有三种不同的构型:SC构型;OC构型;L构型7、质粒DNA的复制类型:根据寄主细胞所含的拷贝数的多少,可将质粒分成两种不同的复制型:一种是低拷贝数的质粒,每个寄主细胞中仅含有13份的拷贝,我们称这类质粒为严紧型复制控制的质粒;另一类是高拷贝数的质粒,每个寄主细胞中可高达1060份拷贝,这类质粒被称为松弛型复制控制的质粒8、噬菌体的生命周期分为溶菌周期和溶源周期两种不同的类型14.DNA或RNA在杂交前,需将其转移到膜上,常用的膜有()和()。二、选择题1、下列有关基因的叙述,错误的是( )A蛋白质是基因表达的唯一产物 B 基因是 DNA 链上具有编码功能的片段C 基因也可以是 RNA D 基因突变不一定导致其表达产物改变结构2、基因工程的单元操作顺序是( )A 增,转,检,切,接B 切,接,转,增,检C 接,转,增,检,切D 切,接,增,转,检 3、下列各组专业术语中,含义最为接近的是 ( )A 终止子与终止密码子 B 基因表达与基因转译C DNA 退火与 DNA 复性 D 重组子与转化子4、根据酶切活性对盐浓度的要求,限制性核酸内切酶可分成( )A 2 大类 B 3 大类 C 4 大类 D 5 大类5、T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起,其底物的关键基团是( )A 2 -OH 和 5 P B 2 -OH 和 3 -PC 3 -OH 和 5 P D 5 -OH 和 3 -P6、下列有关连接反应的叙述,错误的是( )A 连接反应的最佳温度为 37 B 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%C 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mMD 连接酶通常应过量 2-5 倍7、下列各常用载体的装载量排列顺序,正确的是 ( )A Cosmid -DNA Plasmid B -DNA Cosmid PlasmidC Plasmid -DNA Cosmid D Cosmid Plasmid -DNA8、若某质粒带有 lacZ 标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入 ( )A 半乳糖 B 异丙基巯基 - 半乳糖苷( IPTG )C 蔗糖 D 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基 - -D- 半乳糖苷( X-gal )9、分子杂交的化学原理是形成 ( )A 共价键 B 离子键 C 疏水键 D 氢键10、噬菌体外包装目的基因片段的大小应为( )A.小于噬菌体DNA的50% B. 小于噬菌体DNA的75%C.大于噬菌体DNA的105% D.为噬菌体DNA的75%105%11.Klenow酶与DNA聚合酶相比,前者丧失了()活性A、5-3外切酶 B、5-3合成酶 C、转移酶 D、3-5外切酶12.下列试剂中,哪一种可以螯合Ca2离子()A、EDTA B、柠檬酸钠 C、SDS D、Tris13.DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口,下列对DNA连接酶的描述中,那项是正确的()A、将双链DNA分子中的5磷酸基团同3OH末端重新形成磷酸二酯键B、作用时不消耗能量C、需要Mn2+等二价辅助离子D、也可以连接RNA分子14.同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在,电泳时,它们的迁移速率是()A、LDNAOCDNASCDNA B、SCDNALDNAOCDNA C、SCDNAOCDNALDNA D、OCDNASCDNALDNA二、简答题1、何谓基因沉默,它的作用机制有哪些?2、设计PCR的引物应遵守哪些原则?3、用哪些方法可以检测转基因植物中的外源基因?4、试述作为克隆载体的DNA分子必须具备的条件。5、细菌质粒的一般生物学特性?6、什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影响?7、切口移位(nick translation)标记探针的主要步骤有哪些?8、植物基因转化系统的选择原则?9、限制性内切酶的识别特点10、影响限制性核酸内切酶反应效率的因素 11、Klenow酶的基本性质及用途。12、T4 DNA连接酶作用机制。13、柯斯质粒载体的特点以及柯斯克隆的理论依据。14、核酸凝胶电泳的基本原理15、DNA在琼脂糖凝胶中的迁移速率决定因素16、凝胶载样缓冲液的组成及其作用。17、表达载体的必备条件。18、什么是转基因食品的实质等同性原则,转基因食品安全检验的五项原则是什么?19、标记基因是什么,它有什么用处?标记基因涉及的安全性问题有哪些20、标记基因安全性评价的内容?21、基因工程诞生的理论基础是什么?是现代分子生物学领域理论上的三大发现和技术上的三大发明。理论上的三大发现:证实了DNA是遗传物质揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理遗传密码的破译和遗传信息传递方式的确定技术上的三大发明:限制核酸内切酶的发现与DNA切割DNA连接酶的发现与DNA片段的连接基因工程载体的研究与应用22、蓝-白筛选的原理?23、PCR的基本原理?三、论述题1、目前常用的转基因方法有哪些,各有何特点?2、植物转基因受体材料有哪些?试述选择受体细胞的原则。3、说明Sanger DNA测序法与Maxam-Gilbert的化学降解测序法原理与方法的异同点。4、试从基因工程本身的性质来分析基因工程

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