生物制品问答题.docx

1、简述在生物制品制备中选择原料时应遵循的原则选择原料时要遵循以下原则：原料来源丰富，产地接近，成本低；原料新鲜，其有效成分含量高并易于获得，其中杂质含量尽可能少，对原料中的杂质、异构体，必要时应进行相关的研究并提供质量控制方法；起始原料应质量稳定、可以控制，原材料应有来源、标准和供货商的检验报告，必要时应根据制备工艺的要求建立内控标准。2、试述在生物制品生产中实施GMP管理的目的和意义实施GMP，就是要从法制化的高度，要求药品生产企业对药品生产全过程进行全面的管理和严密的监控，防止生产中的污染、混淆和差错事故，革除生产上的不良习惯，从而保证产品质量和用药安全。我国加入WTO的今天，推行实施GMP具有十分重要的意义：实施GMP是我国医药产品进入国际市场的先决条件。WHO“国际贸易药品质量签证体制”中规定出口药品的生产厂家必须按照GMP规定进行生产，并接受进口国药政管理部门按GMP要求进行监督检查。国产药品要走向世界，要参与国际市场的竞争，就必须严格实施GMP。实施GMP是企业及其产品增强竞争力的重要保证。在市场竞争越来越激烈的形势下，产品质量是企业赖以生存的法宝。实施GMP，遵守GMP的条款，才能保证药品质量稳定地符合规定的标准，从而提高产品信誉，增强企业竞争能力。实施GMP，才能使药品质量得到最大限度的保证，才能保障人民安全用药，这是企业对人民的安全与健康高度负责精神的具体体现。3、在基因工程工作中，体外重组目的基因的载体需具备哪些条件？有多种限制性内切酶的酶切位点，便于目的基因的插入，并且在酶切重组后，仍能保持复制子的功能（即插入外源基因后不影响质粒的复制）；有选择性标记，如耐抗生素特性，最好为具双重标记的质粒，当外源DNA插入其中一种标记时产生插入失活，有效地帮助鉴别重组质粒；能在寄主细胞内自我复制，稳定地遗传，便于重组DNA分子的制备；具有能在原核或真核细胞中表达的基因转录和翻译的特异核酸序列，便于表达目的基因产物；具有较低的分子量和较高的拷贝数，操作起来简单方便（拷贝数是指在标准的培养条件下，每个细菌细胞中所含有的质粒DNA分子的数目）。4、试述生物制品包装的作用1）保护内装物（1）防止劣化变质（2）防止破损 （3）防止浸入或泄漏2）方便使用（1）单元化包装（2）多剂量包装（3）组合包装 3）构成商品，促进销售4）物流合理化5、试述微生态制剂的作用机制1）补充优势菌群，恢复肠道微生态平衡 2）参与生物防御屏障结构 3）生物夺氧作用4）营养作用 5) 改善微环境，促进三流运转6、对制备生物制品的生物反应器有哪些基本要求？ 生物反应器必须具备如下一些基本要求：制造生物反应器所采用的一切材料，尤其是与培养基、细胞直接接触的材料，对细胞必需无毒性。生物反应器的结构必须使之具有良好的传质、传热和混合的性能。密封性能良好，可避免一切外来的不需要的微生物污染。对培养环境中多种物理化学参数能自动检测和控制调节，控制的精确度高，而且能保持环境质量的均一。可长期连续运转，这对用于培养动植物细胞的生物反应器尤为重要。容器加工制造时要求内面光滑，无死角，以减少细胞或微生物的沉积。拆装、连接和清洁方便，能耐高压蒸汽清毒，便于操作维修。设备成本尽可能低。7、简述疫苗的基本性质1、免疫原性2、安全性3、稳定性8、简述疫苗中抗原的作用及构成抗原的基本条件 抗原是疫苗最主要的有效活性成分，它决定了疫苗的特异免疫原性。免疫原性和反应原性是抗原的两个基本特性。构成抗原的基本条件（1）异物性。（2）一定的理化特性（3）特异性9、简述氢氧化铝佐剂的作用机理Al（OH）3是目前最常用的人用佐剂，多年来已广泛用于多种生物制品，如白喉、破伤风类毒素，DPT三联疫苗，霍乱、流脑菌苗，狂犬、流感及乙肝疫苗等。铝佐剂的应用，不仅大大增强了疫苗的免疫原性和免疫持久性，而且可以减轻全身反应，尤其是对提纯的制品如类毒素、亚单位疫苗等，已经成为不可缺少的组成部分。Al（OH）3的功能主要是刺激机体的体液免疫反应，产生高效价的IgG和IgE抗体，激活TH2细胞，10、干扰素如何发挥抗病毒活性，具有哪些作用特点？1）抑制病毒繁殖IFN在同种细胞或机体内，对多种病毒（包括DNA病毒、RNA病毒、引起肿瘤的病毒或不引起肿瘤的病毒）都有一定程度的抑制作用。主要可以阻断病毒颗粒的复制，减少病毒量，使显性感染变成不显性感染，对一般病毒可以促进机体恢复，缩短病程。作用特点:1)间接性: 通过诱导细胞产生抗病毒蛋白等效应分子抑制病毒 2)广谱性:抗病毒蛋白是一类酶类，作用无特异性。对多数病毒均有一定抑制作用。3)种属特异性: 一般在同种细胞中活性高，对异种细胞无活性。4)发挥作用迅速: 干扰素既能中断受染细胞的病毒感染又能限制病毒扩散。在感染的起始阶段，体液免疫和细胞免疫发生作用之前，干扰素发挥重要作用。11、以乙肝疫苗为例简述基因工程亚单位疫苗的构建程序一般方法是：调整基因组合使之表达成颗粒结构，如将甲型肝炎病毒的整个编码区插入痘苗载体；在体外将抗原聚团化，包入脂质体或胶囊微球；加入有免疫增强作用的化合物作为佐剂。12、试述基因工程亚单位疫苗、基因工程载体疫苗和核酸疫苗的异同点基因工程亚单位疫苗又称生物合成亚单位疫苗或重组亚单位疫苗，主要是指将病原微生物的抗原基因用分子生物学方法分离，然后与载体DNA相连接，再经载体将抗原基因带进受体进行复制与表达，最后将基因工程表达的蛋白抗原分离纯化后制成的疫苗。构建基因工程亚单位疫苗的关键是选择合适的抗原基因和表达系统。利用微生物做载体，将保护性抗原基因重组到微生物体中，利用这种能表达保护性抗原基因的重组微生物制成的疫苗，称为载体疫苗，这种疫苗多为活疫苗，所以又称为基因工程减毒活疫苗。由于是活的重组体，所以用量少，抗原不需纯化，免疫接种后靠重组体在机体内繁殖产生大量保护性抗原，刺激机体产生特异免疫保护反应，载体本身可发挥佐剂效应。核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗，就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引发免疫反应。核酸疫苗技术作为一种新的免疫接种手段问世不久就在感染性疾病及肿瘤的防治中显示出巨大的潜力；对病毒、细胞内寄生的细菌和寄生虫所引起的传染病可能具有治疗性效果和重要的预防作用；并对自身免疫性疾病和过敏性反应等疾病具有免疫治疗作用。13、试从抗原组成、免疫机制及优缺点三方面比较传统疫苗中的减毒活疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗。项目减毒活疫苗灭活疫苗亚单位疫苗或成分苗抗原制备用减毒或无毒的全病原体作为抗原用化学或物理方法将病原体杀死以化学方法获得病原体的某些具有免疫原性的成分免疫机理接种后病原体在体内有一定生长繁殖能力，类似隐性感染，产生细胞、体液和局部免疫病原体失去毒力但保持免疫原性，接种后产生特异抗体或致敏淋巴细胞接种后能刺激机体产生特异性免疫效果优缺点接种次数少，反应小，免疫效果持久。但稳定性差，并应考虑减毒株的毒力返祖问题稳定性好，较安全。但反应较大，维持时间较短，一般要接种2-3次制品纯度较高，副反应小。但免疫原性弱，需添加佐剂，并需多次接种常用疫苗卡介苗、麻疹、脊髓灰质炎减毒活疫苗伤寒、霍乱、百日咳、乙脑灭活疫苗白喉、破伤风类毒素、A群脑膜炎球菌多糖疫苗14、简述目前人用炭疽疫苗的缺点现行的传统减毒活疫苗和铝胶吸附培养上清液疫苗的免疫保护效果虽然都还不错，但是还存在很多问题活疫苗生产用菌株的毒力不稳定活疫苗的免疫途径问题：人用活疫苗目前均采用划痕接种，划痕深浅，长短虽有要求，但在大面积接种时很难做到，不易保证足够的菌数进入体内，从而形响了免疫效果。疫苗接种的副反应都比较大。有效免疫保护力的持续时间比较短，需要每年进行加强性免疫接种。15、生产类毒素疫苗时，制造毒素用的培养基应符合哪几个方面的要求？A、能提供产毒所必须的成份；B、能调节影响产毒诸因素的平衡；C、能缓解对产毒有害物质的作用；D、能保护已经产生的毒素；E、不能含有对人有害或引起过敏反应的物质。16、试述AIDS疫苗研制的可行性（1）人体免疫系统在某些情况下能够控制HIV感染。（2）有些实验性HIV疫苗可以保护非人类灵长类动物免患艾滋病或艾滋病样疾病。（3）感染HIV-2可降低HIV-1感染的可能性。这提示HIV-2感染可能是自然筛选出的HIV-1疫苗。17、试述目前艾滋病疫苗研制存在的困难（1）HIV的基因变异率极高（2）HIV能建立潜伏感染并能在细胞间传播（3）HIV可直接侵犯免疫系统和中枢神经系统（4）尚缺乏能如实产生人类AIDS的HIV动物模型18、人血白蛋白是目前生产量最大，也是临床上应用最广泛的血液制品。试述白蛋白有哪些性质和功能特点决定了它在血液制品中的这种地位？白蛋白是血浆中含量最高的蛋白质，约占血浆总蛋白的一半多，因此，易大量、高纯度地提取。其分子量为66KD，等电点为4.7，产生的渗透压大而粘度低，是最有效的血容扩张剂。白蛋白分子是由单条肽链盘曲形成的球状分子，由610个氨基酸组成，链内半胱氨酸残基间有17个二硫键交叉链接，因而白蛋白分子的稳定性好。白蛋白的主要生物学功能1）维持、调节血液渗透压2）运输和解毒作用3）营养供给。19、分离纯化血浆蛋白时应考虑哪些原则？虽然蛋白质的分离方法很多，但分离的目的不一样，要求也不一样，由于血浆蛋白制剂在临床上用于预防和治疗疾病，所以要特别强调其安全性和有效性，在实际生产过程中要考虑以下原则。（1）分离过程中，被分离提纯的血浆蛋白要尽可能地保留天然理化和生物学性质。（2）分离过程能够最大程度地避免或排除病原微生物及其代谢产物的污染。（3）所采用的技术工艺要适应工业化规模生产，分离步骤力求简便，并要求低消耗，高产出。（4）从血浆中可同时分离出多种蛋白成份，符合血浆综合利用的原则。20、试述低温乙醇法分离血浆蛋白的原理及其优缺点（1）原理 在介电常数大的溶液中，蛋白质的溶解度大，在介电常数小的溶液中蛋白质的溶解度就小。乙醇能显著地降低蛋白质水溶液的介电常数，从而使蛋白质从溶液中沉淀析出。优点：操作相对简单，产量高，适宜工业化规模生产；乙醇沉淀血浆蛋白是在接近血浆溶液冰点温度下进行的，能使蛋白质的变性降到最低限度，保持其天然性质；低温、乙醇分离过程中有抑菌、去病毒作用，能有效地保障制品的安全性；可同时分离多种血浆蛋白成份，有利于血浆资源的综合利用；乙醇作为主要原材料，价格低廉，易于获得。缺点：应用低温乙醇法，需要相当规模的厂房，并需具备较大面积的低温操作车间及连续冷冻离心机等设备条件，投资规模比较大；工作人员需在相对低温的条件下操作，对身体健康不利；工业乙醇中潜在的污染物（如甲基乙基酮）会影响成品的安全性；某些敏感蛋白的生物学功能会因乙醇（即使是浓度极低）和低温而受损或破坏。21、简述白细胞介素-2的生物学活性IL-2是机体免疫调节网络中的核心物质，与其他细胞因子有协同和拮抗作用，共同调节机体免疫机能的平衡。除此之外还有其他重要功能。促T细胞增殖。促进自然杀伤细胞（NK）的活化、分化和增殖。诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的产生和繁殖。诱导淋巴因子活化的杀伤细胞（LAK）的产生。促进B细胞的增殖分化。与其他细胞因子协同作用。因此，对IL-2与各种细胞素的正负调节作用的研究将对免疫学基本理论和肿瘤治疗学的发展起重要作用。22、试述肿瘤的基因治疗原理与策略1）肿瘤基因治疗的原理（1）调节机体免疫系统（2）利用肿瘤细胞与正常细胞的差异对肿瘤细胞进行选择性攻击除了利用肿瘤细胞与正常细胞的天然差别进行基因治疗外，还可人为地改变肿瘤细胞的状态，如将HSV-TK 基因转染至肿瘤组织，使肿瘤细胞表达HSV-TK，将前体药物羟甲基开环鸟苷转化为对分裂细胞具有杀伤作用的代谢产物，从而特异性地杀伤肿瘤细胞。根据目的基因不同可将肿瘤基因治疗的策略分为以下几类。（1）导入抑癌基因（2）导入细胞因子基因（3）导入MHC抗原基因（4）导入自杀基因（5）导入耐药基因23简述基因治疗的必要条件选