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以琳生物以琳固定化D-氨基酸氧化酶D-氨基酸氧化酶(D-aminoacidoxidase，DAAO， EC.1.4.3.3)，是一种以黄素腺嗓吟二核昔酸(FAD)为辅基的氧化酶，分子量约 86kDa，由2个相同的亚基组成，每个亚基含一个铁原子。DAAO广泛存在于动物内脏及微生物中，主要有三种来源:三角酵母(Ttrigonopsis variabilis)、猪肾、腐皮镰抱霉(Fusrium solani).红酵母(Rhodotoola gracilis)和曲霉等。野生菌通常发酵水平低达不到实际应用要求，人们又试着利用基因工程手段将目标基因进行高效表达，早期研究大肠杆菌作为基因工程菌的宿主菌研究较多，从纤细红酵母(R.gracillis)、变异三角酵母(Tvariohli)、猪肾、链抱霉等获得的DAAO基因先后在大肠杆菌中进行了表达。MollaG从R.sraeiuis获得编码DAAO的1.2kb cDNA后，将其插入到表达载体pT7.7的多克隆位点的EcoR酶切位置上，得到重组质粒pT7-DAAO，将重组质粒转化至大肠杆菌宿主。Jorge Alonso等从Tvariahlia基因库获得1.2 kb的DAAO基因，用PCR突变去除其内含子克隆至表达载体pKK2332构建得到表达质粒pK-DAAO，然后转入E.coli的TGI表达，获得高表达菌株。Fantinato Sonia等在先前的研究基础上作了改进，将编码N端6个His的合成核昔酸插入到载体，得到pT7-HisDAAO重组质粒，然后转化至E.coli，使分离纯化更简便。自二十世纪八十年代由Invitrogen公司成功开发的毕赤酵母(Pichia pastoris)甲醇酵母表达系统以来，采用毕赤酵母表达的研究逐渐成为主流，Yu Jian通过PCR获得了1.26kb的DAAO基因，与甲醇酵母的表达载体pPIC3.5K构建了表达质粒pPIC3.5K-DAAO，用Sall酶切，使质粒线性化，然后转化至甲醇酵母，表达活力23000U/L。固定化GL-7-ACA酰化酶本产品由大肠基因工程菌发酵产生，通过分离、纯化，然后以共价键的形式结合到多孔性颗粒状高分子聚合物载体上，制成的固定化酶使用稳定性好，酶蛋白不易脱落。菌株:大肠杆菌E C号: 3.1.5.11外观: 浅黄或黄色颗粒 活性（28湿酶）: 60 U/g：颗粒大小:100-300m 固定化形式:共价键连接标准:企 标储存在4C，隔绝空气下，密闭储存用途：（1）催化将GL-7-A
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