细胞免疫荧光技术.ppt_第1页
细胞免疫荧光技术.ppt_第2页
细胞免疫荧光技术.ppt_第3页
细胞免疫荧光技术.ppt_第4页
细胞免疫荧光技术.ppt_第5页
已阅读5页，还剩12页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

细胞免疫荧光技术 实验目的 掌握免疫荧光技术的基本原理熟悉细胞免疫荧光技术的方法了解在免疫细胞化学技术中如何获得好的实验结果 实验原理 原位检测抗原抗体特异反应间接法 间接荧光抗体染色法示意图 Hela细胞 Vinculin 实验用品 试剂 固定液 4 PFA细胞通透 0 2 TritonX封闭试剂 10 正常山羊血清一抗 小鼠源抗Vinculin单克隆抗体二抗 AlexaFluor555标记的山羊抗小鼠IgGDAPI 4 6 二脒基 2 苯基吲哚 PBS洗涤缓冲液 PH7 4 材料 Hela细胞细胞培养皿仪器 荧光显微镜 实验步骤 一 细胞制备和细胞固定 实验步骤 二 细胞免疫荧光ICC染色 0 2 TritonX处理5min 封闭室温30min 4 过夜 37 1 2小时 37 5 10min 荧光显微镜观察 实验结果 三 观察 humanHeLacells 实验中应注意的问题 细胞不要铺的过密 60 70 防止细胞污染固定时间不要太长 一般10 30minTrionX处理时间不宜过长 膜蛋白可不必处理选择合适的封闭液二抗孵育后 一定要洗干净必要时用恒温摇床摇洗 1 免疫荧光技术2 免疫酶技术3 免疫亲和技术4 胶体金技术 标记物使抗体或抗原抗体复合物在各种显微镜下可见的物质 免疫细胞化学技术 免疫细胞化学技术注意事项 选择合适的方法材料要留好选择抗体选择标记酶封闭液的选择设定对照实验 思考题 检测Hela细胞中蛋白A定位情况 思考应选择什么方法 用什么仪器观察 疑难解答
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论