人参饮片炮制工艺及质量评价方法研究.doc

人参饮片炮制工艺及质量评价方法研究作者：张崇禧、刘刚、鲍建才、杨春花、刘育辰人参Panax gnseny C.A.Mey 系五加科人参属植物人参的干燥根，其根、茎、叶、花、果实均含有人参皂苷为其主成分。人参皂苷按化学结构可分为3类：即齐墩果酸(oleanolicacid)OA型，如Ro等；20s-原人参二醇（20s-Protopanaxadiol)PPD型，如:Ra1-3，Rbl-3，Rc，Rd，Rh2，Rg等；原人参三醇(20s-Pro-topanaxatriol)PPT型，如：Re，Rg1，Rg2，Rh1等。3种类型的人参皂甙均有广泛的生物活性。如抗肿瘤、抗心律失常、改善心肌缺血、抗氧化、清除自由基等。但单体的生物活性并不完全一致，有些甚至截然相反。例如人参皂苷Rg1具有中枢神经兴奋和抗疲劳性质，而人参皂苷Rb2具有抑制中枢神经活性和抑制应激引起的胃炎形成作用。 结合吉林人参道地品种，在统一研究方案和技术要求基础上，设立人参饮片GMP基地，做到不同炮制工艺技术的优选，不同工艺技术条件的优选，不同炮制设备优选，找出最佳工艺参数。制订人参饮片的操作规程（SOP）如颗粒饮片，超微粉饮片，单味药配方颗粒等服用方便的新型人参饮片，应用化学成分指纹图谱鉴别和主要成分的含量测定，可制订多个成分含量标准。使人参种植GAP与人参饮片炮制加工GMP紧密相联，做到人参生产，炮制贮藏，运输形成一条龙式的有机整体，减少异地贮存、运输而易污染。变质、损耗的弊病，确保人参饮片的质量。按“中药饮片炮制规范化研究”的实施方案及技术要求，按国家食品药品监督管理局颁布的中药饮片生产文号制的规定执行，以确保规范化和标准化的实施，迅速扩大规模化生产人参饮片。 人参药材、人参饮片和含有人参的中成药为人参产业的三大支柱，其中人参饮片生产为人参药材生产与中成药制备二者的中间环节。为了加速中药现代化的进程达到国际化中药标准，对人参饮片炮制工艺及质量标准研究，使制备的人参饮片安全、有效、稳定、可控并能规模化生产。在当今人们崇尚大自然，追求返朴归真的国际热潮中，人参不仅服务于国人，也必将走向世界，服务于全人类，已成为发展的必然趋势。我国已加人WTO，国内、国际市场竞争更加复杂激烈，对人参质量要求日益增高。随着我国医疗保险制度的改革深人，国人用人参治病和保健的意识和愿望逐渐增强，优质的人参饮片的需求量也与日俱增。目前人参饮片加工炮制生产不规范，多为小作坊式的加工，人参饮片市场流通混乱，伪劣假冒的人参饮片不时出现，严重降低了中医处方药和中成药的临床疗效，也影响了人参市场的竞争力，因此人参饮片生产的规范化、规模化、现代化及人参饮片质量的标准化急待解决。 目前，人参饮片难以达到规范化、标准化及生产。运输、使用、保管、携带“五方便”等要求。为此，如何寻求使人参饮片既能体现中医辨证施治精髓，又能适应现代社会需要的高效简便方法，则成为人参饮片应运而生的难得契机。人参饮片是在中药饮片面临种种问题的前提下提出的，临床应用的人参饮片，由于缺乏可靠的质量检测和监控手段，难免存在很多不确定性，给中药临床疗效带来一定影响。我们所研制的人参饮片的生产过程加强了原药材和饮片及其产品的真伪鉴别和质量控制，减少了产品批次间的差异，提高了卫生水准，延长了保质期，整体质量有大幅度提高，方便运输贮存及病人服用，利于提高临床疗效与适应现代生活需要；人参饮片高质量、大规模、集约化、标准化运作，在国家相关政策支持下，可大大降低成本，并能有效扼止假冒伪劣药品上市，保证人民用药安全有效，切实地将中医药的传统运作方式转换成一种安全有效、方便快捷、质优物美的现代医药。 1、预期目标 1.1 使制备的人参饮片安全、有效、稳定、可控，达到中药饮片国际标准。 1.2 提供吉林人参饮片质量标准和中英文评价报告：拉丁学名、药用部位、性状、气味、粒度、体积、密度、干燥失重、检测方法、主要成分、含量测定、薄层鉴别、化验成分、农药残留、有害元素、灰分、微生物（大肠杆菌、酵母菌和霉菌细菌总数）、药理作用、功效应用、指纹图谱、灭菌、包装、贮藏、运输。使用方法、保质期等。 1.3 该项目投产后，可变低值人参原药材产品为高附加值产品，价格提高35倍，使传统人参原药材产品向高新技术人参饮片产品转化。 1.4 本项目以市场需求为导向，以高新技术向现实生产力转化和推动产业发展为重点，改变目前我国人参市场以原料药材生产为主，传统人参产品滞销的局面。通过产品高科技化，使传统人参饮片产业升级，带动我国经济发展，从而实现人参产业化结构调整，培育新的经济增长点。 1.5 红参、生晒参、大力参和冻干参的最佳加工工艺及参数。2、主要研究内容、工艺路线、关键技术 2.1 研究内容人参饮片及对照品的制备研究，确定科学的人参饮片炮制加工方法和检测方法（重点为指纹图谱），使制备的人参饮片安全、有效、稳定、可控，达到人参饮片国际化标准。 2.2 工艺路线2.2.1 人参超薄片厚度为0.1mm 特点：人参超薄片在用量减少的的情况下保持或超过了传统饮片的疗效，且安全、稳定、可控。对保护人参资源促进中药现代化、产业化的进程具有十分重要的意义。 收集样品：分别收集不同产地、不同采收期的人参样品；样品鉴定：分别鉴定不同产地、不同采收期的人参样品； 趁鲜切制； 低温干燥； 微波灭菌或瞬间高热灭菌确保有效成分不被破坏； 包衣：以确保其卫生标准合格，质量稳定； 包装贮藏：对人参超薄片的灭菌、真空包装、低温贮藏进行研究，以确保其卫生标准合格，质量稳定；质量评价：利用比色法、薄层色谱-比色法、高效液相色谱法对人参超薄片进行人参皂苷等主要成分进行含量测定，一般成分检测，薄层鉴别和荧光鉴别。电泳鉴别，利用光谱（紫外、红外）技术和色谱（高效液相色谱法）技术对人参超薄片的指纹图谱进行研究，建立相应的指纹图谱，保证人参超薄片的质量。对人参超薄片进行药效药理毒理实验，制定质量标准； 对照品（标准品）的制备，用于质量评价； 对人参超薄片最佳制备工艺的研究，建立符合GMP管理规范要求的详细可行的SOP； 对人参超薄片活性组分稳定性、使用方法、安全性评价研究； 研究人参皂着积累动态，结合人参产量，确定最佳采收期。2.2.2 人参颗粒饮片 特点：颗粒饮片在用量减少的的情况下保持或超过了传统饮片的疗效，且安全、稳定、可控。对保护人参资源促进中药现代化、产业化的进程具有十分重要的意义。 收集样品：分别收集不同产地、不同采收期的人参样品（包括根、茎叶、花、果）； 样品鉴定：分别鉴定不同产地、不同采收期的人参样品（包括根、茎叶、花、果）； 低温干燥； 样品粉碎：采用超低温冷冻粉碎技术、粉碎样品。颗粒饮片粉碎粒度（直径）为0.5mm； 微波灭菌或瞬间高热灭菌确保有效成分不被破坏； 包衣：以确保其卫生标准合格，质量稳定； 包装贮藏：对人参颗粒饮片的灭菌、真空包装、低温贮藏进行研究，以确保其卫生标准合格，质量稳定； 质量评价：利用比色法、薄层色谱-比色法、高效液相色谱法对人参颗粒饮片进行人参苷昔等主要成分进行含量测定，一般成分检测，薄层鉴别和荧光鉴别、电泳鉴别，利用光谱（紫外、红外）技术和色谱（高效液相色谱法）技术对颗粒饮片的指纹图谱进行研究，建立相应的指纹图谱，保证人参颗粒饮片的质量。对人参颗粒饮片进行药效药理毒理实验，制定质量标准； 对照品（标准品）的制备。用于质量评价； 对人参颗粒饮片最佳制备工艺的研究，建立符合GMP管理规范要求的详细可行的SOP； 对人参颗粒饮片活性组分稳定性、使用方法、安全性评价研究； 研究人参皂苷积累动态，结合人参产量，确定最佳采收期。2.2.3 人参超微速溶饮片 特点：超微速溶饮片在用量减少的情况下保持或超过了传统饮片的疗效，且安全、稳定、可控。超微速溶饮片既保留了传统饮片的特点与优势，又避免了煎煮的麻烦且方便服用。对保护人参资源促进中药现代化、产业化的进程具有十分重要的意义。 收集样品：分别收集不同产地、不同采收期的人参样品（包括根、茎叶、花、果）； 样品鉴定：分别鉴定不同产地、不同采收期的人参样品（包括根、茎叶、花、果）； 低温干燥； 样品粉碎：采用超音速气流粉碎机、超低温冷冻粉碎技术、粉碎样品。超微粉饮片粉碎粒度（直径）为10m以下； 微波灭菌或瞬间高热灭菌确保有效成分不被破坏； 包衣：以确保其卫生标准合格，质量稳定； 包装贮藏：对人参超微速溶饮片的灭菌、真空包装、低温贮藏进行研究，以确保其卫生标准合格，质量稳定； 质量评价：利用比色法、薄层色谱-比色法、高效液相色谱法对人参超微速溶饮片进行人参皂苷等主要成分进行含量测定，一般成分检测，薄层鉴别和荧光鉴别、电泳鉴别，利用光谱（紫外、红外）技术和色谱（高效液相色谱法）技术对超微速溶饮片的指纹图谱进行研究，建立相应的指纹图谱，保证人参超微速溶饮片的质量。对人参超微速溶饮片进行药效药理毒理实验，制定质量标准； 对照品（标准品）的制备，用于质量评价； 对人参超微速溶饮片最佳制备工艺的研究，建立符合GMP管理规范要求的详细可行的SOP； 对人参超微速溶饮片活性组分稳定性、使用方法、安全性评价研究； 研究人参皂苷积累动态，结合人参产量，确定最佳采收期。2.2.4人参酥脆片 特点：有效成分不被破坏且溶出快，可在口中含化。 收集样品：分别收集不同产地、不同采收期的人参； 样品鉴定：分别鉴定不同产地、不同采收期的人参样品； 趁鲜切片； 低温冷冻干燥； 微波灭菌确保有效成分不被破坏； 包衣：以确保其卫生标准合格，质量稳定； 包装贮藏：对人参酥脆片的灭菌、真空包装、低温贮藏进行研究以确保其卫生标准合格，质量稳定； 质量评价：利用比色法、薄层色谱比色法、高效液相色谱法对人参酥脆片进行人参皂苷等主要成分进行含量测定，一般成分检测，薄层鉴别和荧光鉴别。电泳鉴别，利用光谱（紫外、红外）技术和色谱（高效液相色谱法）技术对人参酥脆片的指纹图谱进行研究，建立相应的指纹图谱，保证人参酥脆片的质量。对人参酥脆片进行药效药理毒理实验，制定质量标准； 对照品（标准品）的制备，用于质量评价； 对人参酥脆片最佳制备工艺的研究，建立符合GMP管理规范要求的详细可行的SOP； 对人参酥脆片活性组分稳定性、使用方法、安全性评价研究； 研究人参皂昔积累动态，结合人参产量，确定最佳采收期。2.2.5 人参配方颗粒（浓缩颗粒） 特点：人参传统入药是合煎（为避免其药效成分被其他药材吸附或干扰），所以将人参预先制成浓缩颗粒不存在合煎的争议问题。单味人参饮片浓缩颗粒以中医药理论为指导，以先进的工艺规范操作程序生产，且符合特定的质量标准，具有质量可靠、计量准确等优点，其科学性则大大提高，可有力保证其临床应用的安全有效，可使人参饮片的利用率显著提高，从而合理而有效地利用和节约了人参资源；人参饮片浓缩颗粒的生产过程，加强了原药和饮片及其产品的真伪鉴别和质量控制，减少了产品批次间的差异，提高了卫生水准，减轻了体积和重量，延长了保质期，整体质量有大幅度提高，方便运输贮存及病人服用，利于提高临床疗效与适应现代生活需要；人参饮片浓缩颗粒高质量、大规模、集约化、标准化运作，在国家相关政策支持，可大大降低成本，并能有效扼止假冒伪劣药品上市，保证人民用药安全有效，切实地将中医药的传统运作方式转换成一种安全有效、方便快捷、质优物美的现代医药。对保护人参资源促进中药现代化、产业化的进程具有十分重要的意义。 收集样品：分别收集不同产地、不同采收期的人参样品（包括根、茎叶、花、果）； 样品鉴定：分别鉴定不同产地、不同采收期的人参样品（包括根、茎叶、花、果）； 低温干燥； 样品粉碎：采用超音速气流粉碎机、超低温冷冻粉碎技术、粉碎样品为40目； 样品提取：分别选用适宜溶剂和不同提取方法对人参原药材及其加工品（包括根、茎叶、花、果）中的有效成分进行提取分离，高速离心、超滤。超声波、低温提取技术确保提取物有效成分不被破坏； 提取液浓缩：冷冻浓缩制成浸膏； 柱层析等方法去除人参提取物中农残和有害元素技术的研究； 低温干燥或喷雾干燥； 瞬间高热灭菌、微波灭菌确保有效成分不被破坏； 制粒（有必要可以包衣以确保其质量稳定）； 无菌包装或射线照射灭菌，以确保其卫生标准合格，质量稳定； 贮藏：低温贮藏人参浓缩颗粒； 质量评价：利用比色法、薄层色谱一比色法、高效液相色谱法对人参浓缩颗粒进行人参皂苷等主要成分进行含量测定，一般成分检测，薄层鉴别和荧光鉴别、电泳鉴别，利用光谱（紫外、红外）技术和色谱（高效液相色谱法）技术对人参浓缩颗粒的指纹图谱进行研究，建立相应的指纹图谱，保证人参浓缩颗粒的质量，对人参浓缩颗粒进行药效药理毒理实验； 对照品（标准品）的制备； 对人参浓缩颗粒最佳制备工艺的研究，建立符合GMP管理规范要求的详细可行的SOP。对人参浓缩颗粒活性组分稳定性、使用方法、安全性评价研究；研究人参皂苷积累动态，结合人参产量，确定最佳采收期。 2.2.6人参炒法 麸炒：将人参饮片与麦麸皮拌炒。麸炒性味甘平，具有和中作用。“麦麸皮制抑酷性勿伤上隔”故常用麦麸皮制补脾胃或作用强烈的药物，缓和药性，可缓和人参的燥热之性，增强人参补脾益肺之功效。 土炒：将人参饮片与灶新土拌炒，可增强补脾的功效并缓和药性。“陈壁土制，窃真气骤补中焦”。2.2.7人参炙法 蜜炙：将人参饮片与炼蜜拌炒，可增强人参补脾益气的功效。 酒炙：将人参饮片先拌酒后炒或先炒后拌酒。可杀酶保存皂苷并利于有效成分的溶出（助溶）。 醋炙：将人参饮片先拌醋后炒或先炒后拌醋，可使人参皂苷转化为次级苷或皂苷元，增强人参新的功能如抗癌等。上述炒法可用烘法代替。 2.2.8人参发酵 新鲜人