实验三 柠檬酸发酵实验附录.doc

图1 柠檬酸生物合成途径1. 柠檬酸鉴别1取少量试样，用直火炽灼，即缓慢分解，但不发生焦糖臭。2试样溶液用4.3氢氧化钠溶液调至中性，加硫酸汞溶液加热至沸。再加1滴0.1N高锰酸钾溶液，振摇，紫色即消退，并产生白色沉淀。3试样溶液用4.3氢氧化钠溶液调至中性，加过量的7.5氯化钙溶液，冷时无变化，煮沸，即发生白色颗粒状沉淀。在一部分中加4.3氢氧化钠溶液，沉淀不溶解，另一部分中加24盐酸，则溶解。4试样溶液用4.3氢氧化钠溶液调至中性，加过量的0.1N硝酸银溶液，即发生白色沉淀。白色沉淀能在硝酸或40氨溶液中溶解。取氨溶液于试管中，在水浴上加热至6070，管壁不显银镜。2. 柠檬酸含量测定1、NaOH标准溶液的标定NaOH易吸收水分及空气中的二氧化碳，因此，不能用直接法配制标准溶液。需要先配成近似的浓度的溶液再标定，标定使用邻苯二甲酸氢钾为基准物进行标定。以酚酞为指示剂，当滴定终点呈浅红色，半分钟内不退色，反应如下： KHC8H4O4+NaOH=KNaC8H4O4+ H2O2、柠檬酸的测定原理：根据酸碱中和原理，用碱标准溶液滴定试样液中的酸时，以酚酞为指示剂。当滴定至终点溶液呈浅红色，且30s不褪色时，根据滴定时消耗的标准NaOH溶液的体积，可算出试样中的总酸度。其反应式为：HOOCCHC(OH)(COOH)CHCOOH+3NaOHNaOOCCH2C(OH)(COONa)CH2COONa+3H2O三、实验用品榨汁机、小刀、碱式滴定管、试剂瓶、锥形瓶、移液管、量筒/烧杯、容量瓶、胶头滴管、洗耳球、洗瓶、水浴锅、铁架台、电子天平、玻璃棒、滤纸、0.1000mol/LNaOH溶液、邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示剂、柠檬式样、蒸馏水、四、实验步骤1、0.1000mol/LNaOH标准溶液的配制和标定 （1）称取固体NaOH约2.0 g放置在烧杯中，先加入100 mL蒸馏水将其溶解，再转移至试剂瓶中加水稀释至500ml，混匀，待标定。 （2）用减量法准确称取0.40.5g邻苯二甲酸氢钾3份，分别放入250ml锥形瓶中，加25mL蒸馏水溶解。（3）然后加1-2滴酚酞指示剂，用标定的NaOH溶液滴定至微红色，且半分钟不褪色即为终点，记录消耗NaOH溶液的体积。2、试样处理：取柠檬若干个，去皮、去柄、去核，切成块状，置于榨汁机中榨汁。称取榨得的柠檬汁20g（称准至小数点后两位）于洁净干燥的小烧杯中，用适量的蒸馏水定量地将果汁样洗人250mL容量瓶中，定容，摇匀，备用。3、滴定准确吸取25mL样液于250mL锥形瓶中，加25ml蒸馏水稀释。然后再加1-2滴酚酞指示剂，用NaOH标准溶液滴定至微红色，且半分钟不褪色。记录NaOH消耗的体积。五、计算公式CNaOH= w柠檬酸= M柠檬酸-柠檬酸的摩尔质量：192.14g/molMKHP-邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量：204.22g/mol六、数据记录与处理1、NaOH标准溶液的标定氢氧化钠标准溶液的标定测定次数m KHP质量/gVNaOH初读数/mlVNaOH终读数/mlVNaOH /mlCNaOH（mol/L）平均CNaOH（mol/L）绝对偏差|di|相对平均偏差/%2、柠檬酸含量的测定柠檬中柠