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文档简介
银杏采用种子直播,不仅出芽晚,还因其出芽率低,会造成严重缺苗,故多采用先催芽后播种的办法。具体做法是: 种子处理: 每年雨水节前后即可催芽育苗。自留的银杏种子多系带外面的浆果皮,催芽时必须先把浆果皮扒掉洗净,否则很难催出根芽;从外地购进的种子大多数已去掉浆果皮,因而存有不同程度的失水现象,催芽前先用二开八凉的温水浸泡一至半天,捞出后控净水份,再用高锰酸钾1000倍液浸泡10分钟杀菌,捞出后稍加风晾,即可人催芽坑催芽。 挖坑催芽:催芽坑宜选在背风向阳处,深30厘米宽50厘米,长度依据种子多少而定。坑上四周筑墙,北高35厘米,南高34厘米,东、西墙北高南低成斜坡状。种子人催芽坑时,一份种子拌23份黄沙。沙的湿度是:手插入沙内,手不沾带水,手攥沙能成团,不宜过湿或过干。种子与沙拌好后,放一层沙,放一层种子,但最上一层低于地平面不宜少于5厘米,上面再复盖23厘米厚的沙。坑上架以弓棚,覆盖薄膜,四周封严,保湿保潮。弓棚上,晚间加盖草苫子保暖,白天揭开草苫晒太阳。坑内的种子4至5天上下翻动一次,使坑内上下温度均匀,出芽整齐。1530天可催出根芽。当有30的种子开口长出白根时,先将根长1厘米左右的挑选出来播种,其余的再重新填入坑内继续催芽。 整畦播种: 播种前结合深翻整地施足优质圈杂肥和适量的二铵或复合肥(但不能施入碳酸氢铵和铁水,防烧伤根芽),每亩地撒35斤辛硫磷粉剂防治地下虫害。银杏喜土壤湿润,但又怕涝,所以播种畦要高出地面,畦面宽一米,畦与畦之间要留排水沟。在畦面开34厘米深的播种沟,把种子根芽朝下植入沟底,株距10厘米,上覆土2厘米,行距1617厘米。播种后,畦面宜盖地膜保温保潮如不盖地膜,每条播种沟上面再复盖23厘米厚的土埂以防风干,待种芽顶土时,再轻轻把土埂扒开。复盖地膜的到谷雨节后也要把地膜揭去,以使苗根下扎。 播种后注意松土、锄草、追肥、适时浇水,即可获得理想的苗木。 银杏苗木培育(Seedling Culture)一、播种育苗播种育苗是银杏苗木繁殖的主要方法之一,适用于银杏核用园、叶用园、花粉用园、材用林和园林绿化用苗及培育嫁接苗的砧木等,是银杏最基本的繁殖方式。其主要技术环节包括:1、种实采集与贮藏应选择品种优良、抗逆性强、速生、丰产、树龄在40100年之间的银杏植株为母树,待种实自然成熟落地后再进行采种。要求种实授粉良好、发育正常、粒大饱满、无病虫害。每公斤400粒以下的种子,胚发育好,胚乳大,当年生苗木生长量大;用每公斤400粒以上的小粒种子,产苗量大,当年生苗木生长量较小,但如加强肥水管理,第二年及以后的生长量也可以很快提高。由于银杏种子具有生理后熟作用,采收的种子需要经过一段时间的休眠才能发芽。种子采收后经过4050天,完成胚的生理变化和发育,达到生理成熟。处理技术是,使种子处在010,一般为27低温,以及湿润和适宜的通气条件下,才能促使迅速均匀发芽。银杏种子常用的贮藏方法有:(1)种实(带外种皮)贮藏:先将果实晾晒35天,待外种皮干皱后装入麻袋,放置于通风冷室待翌年春季播种。或用1份果实、2份含水量5%的河沙混合均匀后堆放在冷室内,堆高20厘米左右,每隔20天左右翻动1次,以利通风降温并调节基质湿度,河沙太干时,要洒水增加湿度,并随时检查,剔除霉烂种子。(2)种核沙藏:先将果实堆放成2030厘米高,上面覆盖稻草,经56天,待外种皮腐烂后洗净,然后将种子阴凉数天,使种子的含水量从50%降低到2025%,再以1份种子和3份河沙的比例混合均匀后后放置地窖贮藏。窖底先铺5厘米厚河沙,上面堆40厘米高混有河沙的种子,再盖上10厘米厚的河沙,每隔1米距离插入一小捆高梁秸以便通气。地窖周围要开沟排水。贮藏后要随时检查鼠害、干燥和霉烂等情况并及时处理。种子数量多,可以在室外地势较高和背阴的地方挖地窖进行贮藏。地窖宽、深各80厘米,长度根据种子数量而定。(3)风干贮藏:将种子放在1820条件下风干,使水分含量降至20%左右,与泥炭1:1的比例混合,再入在容器内,容器中心放一小捆塑料管,盖下垫一层0.5毫米厚的纸,目的是为了通气。容器内的湿度为40%,贮藏容器的室温保持34,相对湿度2527%。用这种方法贮藏种子,23年内种子发芽率仍可达70%左右。2、种核催芽催芽可以打破银杏的种核休眠,促进银杏早发芽,保证发芽迅速,出苗整齐,提高圃地发芽率,增加幼苗生长量。银杏播前催芽方法有多种,常用的方法主要包括室内恒温或变温催芽、室外温床催芽、加温催芽等。室内恒温催芽:即播前2030天,将沙藏过(或其他方法贮藏)的种核先用30温水浸泡24天,每天换温水1次,然后放人麻袋中保温保湿催芽,室温可控制在25左左右。变温催芽同恒温催芽一样也要用温水浸泡,但催芽时进行变温处理,即白天用2535的高温,夜间用510的低温。采用该法催芽1520天,银杏发芽率可达85以上。此外,还有先高温后低温的方法,即开始催芽的23天,用3035的高温,然后降至2030。室外温床催芽:即在室外背风向阳处,用木板或砖石做成温床,底层铺1015cm厚的细沙,或直接在高沙土苗床上,将种核混以湿沙或锯末(种沙比为l:3)铺在上面,上盖塑料薄膜(也可搭成小拱棚)或玻璃,晚间加盖草帘,经过l020天,种核大部分发芽。加温催芽育苗,是江苏邳州20世纪80年代普遍采用的银杏育苗技术,已取得良好效果。具体做法是:在播种前1015天将贮藏的种核从沙中筛出,用清水淘洗干净后直接催芽,室内贮藏较干的银杏种核要先放人30温水中浸泡13天,以种仁吸足水分为宜,捞出后进行催芽。加温催芽育苗的方法主要有:(1)温室加温催芽当种核数量较多时采用该法。宜选择保温性能好的房屋作临时催芽温室。催芽所用筐具应使用透水性能强的材料做成筐底。上种时先在筐底铺1层湿麻袋片,其上摊放45cm 厚的银杏种核,为了保湿,种核上面再盖1层湿麻袋片,然后立即加温催芽。刚开始时温度控制在3035,待少量种核出现裂口后,温度控制在2530。注意保湿,不时翻动,并用多菌灵杀菌防病,一般615天后,种核可全部发芽。(2)塑料大棚催芽管理措施与温室催芽基本相同,不同的是早上要及时揭开草帘以充分采光增温,晚间应及时覆盖草帘保温。温度控制在2530,如温度过高,超过35时,则要通风降温。(3)塑料小拱棚温床催芽当种核数量较少时采用该法。选地势稍高、排水良好、背风向阳的地方,挖宽100 cm、深30cm的地下温床。先在床底铺510cm湿沙或锯末,上盖1层草帘,草帘上铺45cm厚的银杏种核。为保持温度和湿度,应在种核上面再加盖l层麻袋片,然后在温床上搭一个高出地面50cm的拱形架,外用塑料薄膜封闭,管理措施与塑料大棚相同。催芽过程中,要注意保持相对稳定的温度和湿度,当种核陆续发芽时应及时拣种,以后每隔57天拣种1次,防止先发芽的种核霉烂。当大部分种核发芽时,可击破种壳大头继续催芽,加快催芽速度。恒温(25)和硝酸钾处理(0.1molL-1)对促进银杏种核萌发效果也很显著。以硝酸钾0.1molL-1、赤霉酸500mgL-1、磷酸氢二钠0.1molL-1处理种核能显著地促进胚根生长。南阳市林科所经试验提出,对银杏种核用0.05浓度920、1双氧水浸种24小时后直播,能显著刺激种核发芽、促进出苗整齐、提高出苗率,这不仅减少因种核霉烂所造成的浪费,而且省时省工,从而提高银杏播种育苗的生产效率,是一种有效的银杏播种催芽新途径。3、整地与做床整地宜在秋末冬初或早春,最好是秋季深翻土地,经过冬季冻垡和土壤的进一步风化,到春季再做床。春季整地前每公顷施以90晶体敌百虫75100kg,同时加入硫酸亚铁(黑矾)75150kg(碱性土用量大),在机耕时翻人土中、耙平,或稀释成5的水溶液喷洒床面,以毒杀地下害虫和抑制病菌的生长发育。整地时,结合深翻,施足基肥,宜施充分腐熟的有机肥75000150000kghm-2、复合肥1500kghm-2,避免施用新鲜有机肥或未经腐熟的饼肥。同时可对酸性土壤施用石灰,对碱性土施用硫磺,以调节土壤的酸碱度。苗床原则上为东西走向,长1020m,宽1.21.5m,高度视当地的气候条件而定。少雨的北方,宜采用平床或低床(低于地面1015cm);而多雨的南方,一般应采用高床(高出地面1020cm),步道宽2530cm,圃地的周围开设排灌沟渠。4、播种时期根据各地试验,除夏季外其余各季均可播种。但由于秋播、冬播的管理时间长,所以大部分地区采用春播。播种时间,南方为3月中下旬,北方为4月上中旬;未经长时间催芽的种子,则需提前l周以上。江苏省一般在3月中旬播种;干藏后水浸催芽或催芽不彻底的种子,则提前到2月底或3月初。5、播种量播种量按每公顷年产15万30万株计算,株行距(2030cm),需种核(每千克400600粒)375600kg。近年来,江苏邳州采用高密度育苗,播量达7501875kghm-2,当年每公顷产苗30万90万株,效果也很好。山东郯城林业局徐敏英等(2001)通过试验,发现l3年生银杏苗密度分别为每公顷62.5万株、31.3万株和15.6万株时,优质壮苗多,产值高。研究表明,对银杏种核采取加温催芽(温度控制在3035)、高密度播种(18002400kghm-2)等技术措施进行育苗,能有效地提高苗木的保存率、产苗量和经济效益。催芽过程中陆续发芽的种核要随拣随播,播时切除根尖23mm。试验证明,切断胚根的银杏苗其侧根数比对照植株的多1.39倍,侧根总长增加1.56倍,根幅扩大1.33倍,根系干重增加1.3倍(李家玉,1980)。6、播种方法银杏种核较大,播种育苗通常采用点播。播种前浇水1次,待土稍干后再开沟播种。开沟深度以23cm为宜。点播时,种核应南北放置,方向要一致,胚根向下,种尖横向,这样出苗率高,出苗快,幼苗粗壮。由于银杏幼芽顶土能力弱,覆土不能过厚,一般为23cm。北方如播种较早,以覆盖地膜或塑料拱棚,但要及时在地膜上打孔或去掉拱棚,以免烧苗。7、播种苗的管理银杏播种苗的管理是提高出苗率、产量和质量的关键。银杏幼苗怕高温、怕强烈阳光直射,需要温暖湿润的小气候。生产上应严格从该物种的生物学特性出发,加强松土除草、施肥、病虫害防治等田间管理,提高合格苗的比例。银杏属于喜光树种,但幼苗有一定的耐荫性。适当遮荫可减少直射光的照射、缓和高温对高生长的抑制作用、促进光合强度、增加土壤含水量、降低地表温度、提高出苗率。苗期一般施追肥34次,每公顷施尿素300450公斤,或磷酸二氢钾500600公斤。第一次在出叶34枚时,大约在5月中下旬;第二次在6月上中旬;第三次在7月下旬至8月上旬,最好将化肥溶解于水施入圃地中。在57月间,每月叶面喷肥一次,浓度:尿素为1%2%,复合肥为2%3%,但是要与土壤施肥隔开日期。银杏出苗后,蛴螬、金针虫等地下害虫危害较为普遍,常用90%的晶体敌百虫500800倍液在行间开沟灌注后覆土;或用1.5%乐果粉拌土,撒入行间沟中。雨后圃地积水,又遇高温,易生茎腐病,用40%的多菌灵敏800倍液,或70%的甲基托布津1000倍液在5月6月连续喷洒3次。二、扦插育苗 扦插育苗有利于加快苗木繁育速度,促进早实丰产和保持品种的优良特性。根据江苏昆山昆山县志记载,早在北宋末年即有银杏扦插容易成活的记载。1947年,美国新泽西州的Vermeulen就最早开始进行银杏雄株插条繁殖的系统研究,但直到1951年才由Teuscher首次报道成功。此后各国学者先后对银杏硬枝及嫩枝扦插进行了研究。20世纪50年代银杏插条繁殖技术引起国内许多人重视,至20世纪90年代初期这一技术在生产上得到推广应用。目前银杏的扦插育苗主要包括硬枝扦插和嫩枝扦插。1、硬枝扦插(1)采集穗条秋末冬初落叶后采条,或于春季扦插前57天结合修剪、嫁接采条。用于扦插的枝条要求无病虫害、健壮、芽饱满。穗条应采自30年生以下母树上的13年生枝条。据王秋明(1986)的试验,根部萌条极易成活,成活率可达100;实生树枝条的扦插生根率高于嫁接树;实生树以当年生枝条生根率最高,可达94,扦插枝条随着年龄的增加,生根率逐渐降低,即1年生2年生3年生;同一枝条上,中部比顶部扦插成活率高。(2)插穗剪截将枝条剪成1520cm长的插穗,每一插穗保证有3个以上的饱满芽,上切口为平口(有顶芽者不截),下切口为马耳形,剪面长1.52cm。将插穗按部位(梢部、中部和基部)的不同,分粗细以3050枝为l捆扎起来,芽的方向不能颠倒,下端要平齐。(3)插穗处理为了提高扦插的生根率,插穗均要进行激素处理。山东省莱州市林业局谭日升等(2000)试验认为,应用100mgkg-1ABTl处理插穗,可显著提高扦穗的生根率和苗木成活率。江西省都昌县林业局詹太虎等就PRA生根剂对银杏硬枝扦插效果进行了研究,结果表明,以PRA7(1:9)浸泡2小时成活率最高,达91。据中国科学院植物研究所北京植物园的试验,用吲哚丁酸(IBA)从100500ppm做一组处理,结果表明,100ppm浓度溶液处理生根率达98%,根的平均长度为3.32 厘米。(4)基质和插床准备基质:常用的基质有细河沙、蛭石、珍珠岩、沙壤土、沙土等。不论何种基质,在扦插前务必进行药剂消毒。插床:除了圆形插床外,多数情况下插床为长方形,一般长1020m,宽11.2m。插床底部铺10cm厚、直径0.51cm的小石子或碎砖块,再填入3040cm厚的扦插基质。插前l周用0.20.5的高锰酸钾溶液消毒,使用药液量为510kgm-2,最好与0.20.5的甲醛液交替使用。喷药后用灭过菌的塑料薄膜封盖起来,48小时后用清水清洗23次,即可扦插。(5)扦插以春插(34月份)为主。江苏泰兴一般在3月中下旬,利用塑料拱棚进行春插的可适当提前。扦插时先开沟,或用扦插锥打孔,插入插穗,地面露出12个芽,压实基质,插穗端不能悬空。株行距为10cm(2030)cm。使用营养袋扦插时,需刺穿营养袋的底部,以利于根系穿出。(6)插后管理插后管理主要抓住以下几个环节:全光照自动间歇喷雾扦插池及时适量喷水:露地扦插,除扦插后立即透灌水1次外,若遇连续晴天,则要早晚各喷水1次,保持田间持水量60一80,1个月以后逐步减少喷水次数和喷水量。插床的灌溉设施有多种,目前全光照自动间歇喷雾装置被广泛应用于银杏扦插繁殖生产中,这种装置成本相对较低,具有经济适用、便于管理和扦插成活率高等优点。遮阴:有条件的以塑料大棚遮阴为好,也可搭遮阴棚。追肥:56月份插穗生根后,用0.1的尿素或0.2的磷酸二氢钾液进行根外追肥,1520天1次,也可用薄粪水(粪:水l:10)浇地。病虫害防治:用0.2%的呋喃丹兑水喷洒防治地下害虫,用敌杀死3000倍液防治食叶害虫。6月份起每隔20天喷1次5%的硫酸亚铁液,预防茎腐病。移栽:露地扦插成活的幼苗,落叶后至翌年萌芽前可直接进行移栽。用塑料大棚等保护地扦插的,移栽前(插后7080天)需进行炼苗,具体措施为:逐渐减少喷水次数和喷水量;逐渐撤去上方遮阴物,增加透光率,直至全光照;增加通风次数和强度,降低湿度。炼苗时间为715天。研究表明,除温度与湿度外,光照条件是影响扦插苗生根的另一关键外部因素。银杏插穗在温、湿条件适宜的前提下,控制光照,抑制光合作用,可减缓芽、叶萌发生长速度,改变茎营养流向,使茎营养先供应枝条基部萌发幼根,促使插穗先生根后长叶,促进苗木成活和生长。湖南省通道侗族自治县应用物理学方法进行生态控光调节,改变了常规扦插先萌叶后长根的情况,使试验插穗的生根率和成活率达100,当年合格苗出圃率达90。2、嫩枝扦插嫩枝扦插也中绿枝扦插,大都是在保护地的条件下扦插,也叫保护地扦插。其主要技术环切包括:(1)采穗条嫩枝采条在6月下旬至8月上旬,半木质化1年生枝在8月中旬至10月份采条。母树为215年生的苗木和幼树的1年生枝。优良实生变异类型树上的当年生枝及嫁接树上的当年生枝也可作穗条,穗条粗度一般为0.51.0厘米左右。(2)插穗剪截与处理将上述穗条在室内剪成长1015cm、含34个芽、保留23片叶的穗穗,按基部、中部、梢部等部位的不同分别捆扎,每50枝1捆,下端平齐,放在1000mgkg-1生根粉或萘乙酸溶液中速浸(10秒钟)一下。研究表明,用ABT1生根粉以500mgkg-1药液速浸(5秒)后的生根率高达80,以l000mgkg-1药液速浸(5秒)后的生根率只有50。扦插时间以8月初半木质化嫩枝插穗生根率为高,可达100,7月份枝条由于木质化程度差,生根率低,只有50。(3)扦插一般采用直插,扦插深度为5cm左右。插后压实基质,并浇灌透水1次。插穗株行距为5cm10cm。为了保证苗床有较高的相对湿度,苗床用塑料小拱棚覆盖,拱棚上方搭遮阴棚,透光率保持在30左右。(4)插后管理扦插后要求基质的含水量保持在75左右,空气湿度保持在80以上,以棚顶塑料薄膜上积聚较多小水珠且水珠不掉落之状态为宜。根据天气情况,每天喷水数次:结合喷水,揭开塑料膜,使棚内通风透气,遇高温天气,中午要喷水12次以降温保湿。及时防病治虫。一般情况下,插后25天左右即可生根,1个月左右可进行炼苗。炼苗期间控制喷水次数和喷水量,增加通风次数和强度,逐步揭掉塑料薄膜。由于嫩枝扦插当年地上部分生长缓慢,抗性弱,不提倡当年移栽,到翌年春季移栽为好。为提高银杏扦插苗移栽成活率,河北农业大学任士福等(1999)采用缩小株距扩大行距的方法,其株行距为10cm40cm,每公顷24.9万株,扦插深度1015cm,当年移栽成活率由常规移栽的50提高到98,3年生成苗存活率由3040提高到95。三、 嫁接苗培育嫁接苗能保持母株的优良性状。嫁接育苗是银杏的主要育苗方法之一。明代邝潘的便明图篡中即有“以生子树枝接之,则实茂”的记载。说明中国自古以来对银杏树的嫁接技术早有认识和实践。自上世纪70年代末期,对于银杏接穗和砧木的年龄,嫁接方法和嫁接时期等,各地银杏产区都进行了大量的试验研究。自80年代初期,南京林业大学即在江苏泰兴、邳州等地开始建立优良品种知采穗圃和种质资源保存圃,对银杏优良品种的选育和推广工作,奠定了良好的基础。目前,银杏的嫁接方法很多,如劈接、切接、髓心形成层腹接、腹切接、合接、荞麦壳或皮下接、插皮接、插皮舌接,嵌芽接、丁字形芽接等均有较高的成活率。嫁接方式有层接、劈头接、双砧接、芽苗砧接和双芽苗砧接等。银杏嫁接的时间以春季为主,目前各地已逐步做到四季均可嫁接。嫁接时间与嫁接方法密切相关。春季嫁接,江苏泰兴多用荞麦壳或皮下接和插皮舌接。江苏吴县多用切接。山东郯城与江苏邳州等地多用插皮接、插皮舌接、双舌接、劈接、切接和嵌芽接。在夏秋季嫁接时,据江苏新沂的试验,用2年生当年移植苗,在6月上旬至7月中旬,用绿枝单芽劈接2年生当年生移植苗成活率可达91%,1年生当年移植苗成活率72%(庄振焕,1987)。李家玉在广西桂林地区的试验认为在9月上旬至10月中下旬用单芽腹切接、单芽髓心形成层腹接,效果良好。如接穗为顶芽则用切接,砧木以1-2龄,成活率最高。门秀元在山东郯城的试验认为,在8月下旬至9月中旬用腹切接最好,可用2-3龄砧木。在冬季嫁接时,一般在室内进行。卢秀姣的试验(1986)用2-3年生砧木,1-4年生接穗,室内劈接、切接和合接成活率达87.5%以上,以劈接效果最好,成活率达100%。徐庆春(1989)在山东郯城的试验,室内劈接和双舌接的效果最好。湖北大悟县夏店水保站的试验(1989),室内嫁接以劈接成活率最高。春季嫁接的时间,一般自3月中旬至4月上中旬,最晚可延至4月下旬。但江苏邳州的经验证明,春季嫁接应根据砧木离皮情况确定嫁接时期。砧大未离皮时可用劈接和切接。砧木离皮之后可用插皮接。砧木和接穗均离皮后可用插皮舌接,短枝方块套芽接、丁字型芽接等。山东郯城县春季嫁接普遍采用插皮舌接或双舌接。李家玉(1985)认为,春季用切接或劈接法,在1-2年生小砧木上进行单芽枝接,方法简单、成活率高。刘洪谔(1988)的试验,劈接、切接适用于1-2年生砧木,合接、腹接、插皮接适用于3-4年生砧木。广西植物研究所于1984年曾进行过银杏的双砧嫁接试验,浙江、广西、山东、天津等地也曾试验过用单芽劈接法进行双芽苗砧嫁接,均取得了一定的成功。上世纪60年代之前,江苏泰兴、吴县一带多用长穗大砧嫁接,砧木干粗要求6-10cm,接穗用2-3龄枝条,穗长16-20cm,带3-6芽,接后7-8年即可进入开花结实阶段。为节约材料,目前各地银杏产区已逐步改为短穗小砧嫁接。即用2龄砧木,1-2年生接穗,以插皮接、插皮舌接、荞麦壳式皮下接芽方法,一砧接2-4个接穗,接穗长6cm,带芽2-3个,嫁接后4-5年可进入开花结实阶段,极符合于早期丰产密植园的需要。广西桂林地区进一步采用单芽小砧嫁接(砧龄1年,接穗 用单芽,长仅2-2.5cm)也取得较好效果。由于银杏系果、材、叶、观赏绿化和林农间作的优良树种,因此,群众对银杏的嫁接部位和留干高度十分重视。如山东省郯城县以生产种子为主的银杏树,留干高度多在2m左右,材果兼用的银杏树则放任主干无限生长,前者采用劈头接,后者采用大枝层枝。江苏邳州农林间作的银杏树要求主干不低于2-2.5m。各地城乡道路所栽的银杏行道树要求主干不低于3m,而早实丰产密植园则要求主干高度为60-100cm,但也有主干在40cm以下者。反之,应根据栽培目的确定嫁接部位和留干高度,以避免造成不应有的损失。银杏苗的嫁接,无论采用哪种嫁接方法,在嫁接之后,对于嫁接部位应注意加强保护。露天嫁接一般采用套塑料袋的方法。但塑料袋易引起高温高湿通气不良,影响接后成活。江苏邳州等地采用塑料套袋内加贴吸水纸的办法取得很好的效果。嫁接后应及时除去接芽之下的萌蘖,保证水分和养分对接芽的集中供应。嫁接后应视接芽成活和生长状况及时松绑。大砧嫁接后的接芽生长较慢,松绑宜晚,小砧嫁接后的接芽生长较快,松绑宜早。江苏泰兴荞麦壳式的皮下嫁接,则需愈合组织全面覆盖砧木断面时才宜于松绑,时间约为8月下旬。短枝方块套芽接10天即可松绑。这防大风吹折接穗,江苏省邳州市在劈接或切接的同进,在接穗与砧木间用短绳套牢。大砧嫁接在新芽长达15-20cm时应架设支柱或扶竿。四、根蘖育苗利用银杏根蘖繁育苗木的方法是中国民间长期以来应用的一种最简便、最节约的方法。它不仅可以确定栽植苗木的性别而且可以保证品种的纯正。根据调查,中国各地寺院中的雌雄双株古老银杏,大部分是利用这一方法繁殖栽培起来的。银杏具有很强的根蘖萌发能力。只要银杏的地上部分受到强烈的的抑制,如切除大枝、嫁接换头、树体受伤、砍伐后的根桩等,均能在根际部分产生大量萌蘖。根据调查,在银杏壮年树上所发生的根蘖最强最旺,如不切除,则可形成银杏幼树,如山东曲阜孔庙中诗礼堂前的两株银杏,由于树体受伤所发生的根蘖,大小高矮错落有致,形成了较好的园林景观。凡由根蘖每繁殖的银杏苗木,较之播种繁殖的苗木,一般来说进入开花结实的时间可以提前。如江苏泰兴县宣堡乡农业科技推广站,1976年栽植了44株银杏根蘖苗,第5年(1980年)即有3株现花。广西兴安县高尚乡西岸桥北侧根蘖繁殖的银杏10年生即开花结果,12年生时产白果10kg。灵川县海洋乡根蘖繁殖的6年生银杏也开花结果。实践证明,用根蘖繁殖的银杏苗木,有利于早期丰产。银杏根蘖繁殖苗的培育通常有两种方法:一是利用大树发生的根蘖;二是在银杏大树周围挖沟断根促发新蘖,然后移栽。为了保证根蘖苗的顺利成活,江苏吴县的做法是,于移栽前一年的夏季(8月份)先在蘖苗基部进行环剥,环剥的宽度为0.5-1cm,在环剥处培土促发新根,翌年春季从母株切离进行移栽。山东郯城的经验认为:在切离根蘖时,如在根蘖苗基部能带上一块根皮,则更有利于根蘖苗的成活和旺盛生长。五、压条繁殖育苗根据调查,在浙江长兴、广西桂林等地曾采用过高空压条法繁殖银杏小苗。即在银杏树上选用2-3年生长枝。于早春树液流动之后,在枝条基部进行半环状剥皮,剥皮宽度约1cm,然后在剥皮处用黄泥和青苔包起,经一年后切离移栽。但此法费工费时,目前生产上已基本停止使用。六、银杏组织培养植物组织培养是将植物的器官、组织、细胞及原生质体等多种离体生活的有机体部分,在适宜的人工培养基和无菌条件下,进行培养,使其机体增殖(产生愈伤组织),并逐步分化出器官(芽、根),最终形成完整小植株的过程。由于植物组织培养繁殖周期短,繁殖速率高,因此具有广阔的应用前景。例如,一个优良单株或芽变,用常规方法只能达到每年十几倍到百倍的繁殖速度,用试管进行组织培养繁殖则可达数万倍,大大加快了良种的繁殖和推广速度。银杏组织培养从上世纪20年代即有人开始研究,根据外植体的来源和培养目的的不同,银杏的组织培养大致有器官培养、花粉培养及体细胞胚发生等。银杏组织培养室(一)、器官培养银杏的器官培养是指以银杏植物体的一部分(营养器官或生殖器官),例如根、茎段、叶、花、种实等作为外植体进行无菌培养。1、外植体的选取及消毒、接种、培养目前用以快速繁殖为目的银杏器官培养报道很多,其外植体主要选用茎段和种子胚,培养基的选取范围相当广,各种常用的培养基均有培养成功的报道。进行银杏组织培养时,要对外植体表面灭菌。对茎段培养,可将幼嫩枝梢剪去叶片,流水冲洗12小时,用滤纸吸干,在75%酒精中浸泡15秒,然后用0.1%多菌灵或10%漂白粉灭菌810分钟,用无菌水冲洗2次后,再用0.1%氯化汞灭菌810分钟,无菌水冲洗45次。在无菌条件下切成0.8cm左右的茎段,每茎段都带有1个节,节下的茎比节上的要长(两段长度比为21),每个试管中接种1个茎段。用种子胚或胚乳为外植体时,可将银杏种子去外种皮后阴干,剥去骨质中种皮后,依次用75%的酒精灭菌约30秒和0.1%HgCl2灭菌810分钟,无菌水冲洗45次,然后用无菌的滤纸吸去材料表面的水分,在无菌条件下取出材料,接种在培养基上。培养条件为:光照强度2000lx,光照时间为12小时/天,温度为26527。2、常用培养基及关键技术罗紫娟(1984)以银杏雌雄株上当年抽出的幼嫩茎梢的茎段为外植体,用改良的White+BA0.51.0mgL-1+NAA0.5 mgL-1+NH4Cl5.34 mgL-1和N6+2,4-D3.0 mgL-1+BA1.0 mgL-1+NAA1.0 mgL-1两种培养基进行培养,3天后产生愈伤组织,同时液芽开始生长。腋芽生长有两类,一类是簇生芽,另一类芽伸长很快,该无菌枝条可切成带1个节的茎段进行继代培养。3周后,N6培养基上的茎段在形态学下端愈伤组织处长根,形成完整植株。White培养基上诱导出芽率为83.12%,并能诱导生根。图6.2银杏组织培养示意图王洪善等(1997)以4个优良无性系的嫩茎为外植体,以附加生长素的WH、WPM、MS、N6和0号(只含蔗糖和琼脂)5种培养基进行离体培养,使外植体产生愈伤组织,分化诱导产生丛生芽和不定根,获得完整植株。其中,不同外植体腋芽的萌动率差异较大,N6-培养基萌动期最早,萌动率最高,且诱导愈伤组织能力最强。愈伤组织分化产生不定芽以N6+BA0.81.0 mgL-1+NAA0.81.0 mgL-1效果最好。无根苗在只有生长素的培养基上,无论其浓度高低均不生根。当生长素浓度适宜,附加一定量的细胞分裂素时,不定芽才能生根。这一点与其他报道不一致,可能是其外植体较为特殊的原因。不定根的诱导以N6+BA0.05 mgL-1+NAA0.71.0 mgL-1培养基的诱导率最高,可达58.8%66.7%。郝平岗等(2000)以40多年生的银杏雌雄株上当年生幼嫩枝条为外值体,以MS、改良MS(NH4NO3含量减半)、DCR为基本培养基,配以NAA、ZT、CH(水解酷蛋白)、Ade(腺嘌呤)等组成21种诱导顶芽和腋芽生长发育的培养基,以ABT(生根粉)、IBA、NAA等组成6种生根培养基进行培养。发现基本培养基的成分和含量对器官分化的影响很大,在改良MS培养基上腋芽萌动率和成苗率最高,降低培养基中的NH4NO3含量有利于银杏茎段腋芽的生长发育。Ade、NAA和ZT均促进腋芽愈伤化,抑制其萌动成苗,CH则可使腋芽萌动率普遍提高。生根试验中,只有MS+NAA0.1 mgL-1的培养基中有根形成,生根率为33.3%。以种子胚为外植体的组织培养中,罗紫娟(1984)将种子胚剪成23段,在White+2,4-D 5 mgL-1+NH4Cl 5.3453.49 mgL-1+LH200400 mgL-1培养基上培养,1015天后在胚轴的伤口上形成芽;转移到附加0.05%活性炭的上述培养基上,610天后生根,形成完整植株。在以非还原氮为惟一的氮源()的White培养基中适当增加NH4Cl与LH(水解乳蛋白),明显促进芽的形成,但高浓度的铵离子()具有抑制离体细胞生长的效应。陈耀华等(1988)以White+2,4-D mgL-1+NH4NO3均有促进银杏胚完成后熟的作用,且胚成苗率较高,达66%。罗言云等(1999)以成熟胚离体培养形成的无菌幼苗为外植体,发现茎段在1/2MS培养基上其腋芽的分化效果最好,培养35天腋芽即开始萌动,但在没有多效唑的1/2MS培养基上茎段腋芽则不能萌发。培养710天,嫩枝切口部位开始形成愈伤组织,50天后愈伤组织长根,80天后根可达12cm长。在生根培养中,1/2MS培养基上分化根最快,40天即可发根;但根的分化以White+根多壮2号(50%吲萘粉剂)培养基最好,生根率为90.3%。图6.3银杏茎段的组织培养1培养初期的茎段2茎的增殖3生根培养4完整的银杏小植株5、6茎段愈伤化综合以上研究可以看出,培养效果较好的培养基有White、N6、1/2MS及改良MS(NH4NO3含量减半),其共同特征是离子强度较低。植物生长调节物质以BA、NAA及激动素(KT)最为有效,其中NAA对外植体的分化影响最大。2,4-D、LH和能促进银杏胚完成后熟作用,LH、CH有利于外植体萌动和分化,低浓度生长素及活性炭的存在有利于生根。3、器官培养过程中的褐变及预防褐变是指在离体培养过程中,当培养物生长状态不良,培养条件恶化或细胞受到损伤、感染、辐射等作用后,其多酚化合物在多酚氧化酶的作用下发生氧化,组织逐渐变成褐色或黑色,最后培养物死亡。防止褐变是银杏组织培养中的一大难题。常用的防褐变方法有:添加抗氧化剂、调整培养基及改变培养环境等。常用的抗氧化剂有抗坏血酸(Vc)、植酸(PA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等。但是,基本培养基种类及外源激素对附加抗氧化剂控制褐变能力影响很大。抗坏血酸在White培养基中具有控制褐变的功效,但培养物生长慢,效果不及在MS培养基中显著。细胞分裂素BA或KT有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。以MS为基本培养基,用ZT代替BA,即在MS+NAA2mgL-1+ZT2mgL-1+ Vc5 mgL-1上培养的银杏材料(茎段、种子胚)生长正常,没有褐变。0.1%和0.05%的PA可以促进银杏愈伤组织生长,控制褐变,但PA附加在White中远不如在MS培养基中效果好,不同激素组合也影响PA效果的充分发挥,其中以BA与NAA配合效果最好。用2,4-D代替NAA或用KT代替BA效果均较差。此外,一些天然有机物也有防褐变功能。(二)、花粉培养在离体条件下,花粉的发育常常离开在体内时的正常轨道(发育为成熟的生殖细胞),而通过分裂增殖,形成愈伤组织或最终形成胚。1、花粉发育时期检查根据培养目的,为提高花粉培养效果,选择合适的花粉发育期很重要。一般四分体以后,花粉细胞发育进入单核时期比较容易分裂增殖。培养前,可在显微镜下进行花粉发育期的检查。2、接种花粉的消毒取成熟但还没有开裂的银杏花粉囊作为外植体,将其浸入75%酒精中消毒20秒,再放入1.5%次氯酸钠溶液中消毒30秒,用无菌水冲洗3次后用无菌纸吸干即可接种。每年可用于实验研究的新鲜银杏花粉只有710天时间。因此,可将花粉囊进行表面消毒后贮藏于铝质小杯内,再放入4的微型干燥器内,供全年使用。贮藏2年后的花粉仍能保持35%40%的生活力。3、培养条件培养基可选择改进的White培养基、Tulecke(1960)培养基等,植物生长调节剂用IAA或NAA,浓度为0.21.0 mgL-1。培养室的温度要求在2425之间,每天光照1214小时,光照强度为2000lx。4、主要培养基及关键技术最早的银杏花粉的组织培养是用添加马铃薯汁的White培养基,于1951年5月进行,随后观察有花粉组织的生长。在花粉的培养中还观察到有精子细胞的形成(Tulecke,1957)。管细胞核通常分裂形成有隔膜的花粉管细胞或者含有2040个核的多核配子体管细胞。不活动的原叶细胞和分裂相对不频繁的生殖细胞表明这一组织是由管细胞分裂来的。离体花粉较植物活体内花粉发育表现出更强的多态性,其发育可分为3个明显的阶段:管细胞的扩散生长;顶端生长(可能伴随着分枝);配子体的径向膨胀。蔗糖浓度强烈影响花粉组织的形态发育。高浓度蔗糖抑制配子体的顶端生长及分枝,低浓度蔗糖有助于其表现出与活体内相似的发育模式。银杏花粉诱导的组织在液体培养基中生长良好。在710L连续培养体系中培养,当其处于最大生长速率时,培养3周时就可获得80g FWL-1的组织。银杏花粉培养于含有微量元素棚及不含棚的培养基上,培养物在没有硼的培养基上停止了生长。硼的含量少于1mgL-1(0.10.005 mgL-1)时,细胞壁上的碳水化合物减少。紫外线抑制花粉组织生长,蓝光可解除这种抑制,在白色荧光灯下组织的生长较在黑暗或白炽灯下减少40%。(三)、体细胞胚发生培养在正常情况下,精子与卵结合形成合子,合子发育成胚,胚再进一步发育成完整植株,这一类似过程也可通过培养植物各种组织,如茎切段、下胚轴、子叶、叶片、叶柄、花芽、根、离体胚、胚乳等经分裂增殖,产生出与胚相似的结构。这种胚与合子发生的胚在起源上有所区别,因而称之为体细胞胚、不定胚或胚状体。体细胞胚的发生和发育极为复杂,不同植物和在不同培养条件下,其表现形式又多种多样,因此,至今对体细胞胚的发生机制尚未完全弄清。目前已对近50
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